एक ट्यूब Matrigel आधारित संरचना परख ट्यूमर कोशिकाओं के Vasculogenic गतिविधि का आकलन
Summary
एक ट्यूब गठन परख ट्यूमर कोशिकाओं के संवहनी गतिविधि का मूल्यांकन करने के लिए प्रयोग किया जाता है.
Abstract
पिछले कई दशकों में, एक ट्यूब गठन परख विकास का उपयोग कर कारक कम Matrigel आम तौर पर 1-5 इन विट्रो में संवहनी endothelial कोशिकाओं की angiogenic गतिविधि का प्रदर्शन करने के लिए नियोजित किया गया है. हालांकि, हाल ही में बढ़ती सबूत से पता चला है कि इस परख के endothelial कोशिकाओं के लिए संवहनी व्यवहार का परीक्षण करने के लिए सीमित नहीं है. इसके बजाय, यह भी ट्यूमर कोशिकाओं के एक नंबर की क्षमता के लिए एक संवहनी 6-8 phenotype के विकास का परीक्षण किया गया इस्तेमाल किया गया है. यह क्षमता अपने vasculogenic xenotransplanted जानवर, एक vasculogenic अनुकरण (VM) 9 के रूप में जाना जाता प्रक्रिया में पहचान व्यवहार के साथ संगत किया गया था . सबूत के एक भीड़ का प्रदर्शन है कि ट्यूमर सेल की मध्यस्थता VM के ट्यूमर के विकास में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, endothelial सेल 6 angiogenesis, 10-13 से स्वतंत्र है. उदाहरण के लिए, ट्यूमर कोशिकाओं को रक्त, मेलेनोमा और glioblastoma 8 रोगियों, 10, 11 से perfused ऊतकों के नमूनों में संवहनी चैनल गठन में भाग लेने के लिए पाए गए. यहाँ, हम ट्यूमर कोशिकाओं की vasculogenic गतिविधि के मूल्यांकन में एक उपयोगी उपकरण के रूप में इस ट्यूबलर नेटवर्क परख वर्णित है. हमने पाया है कि B16F1 कोशिकाओं मेलेनोमा, U87 कोशिकाओं glioblastoma, और स्तन कैंसर की कोशिकाओं को एमडीए MB–435 के रूप में कुछ ट्यूमर सेल लाइनों संवहनी tubules के रूप में कर रहे हैं, लेकिन कुछ ऐसे बृहदान्त्र कैंसर HCT116 कोशिकाओं के रूप में नहीं. इसके अलावा, इस संवहनी phenotype सेल Matrigel पर मढ़वाया संख्या पर निर्भर है. इसलिए, इस परख शक्तिशाली संवहनी कोशिकाओं, ट्यूमर कोशिकाओं के रूप में अच्छी तरह के रूप में अन्य कोशिकाओं सहित सेल प्रकार की एक किस्म की संभावित नाड़ी स्क्रीन उपयोगिता के रूप में सेवा कर सकता है.
Protocol
Discussion
इस परख को सफल करने के लिए आदेश में, Matrigel की गुणवत्ता पहली बार परीक्षण किया जाना चाहिए. एक छोटा सा नमूना बायोसाइंस BD से प्राप्त किया जा सकता है पूर्व HMVECs का उपयोग परख रन. विभिन्न बैच उत्पादों भिन्न गुणों में ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
यह काम NCI R01 CA120659 (राज्यसभा) द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| DMEM | Invitrogen | 11995 |
| FBS | Invitrogen | 16000-044 |
| Growth factor-reduced Matrigel | BD Bioscience | 47743-720 |
| EBM2 kit | Lonza | CC-3156 |
| Nikon ECLIPSE TS100 microscope | Nikon |
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