في هذا المقال أن نبرهن عزلة الفئران خلايا الرئة المقيمين الجذعية الوسيطة (MSC الرئة) ، توسعها ، وتوصيف وتحليل الخصائص المناعية.
أنسجة الخلايا الجذعية الوسيطة المقيمين (MSC) ومنظمات هامة لاصلاح الانسجة أو التجديد ، والتليف ، والتهاب الأوعية الدموية ، وتشكيل الأورام. معا هذه الدراسات تشير إلى أن المقيمين MSC الرئة تلعب دورا خلال توازن النسيج الرئوي ، وإصلاح الضرر خلال الأمراض مثل التليف الرئوي (PF) وارتفاع ضغط الدم الشرياني (PAH). نحن هنا وصف التكنولوجيا لتعريف السكان المقيمين للجنة السلامة البحرية الرئة. تعريف هذه الفئة من السكان في الأنسجة الرئوية فيفو به تحديد وضع علامات يسهل عزل المتكررة من السكان الخلايا الجذعية جيدا يتميز التدفق الخلوي ودراسة نوع خلية معينة والوظيفة.
وقد تكيفت لدينا الطريقة التي استخدمت في البداية لتحديد الخلايا المكونة للدم BM لعزل السكان محددة للجنة السلامة البحرية الرئة المقيمين. نظرا لاستنساخ من العزلة ثم كانت تتميز هذه الخلايا وكذلك لجنة السلامة البحرية. وقد تم تحديد مصدرها والمقيمين في الرئة الماوس الكبار (في مقابل BM المشتقة) والتشكيل المظهري والجزيئي موثقة 2. القدرة على عزل هذه الفئة من السكان مرارا تتميز يسمح للمزيد من الدراسة على أهمية بيولوجية ودور لجنة السلامة البحرية خلال توازن أنسجة الرئة والأمراض. تعريف الاخيرة من هذه الفئة من السكان في الجسم الحي في النسيج الرئوي والبشرية على حد سواء الفئران يسهل وضع استراتيجية علاجية تستهدف إنقاذ الخلايا الذاتية لتسهيل إصلاح الرئة خلال الاصابة والمرض.
The authors have nothing to disclose.
وقد تم تمويل هذا العمل عن طريق منح لSMM : آها GIA0855953G ، NIH HL091105 1R01 – 01. وقدم دعم إضافي من قبل : DW : NIH RO1DK075013 ، DDK ومؤسسة Kleberg ، والتدفق الخلوي UCCC الأساسية (NIH 5 P30 CA 46934-15) ، وUCCC ميكروأري الأساسية (NCI P30 CA 46934-14).
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
---|---|---|---|
Phosphate buffered saline (PBS) | Sigma | P-5368 | |
Hanks buffered salt solution (HBSS) | Thermo Scientific | SH30588.01 | |
0.2% Worthington type 2 collagenase | Worthington Biochemicals | LS004202 | |
Red blood cell lysis buffer | eBiosciences | 00-4333-57 | |
DMEM | Invitrogen Gibco | 11965-092 | |
Hoechst 33342 dye | Sigma | B2261 | |
CD45-APC | BD Pharmingen | 559864 | |
Propidium iodide | Sigma | 81845 | |
a-MEM | Thermo Scientific | SH30265.01 | |
FBS | Invitrogen | 16000-069 | |
0.5% trypsin/EDTA | Cellgro | 25-053-Cl | |
Complete MesenCult Medium | Stem Cell Technologies | 05511 | |
0.4% w/v Giemsa staining solution | Sigma | GS1L | |
4% paraformaldehyde | Electron Microscopy Services | 15710 | 16% paraformeldehyde is diluted to 4% using PBS |
Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) | Sigma | 21888 |