Tanı Otopsi ve Sıçanlar ve Fareler Seçilmiş Doku ve Örnek Toplama
Summary
Bu makale, bir fare veya sıçan bir temel postmortem muayene yapılması için usul ve toplama temel organlarının yanı sıra, histolojik, mikrobiyolojik ve PCR değerlendirilmesi için daha zorlu örnek türleri açıklanmaktadır.
Abstract
Teşhis veya bir hayvan koloni enfeksiyöz ajanlar keşfetmek yardımcı olmak amacıyla bir ötenazi hayvan toplanan olabilir birden fazla örnek türleri vardır. , Daha fazla histolojik işlem için dokuların doğru toplanması, test sonuçlarının kalitesini etkileyebilir. Bu makale, kalp kimlik, karaciğer, akciğerler, böbrekler, dalak, yanı sıra bu organların nasıl toplamak da dahil olmak üzere temel bir brüt muayene davranış açıklanmıştır. Ayrıca dört daha zor doku / numune toplama teknikleri gösterilmektedir. Doku doku içinde sırayla düzgün bir şekilde düzeltmek için ayrıntılı bir histolojik değerlendirme ve etkinleştirmek için bir fiksatif ile şişirilmiş olması gerekir gibi Akciğer toplama ve perfüzyon özellikle zor olabilir. Bu makale, fiksatif ile akciğer dokusunun en iyi fiksasyon 24 saat içinde ulaşmak için kaldırmak ve şişirmek için adım adım tekniği ile göstermektedir. Beyin dokusu yumuşak ve kolayca zarar toplama benzer zor olabilir. Bu makale, minimal doku hasarı ile kafatası beyin ortaya çıkarmak ve kaldırmak için adım adım tekniği ile göstermektedir. Mezenterik lenf nodu Enterik virüsler lenf nodu onlar dışkı döken daha uzun süre devam ettiği çok yaygın bulaşıcı ajanların algılamak için iyi bir örnek türüdür. Bu makale, bulma ve aseptik mezenterik lenf nodu kaldırılması için adım adım prosedürü göstermektedir. Son olarak, solunum yolu enfeksiyon ajanlarının belirlenmesi, burun ve / veya bronşiyal nekropsi az sıvı alınması aspiratlarda bakteriyel kültür veya PCR testi yapılabilir. Bu prosedür, solunum aspirat örneği almak ve bakteriyel kültür ve PCR testi için hazırlanıyor açıklamaktadır.
Protocol
Discussion
Veri toplama bir çalışmanın sonunda hayvanların postmortem muayene gerekebilir. Görülen şeyin iyi tanımlamak ve tüm dokularda incelemek unutmayın. Bu prosedürler, öncelikle nekropsi ve örnek toplama bulaşıcı hastalık gözetim için optimize etmek için tasarlanmıştır, ama en kolay prosedürleri belki de yalnızca bir alt kümesini istihdam olacağı hastalık şüphesi olayları ya da salgınlar odaklı araştırmalara uyarlanmıştır. Prosedürlerin çoğu aynı zamanda daha yaygın bir sonraki an…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Reagent name | Company | Catalog number | Comments |
|---|---|---|---|
| Cutting board | Thermo Electron Corp Cat #36114 | Cat #36114 | |
| Small scissors | ROBOZ | RS-5910, G204 | 23mm blades, 3.5″ length, straight |
| Medium scissors | ROBOZ | RS-6808, G207 | 5″ |
| Large scissors | ROBOZ | RS-6826, G65″ | 6.25″ |
| Forceps-Curved | ROBOZ | RS-8254 (M1/21004) | 4.5″, serrated, slight curve |
| Forceps-Microdissecting | ROBOZ | RS-5238 | Hudson-(EWALD) |
| Forceps-Tissue Forceps | ROBOZ | RS–8160 | Rat tooth |
| Flame sterilizer | Oxford Labware Products | Bacti-Cinerator #5889-001007 | |
| Scalpel | Cancer Diagnostics, Inc. | Finger Scalpels #60, Cat#FS0060 | |
| Pipettes | VWR | Pasteur Pipet 5 3/4″, Cat#14672-400 | |
| Autoclave bags | Propper Manufacturing Company | Sterilizer Bag Paper Pouches Cat#021002(3100923)E09110 | For Pasteur pipettes |
| Pipette bulb | VWR | Cat#56310-240 | |
| Eppendorf tubes | Sarstedt | SafeSeal microtube 2mL, Ref#72.695 | |
| Eppendorf tubes | Argos | 5mL microtube Cat#T20765-C | |
| Syringe | BD (Beckton Dickenson) | 1ml-309602 3 ml-300910 5ml-309603 10mL Cat#309604 20mL Cat#309661 | |
| Needles | BD | 26G-309625 18G-305195 | |
| Neutral buffered formalin | VWR | 20L 10% NBF, Cat#16004-128 | |
| Saline | ThermoScientific | Buffered Blood Bank Saline, Cat#23-309-178 | |
| Trypticase soy broth | Becton Dickenson | TSB: Dehydrated, Cat#211825 | |
| Phosphate buffered saline | Sigma Aldrich | HA Buffer, Cat#P3813-10PAK | |
| Formalin cups | VWR | 4oz Cat#36318-852 8oz Cat#36318-860 16oz Cat#36318-858 | |
| Large formalin cups | OakRidge Products | 32oz container Cat#0432-1100 | |
| Extra large formalin cup | VWR | HDPE Multipurpose 160oz container Cat#89038-282 | |
| Suture material | Henry Schein | Braided silk surgical suture, Ref#100-5000, M766750 | For mouse lung inflation |
| Twine | Staples | Cat#QUA-46173 | For rat lung inflation |
References
- AVMA. . AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
- Feldman, D. B., Seely, J. C. . Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , (1988).
- King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. . The Necropsy Book. , (2006).
- Kittel, B. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 2. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 413-431 (2004).
- Komarek, V., Fox, J. G. Chapter 1. The Mouse in Biomedical Research. , 1-22 (2007).
- Morawietz, G. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–Part 3. A joint publication of the RITA and NACAD groups. Exp Toxicol Pathol. 55, 433-449 (2004).
- Popesko, P., Raijtová, V., Horák, J. . Colour Atlas of Anatomy of Small Laboratory Animals. 2, 91-106 (2002).
- Ruehl-Fehlert, C. Revised guides for organ sampling and trimming in rats and mice–part 1. Exp Toxicol Pathol. 55, 91-106 (2003).
