Diagnostiska obduktion och Selected Tissue och Provtagning på råttor och möss
Summary
Den här artikeln beskriver förfaranden för utförande av en grundläggande obduktion undersökning av en mus eller råtta, och insamlingen av grundläggande organ, liksom mer utmanande typer prov från för histologisk, mikrobiologiska, och PCR utvärdering.
Abstract
Det finns flera provtyper som kan samlas in från ett avlivas djur för att hjälpa till att diagnostisera eller upptäcka smittämnen i ett djur koloni. Korrekt insamling av vävnader för vidare histologisk bearbetning kan påverka kvaliteten på testresultaten. Denna artikel beskriver genomförandet av en grundläggande grov undersökning inklusive identifiering av hjärta, lever, lungor, njurar och mjälte, samt hur man samlar in dessa organ. Dessutom fyra av de svårare vävnaden / provtagning tekniker demonstreras. Lung insamling och perfusion kan vara särskilt utmanande eftersom vävnaden måste rätt lufttryck med ett fixativ för att insidan av vävnad för att fixa rätt sätt och för att möjliggöra noggrann histologisk utvärdering. Den här artikeln visar steg för steg metod för att ta bort lungorna och blåsa det med fixativ för att uppnå optimal fixering av vävnaden inom 24 timmar. Brain samlingen kan vara lika utmanande eftersom vävnaden är mjuk och skadas lätt. Den här artikeln visar steg för steg metod för att avslöja och ta bort hjärnan från skallen med minimal skada på vävnaden. Den kröslymfknutor nod är ett bra exempel typ som att upptäcka många vanliga smittämnen som magsaftresistenta virus kvar längre i lymfkörtlar än de fälls i avföring. Den här artikeln visar steg för steg för att lokalisera och aseptiskt bort kröslymfknutor noden. Slutligen kan identifiering av smittämnen i luftvägarna utföras av bakteriekultur eller PCR-testning av nasal och / eller bronkial vätska aspirat tas vid obduktion. Denna procedur beskriver erhålla och förbereda luftvägarna aspirera prov för bakterieodling och PCR-testning.
Protocol
Discussion
Datainsamling vid slutet av en studie kan kräva en obduktion undersökning av djur. Beskriv också vad som ses och kom ihåg att undersöka alla vävnader. Dessa procedurer har utformats främst för att optimera obduktion och provtagning för infektionssjukdomar övervakning, men de flesta är lätt anpassas till riktade undersökningar av misstänkt sjukdom incidenter eller utbrott där kanske endast en delmängd av de förfaranden som skulle användas. Många av de förfaranden som är relevanta även för obduktion…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Reagent name | Company | Catalog number | Comments |
|---|---|---|---|
| Cutting board | Thermo Electron Corp Cat #36114 | Cat #36114 | |
| Small scissors | ROBOZ | RS-5910, G204 | 23mm blades, 3.5″ length, straight |
| Medium scissors | ROBOZ | RS-6808, G207 | 5″ |
| Large scissors | ROBOZ | RS-6826, G65″ | 6.25″ |
| Forceps-Curved | ROBOZ | RS-8254 (M1/21004) | 4.5″, serrated, slight curve |
| Forceps-Microdissecting | ROBOZ | RS-5238 | Hudson-(EWALD) |
| Forceps-Tissue Forceps | ROBOZ | RS–8160 | Rat tooth |
| Flame sterilizer | Oxford Labware Products | Bacti-Cinerator #5889-001007 | |
| Scalpel | Cancer Diagnostics, Inc. | Finger Scalpels #60, Cat#FS0060 | |
| Pipettes | VWR | Pasteur Pipet 5 3/4″, Cat#14672-400 | |
| Autoclave bags | Propper Manufacturing Company | Sterilizer Bag Paper Pouches Cat#021002(3100923)E09110 | For Pasteur pipettes |
| Pipette bulb | VWR | Cat#56310-240 | |
| Eppendorf tubes | Sarstedt | SafeSeal microtube 2mL, Ref#72.695 | |
| Eppendorf tubes | Argos | 5mL microtube Cat#T20765-C | |
| Syringe | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910 5ml-309603 10mL Cat#309604 20mL Cat#309661 | |
| Needles | BD | 26G-309625 18G-305195 | |
| Neutral buffered formalin | VWR | 20L 10% NBF, Cat#16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Blood Bank Saline, Cat#23-309-178 | |
| Trypticase soy broth | Becton Dickenson | TSB: Dehydrated, Cat#211825 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma Aldrich | HA Buffer, Cat#P3813-10PAK | |
| Formalin cups | VWR | 4oz Cat#36318-852 8oz Cat#36318-860 16oz Cat#36318-858 | |
| Large formalin cups | OakRidge Products | 32oz container Cat#0432-1100 | |
| Extra large formalin cup | VWR | HDPE Multipurpose 160oz container Cat#89038-282 | |
| Suture material | Henry Schein | Braided silk surgical suture, Ref#100-5000, M766750 | For mouse lung inflation |
| Twine | Staples | Cat#QUA-46173 | For rat lung inflation |
References
- AVMA. . AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. . Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. . The Necropsy Book. , (2006).
- Kittel, B. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 2. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 413-431 (2004).
- Komarek, V., Fox, J. G. Chapter 1. The Mouse in Biomedical Research. , 1-22 (2007).
- Morawietz, G. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 3. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 433-449 (2004).
- Popesko, P., Raijtová, V., Horák, J. . Colour Atlas of Anatomy of Small Laboratory Animals. 2, 91-106 (2002).
- Ruehl-Fehlert, C. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–part 1. Exp Toxicol Pathol. 55, 91-106 (2003).
