Summary

同所性マウス脳腫瘍モデルのコンビネーション放射線治療

Published: March 06, 2012
doi:

Summary

この記事の目的は、放射線研究のための同所性神経膠芽腫モデルの使用を記述することです。この資料では、注入、セル処理かかわらず移動して、頭蓋モデルを用いてマウスの放射線治療になります。

Abstract

多形性膠芽腫(GBM)は1、最も一般的で積極的な成人の原発性脳腫瘍である。近年、そこに腫瘍浸潤のメカニズムの理解にかなりの進展が、腫瘍の直接の脳内接種では、生理学的に適切な環境2で侵襲的なプロセスを観察する機会を提供しています。限り人間の脳の腫瘍が懸念されるとして、現在利用可能な同所性モデルは、複雑な開頭手術から3腫瘍の固体片の細胞懸濁液または注入の定位注射のいずれかによって確立されています。我々の技術では、脳に直接注入するのに用いられた細胞懸濁液を作成するために組織培養から細胞を収穫します。手術時間は約30分で、マウスが一定の外科的平面にする必要があるため、注射麻酔薬が使用されます。マウスがStoetling(図1)によって行われた定位ジグ内に配置されます。船尾にER外科領域を洗浄し、準備し、切開が行われている、そしてブレグマは、開頭の位置を決定するために位置しています。開頭の位置が右に2ミリメートルとブレグマへ吻側1mmである。深さは、頭蓋骨の表面から3 mmであり、細胞は2μlを2分ごとの速度で注入されています。皮膚が5から0 PDS縫合され、マウスは、加熱パッド上で目を覚ますために許可されています。我々の経験から、細胞株に応じて、治療は手術後7〜10日から行われることができます。薬物送達は、薬剤の組成に依存しています。放射線治療のためにマウスを麻酔しており、治具カスタムメイドに入れられます。鉛は、マウスの体をカバーし、マウスの脳だけを公開しています。 GBMの腫瘍形成と新しい治療法の評価の研究は、正確で再現性脳腫瘍動物モデルが必要になります。したがって、私たちはeffectivenをテストするために、脳や腫瘍の微小環境の相互作用を研究するために、この同所脳モデ​​ルを使用して、放射線とせずに別の治療薬のESS。

Protocol

I.細胞の調製細胞が移植されるすべての5匹のマウス用の80%コンフルエント225センチメートル3フラスコ約10%FBSを含むDMEM中でコンフルエンスまで増殖されています。 細胞のメディアをオフに吸引し、カルシウムまたはマグネシウムなし10 mlのPBSで洗浄する。細胞からPBSを吸引除去する。 トリプシンの3 mlで細胞をトリプシン処理、10〜15分待ってから、メディアの…

Discussion

このような多形性膠芽腫などの悪性神経膠腫は、最も一般的な原発性脳腫瘍を表しており、予後不良4を持っています。 GBMの影響を受けた患者の生存率は手術、放射線、化学療法5の進歩にもかかわらず(すなわち、9〜12ヶ月後の診断)過去10年間ほぼ横ばいで推移している。神経膠腫の治療の研究のための適切なモデルの特徴は、比較的離散的な腫瘍として再現性腫瘍の位置?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この研究は、NIHの学内プログラムからの資金によってサポートされています。

Materials

Lab Standard Stereotaxic Instrutment Stoelting Mouse and Rat Adaptor
Betadine 100% EtOH
70% EtOH 50% Acetone
6″ Q-tips Alcohol swabs
Hamilton syringe 80008 Ethicon 5-0 PD
1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle 1 ml syringes
25G needles Heating pad
Artificial Tears Ointment Very fine tipped permanent marker

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Cite This Article
Kramp, T. R., Camphausen, K. Combination Radiotherapy in an Orthotopic Mouse Brain Tumor Model. J. Vis. Exp. (61), e3397, doi:10.3791/3397 (2012).

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