剖检诊断，并选择在大鼠和小鼠的组织和样品收集
Summary
本文介绍了进行基本的鼠标或大鼠尸检的程序，以及收集的基本器官，以及更多具有挑战性的样品类型，病理，微生物，和PCR评价。
Abstract
有多个样品，可以收集从安乐死的动物，以帮助诊断或发现的动物群中的传染性病原体的类型。妥善收集进一步组织处理的组织可能会影响测试结果的质量。本文介绍了一个基本的总检查，包括识别心，肝，肺，肾，和脾，以及如何收集这些机关的行为。另外四个较困难的组织/样品采集技术演示。龙收集和灌注可以特别具有挑战性的组织需要正确的膨胀，在组织内部的秩序固定液适当的修正，以便彻底的组织学评价。本文演示了由一步一步的技术，以实现在24小时内组织的最佳固定删除肺和固定液膨胀。脑集合可以用同样的挑战，组织是软的，容易损坏。本文演示了通过一步一步的技术，从颅骨与脑组织损害最小的揭露和消除。肠系膜淋巴结是一个很好的样本类型，在其中发现许多常见的传染性病原体为肠道病毒持续在淋巴结，比他们在粪便棚。本文演示的定位，并在无菌条件下取出肠系膜淋巴结的一步一步程序。最后，呼吸道传染性病原体的鉴定可以由鼻腔和/或吸在剖检支气管液的细菌培养或PCR测试。此过程介绍了获取和准备进行细菌培养和PCR检测呼吸道吸出样品。
Protocol
1。剖检的准备工作任何总尸检（总尸检）的重要组成部分，是动物的历史和调查结果的描述。 一个兽医病理学家读您的组织病理学幻灯片可能没有见过的动物，是靠你的背景资料。 准确描述你所看到之前安乐死的动物。例如，“雌性小鼠在笼子里五之一; C57BL/6N;头部倾斜的权利”或“棕色的雄性大鼠应变未知;动物刮伤;有斑片状脱发足背附近的尾巴，和头“。 使用清…
Discussion
在研究结束的数据收集可能需要的动物尸检。说明什么是见过，记得检查所有的组织。这些程序设计主要是为了优化剖检传染病的监测和样品采集，但最容易适应怀疑疾病的事件或聘用爆发也许只是一个程序的一个子集，将重点调查。很多手续也较常用在研究结束时，作为一个整体形态再加上收集特定的研究样本以供后续分析评估的一部分进行验尸有关。
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Reagent name | Company | Catalog number | Comments |
|---|---|---|---|
| Cutting board | Thermo Electron Corp Cat #36114 | Cat #36114 | |
| Small scissors | ROBOZ | RS-5910, G204 | 23mm blades, 3.5″ length, straight |
| Medium scissors | ROBOZ | RS-6808, G207 | 5″ |
| Large scissors | ROBOZ | RS-6826, G65″ | 6.25″ |
| Forceps-Curved | ROBOZ | RS-8254 (M1/21004) | 4.5″, serrated, slight curve |
| Forceps-Microdissecting | ROBOZ | RS-5238 | Hudson-(EWALD) |
| Forceps-Tissue Forceps | ROBOZ | RS–8160 | Rat tooth |
| Flame sterilizer | Oxford Labware Products | Bacti-Cinerator #5889-001007 | |
| Scalpel | Cancer Diagnostics, Inc. | Finger Scalpels #60, Cat#FS0060 | |
| Pipettes | VWR | Pasteur Pipet 5 3/4″, Cat#14672-400 | |
| Autoclave bags | Propper Manufacturing Company | Sterilizer Bag Paper Pouches Cat#021002(3100923)E09110 | For Pasteur pipettes |
| Pipette bulb | VWR | Cat#56310-240 | |
| Eppendorf tubes | Sarstedt | SafeSeal microtube 2mL, Ref#72.695 | |
| Eppendorf tubes | Argos | 5mL microtube Cat#T20765-C | |
| Syringe | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910 5ml-309603 10mL Cat#309604 20mL Cat#309661 | |
| Needles | BD | 26G-309625 18G-305195 | |
| Neutral buffered formalin | VWR | 20L 10% NBF, Cat#16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Blood Bank Saline, Cat#23-309-178 | |
| Trypticase soy broth | Becton Dickenson | TSB: Dehydrated, Cat#211825 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma Aldrich | HA Buffer, Cat#P3813-10PAK | |
| Formalin cups | VWR | 4oz Cat#36318-852 8oz Cat#36318-860 16oz Cat#36318-858 | |
| Large formalin cups | OakRidge Products | 32oz container Cat#0432-1100 | |
| Extra large formalin cup | VWR | HDPE Multipurpose 160oz container Cat#89038-282 | |
| Suture material | Henry Schein | Braided silk surgical suture, Ref#100-5000, M766750 | For mouse lung inflation |
| Twine | Staples | Cat#QUA-46173 | For rat lung inflation |
References
- AVMA. . AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. . Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. . The Necropsy Book. , (2006).
- Kittel, B. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 2. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 413-431 (2004).
- Komarek, V., Fox, J. G. Chapter 1. The Mouse in Biomedical Research. , 1-22 (2007).
- Morawietz, G. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 3. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 433-449 (2004).
- Popesko, P., Raijtová, V., Horák, J. . Colour Atlas of Anatomy of Small Laboratory Animals. 2, 91-106 (2002).
- Ruehl-Fehlert, C. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–part 1. Exp Toxicol Pathol. 55, 91-106 (2003).
Cite This Article
Parkinson, C. M., O’Brien, A., Albers, T. M., Simon, M. A., Clifford, C. B., Pritchett-Corning, K. R. Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice. J. Vis. Exp. (54), e2966, doi:10.3791/2966 (2011).