O objetivo deste artigo é descrever o uso de um modelo de glioblastoma ortotópico para estudos quimioradioterapia. Este artigo irá passar por transformação celular, implantação, e radioterapia do mouse através de um modelo intracraniana.
O glioblastoma multiforme (GBM) são os mais comuns e agressivos adultos tumores cerebrais primários 1. Em anos recentes, tem havido um progresso substancial na compreensão dos mecanismos de invasão do tumor, e inoculação intracerebral directa de tumor proporciona a oportunidade de se observar o processo invasivo em um ambiente apropriado fisiologicamente 2. No que diz respeito tumores cerebrais humanos estão em causa, os modelos ortotópicos actualmente disponíveis são estabelecidas, quer por injecção estereotáxica de suspensões de células ou implantação de um pedaço sólido de tumor através de um procedimento complicado craniotomia 3. Na nossa técnica que colher células de cultura de tecidos para criar uma suspensão de células usadas para implante directamente para o cérebro. A duração da cirurgia é aproximadamente 30 minutos, e como o rato precisa de ser constante num plano cirúrgico, um anestésico injectável é usado. O rato é colocado em um jig estereotáxico feita por Stoetling (figura 1). À réer a área cirúrgica é limpo e preparado, é feita uma incisão; eo bregma está localizado para determinar a localização do craniotomia. A localização do craniotomia é de 2 mm para a direita e 1 mm rostral à bregma. A profundidade é de 3 mm da superfície do crânio, e as células são injectadas a uma taxa de 2 ul a cada 2 minutos. A pele é suturada com 5-0 PDS, e do rato é permitido para acordar em uma almofada de aquecimento. De nossa experiência, dependendo da linha celular, o tratamento pode ter lugar a partir de 7-10 dias após a cirurgia. A entrega da droga depende da composição de droga. Para o tratamento de radiação os ratos são anestesiados e colocados em um feito gabarito. Chumbo cobre o corpo do rato e expõe apenas o cérebro do rato. O estudo de tumorigénese ea avaliação de novas terapias para GBM requerem precisos e reprodutíveis cerebrais modelos animais de tumores. Assim, utilizar este modelo ortotópico cérebro para estudar a interacção do microambiente do cérebro e do tumor, para testar a effectiveness de diferentes agentes terapêuticos, com e sem radiação.
Gliomas malignos, como o glioblastoma multiforme, representam os mais comuns tumores cerebrais primários e têm um prognóstico sombrio 4. Sobrevida de pacientes afetados por GBM permaneceu praticamente inalterada durante a última década (isto é, 9-12 meses após o diagnóstico), apesar dos avanços em cirurgia, radioterapia e quimioterapia 5. As características de um modelo adequado para o estudo do tratamento glioma deve incluir uma localização do tumor reprodutível e crescimento das cél…
The authors have nothing to disclose.
Esta pesquisa é apoiada pelo financiamento do programa intramuros do NIH.
Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
Betadine | 100% EtOH |
70% EtOH | 50% Acetone |
6″ Q-tips | Alcohol swabs |
Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
25G needles | Heating pad |
Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |