ويستخدم فحص أنبوب تشكيل لتقييم نشاط الأوعية الدموية للخلايا السرطانية.
Abstract
على مدى العقود العديدة الماضية ، وهي مقايسة تشكيل باستخدام أنبوب عامل نمو مخفض تم Matrigel يعملون عادة للتدليل على النشاط عائية من خلايا بطانة الأوعية الدموية في المختبر1-5. ومع ذلك ، فقد أظهرت أدلة متزايدة مؤخرا ان لا يقتصر هذا الاختبار لاختبار سلوك الأوعية الدموية للخلايا بطانة الأوعية الدموية. بدلا من ذلك ، كما تم استخدامها لاختبار قدرة عدد من الخلايا السرطانية لتطوير النمط الظاهري الأوعية الدموية 6-8. وهذه القدرة بما يتفق مع سلوكهم مكون للأوعية التي تم تحديدها في الحيوانات xenotransplanted ، وهي عملية تعرف باسم مكون للأوعية المحاكاة (VM) 9. هناك العديد من الأدلة تثبت أن الخلية السرطانية بوساطة VM تلعب دورا حيويا في تطوير الورم ، ومستقلة عن الأوعية الدموية الخلية البطانية 6 ، 10-13. على سبيل المثال ، تم العثور على الخلايا السرطانية للمشاركة في الدم perfused ، وتشكيل قناة الأوعية الدموية في عينات من الانسجة من المرضى سرطان الجلد وورم أرومي دبقي 8 ، 10 ، 11. هنا ، وصفنا هذا الاختبار شبكة أنبوبية ، باعتبارها أداة مفيدة في تقييم نشاط مكون للأوعية من خلايا الورم. وجدنا أن بعض خطوط الخلايا السرطانية مثل سرطان الجلد B16F1 خلايا ورم أرومي دبقي U87 خلايا ، وسرطان الثدي MDA – MB – 435 الخلايا قادرة على تشكيل الأنابيب الأوعية الدموية ، ولكن البعض لا مثل سرطان القولون HCT116 الخلايا. وعلاوة على ذلك ، فإن هذا النمط الظاهري الأوعية الدموية تعتمد على الأرقام الخلية مطلي على Matrigel. لذا ، قد يكون هذا الفحص بمثابة أداة قوية لفحص الأوعية الدموية المحتملة لمجموعة متنوعة من أنواع الخلايا بما فيها خلايا الأوعية الدموية ، والخلايا السرطانية فضلا عن خلايا أخرى.
Protocol
1. تشكيل الأنبوبة Matrigel القائم على الفحص لتقييم نشاط الخلايا السرطانية مكون للأوعية ونمت الخلايا السرطانية في الدماغ مثل U87 الخلايا خلايا سرطان الجلد B16F1 ، وسرطان الثدي MDA – MB – 435 ، وخلايا سرطان القولون في HCT116 DMEM تستكمل م?…
Discussion
من أجل هذا الاختبار أن تنجح ، يجب اختبار نوعية Matrigel الأولى. ويمكن الحصول على عينة صغيرة من العلوم البيولوجية دينار بحريني إلى ما قبل تشغيل الفحص باستخدام HMVECs. قد منتجات مختلفة دفعة عرض الصفات التي تختلف بعض الكثير لا توفر شرط الأمثل لتشكيل الأنبوب. ثانيا ، ينبغي تجنب ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل لجنة التحقيق الوطنية R01 CA120659 (RS).
Francescone III, R. A., Faibish, M., Shao, R. A Matrigel-Based Tube Formation Assay to Assess the Vasculogenic Activity of Tumor Cells. J. Vis. Exp. (55), e3040, doi:10.3791/3040 (2011).