גיבוש חלקיקים פולימריים Diblock באמצעות טכניקה Nanoprecipitation
Summary
מאמר זה מתאר שיטה nanoprecipitation לסנתז פולימר מבוסס חלקיקים באמצעות diblock שיתוף פולימרים. אנו נדון את הסינתזה של diblock שיתוף פולימרים, הטכניקה nanoprecipitation, יישומים פוטנציאליים.
Abstract
הננוטכנולוגיה היא ענף חדש יחסית של המדע כרוכה רתימת התכונות הייחודיות של החלקיקים הם ננומטר סולם (חלקיקים). חלקיקים יכולים להיות מהונדסים בצורה מדויקת שבה כימיה, גודל הרכב פני השטח שלהם ניתן לשלוט בקפידה. זה מאפשר חופש חסר תקדים לשנות כמה מן התכונות הבסיסיות של המטען שלהם, כגון, מסיסות diffusivity, biodistribution, מאפיינים לשחרר immunogenicity. מאז ראשית שלהם, חלקיקים כבר נוצלו בתחומים רבים של המדע והרפואה, כולל אספקת סמים, הדמיה, ביולוגיה של התא 1-4. עם זאת, לא נוצל במלואו מחוץ "מעבדות הננוטכנולוגיה" בשל מחסום טכני נתפס. במאמר זה, אנו מתארים שיטה פשוטה לסנתז פלטפורמה פולימר nanoparticle מבוסס כי יש מגוון רחב של יישומים פוטנציאליים.
הצעד הראשון הוא לסנתז diblock שיתוף פולימר שיש לו גם תחום הידרופובי תחום הידרופילי. שימוש PLGA ו PEG כמו פולימרים מודל תיארנו תגובה נטיה באמצעות EDC / NHS כימיה 5 (איור 1). כמו כן, אנו דנים את תהליך טיהור פולימר. Diblock מסונתז שיתוף פולימר יכול עצמית להרכיב לתוך חלקיקים בתהליך nanoprecipitation דרך הידרופובי, הידרופילי אינטראקציות.
Nanoparticle פולימר תיאר הוא מאוד תכליתי. ליבת הידרופובי של nanoparticle יכול להיות מנוצל כדי לשאת תרופות מסיס גרוע עבור משלוח הסמים experiments6. יתר על כן, חלקיקים יכולים להתגבר על הבעיה של ממיסים רעילים עבור מסיסים גרוע ריאגנטים לביולוגיה מולקולרית, כגון wortmannin, המחייב ממס כמו DMSO. עם זאת, DMSO יכול להיות רעיל לתאים ולהפריע הניסוי. תרופות אלו מסיסים גרוע ריאגנטים יכול להיות מועברת באופן יעיל באמצעות חלקיקי הפולימר עם רעילות מינימלית. חלקיקי הפולימר יכול גם להיות טעון עם צבע פלואורסצנטי מנוצל ללימודי סחר תאיים. לבסוף, אלו חלקיקים פולימר ניתן מצומדות כדי מיקוד ligands דרך PEG פני השטח. חלקיקים ממוקדת כזה יכול להיות מנוצל כדי תווית epitopes ספציפי או בתאים 7-10.
Protocol
Discussion
השיטה nanoprecipitation באמצעות diblock שיתוף פולימרים מייצג שיטה פשוטה, מהירה מהנדס חלקיקים פולימריים. חלקיקים וכתוצאה מכך מורכבים ליבה הידרופובי אשר יכול להיות מנוצל עבור משלוח של תרכובות מסיסים היטב. שכבת הקרקע הידרופילי מאפשר מסיסות מימית מעולה תוך מתן מחצית עבור נטיה נוס?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו מומנה על ידי גולף נגד סרטן, קרוליינה המרכז ננוטכנולוגיה אקסלנס פיילוט מענק, אוניברסיטת לחקר הסרטן הקרן בריאות ממלכתי המכון K-12 פיתוח פרס קריירה.
Materials
| Reagent | Company | Catalogue Number | Comments |
| EDC | Thermo Scientific | 22980 | Conjugation Reagent |
| NHS | Thermo Scientific | 24500 | Conjugation Reagent |
| amine-PEG-carboxylate | Laysan Bio Inc. | Nh2-PEG-CM-5000 | Polymer (Can use any PEG MW, 5000 is listed here) |
| PLGA-carbxylate | Lactel | B6013-2 | Polymer |
| Dichloromethane (DCM) | Sigma-Aldrich | 34856 | Solvent |
| Acetonitrile >99% purity | Sigma-Aldrich | 34851 | Solvent |
| Methanol >99% purity | Sigma-Aldrich | 34860 | Wash |
References
- Drotleffa, S., Lungwitz, U., Breuniga, M., Dennis, A., Blunk, T., Tessmarc, J., Goëpferich, A. Biomimetic polymers in pharmaceutical and biomedical sciences. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 58, 385-407 (2004).
- Bulte, J. W. M. . Nanoparticles in Biomedical Imaging. 3, (2008).
- Omid, C., Farokhzad, R. L. Impact of Nanotechnology on Drug Delivery. ACS NANO. 3, 16-20 (2009).
- Li, Y. -. P., Pei, Y. -. Y., Xian-Ying, Z., Zhou-Hui, G., Zhao-Hui, Z., Wei-Fang, Y., Jian-Jun, Z., Jian-Hua, Z., Xiu-Jian, G. PEGylated PLGA nanoparticles as protein carriers: synthesis, preparation and biodistribution in rats. Journal of Controlled Release. 71, 203-211 (2011).
- Hermanson, G. T. . Bioconjugate techniques. , (2008).
- Jeong, B., Bae, Y. H., Lee, D. S., Kim, S. W. Biodegradable block copolymers as injectable drug-delivery systems. Nature. 388, 860-862 (1997).
- Yoo, H. S., Park, T. G. Folate receptor targeted biodegradable polymeric doxorubicin micelles. Journal of Controlled Release. 96, 273-283 (2004).
- Cheng, J., Teply, B. A., Sherifi, I., Sung, J., Luther, G., Gu, F. X., Levy-Nissenbaum, E., Radovic-Moreno, A. F., Langer, R., Farokhzad, O. C. Formulation of Functionalized PLGA-PEG Nanoparticles for In Vivo Targeted Drug Delivery. Biomaterials. 28, 869-876 (2007).
- Gu, F., Zhang, L. F., Teply, B. A., Mann, N., Wang, A., Radovic-Moreno, A. F., Langer, R., Farokhzad, O. C. Precise engineering of targeted nanoparticles by using self-assembled biointegrated block copolymers. Proceedings of the National Academy of Science. 105, 2586-2591 (2008).
- Sanna, V., Pintus, G., Roggio, A. M., Punzoni, A., Posadino, A. M., Arca, A., Marceddu, S., Bandiera, P., Uzzau, S., Sechi, M. Targeted Biocompatible Nanoparticles for the Delivery of (-)-Epigallocatechin 3-Gallate to Prostate Cancer Cells. J. Med. Chem. 54, 1321-1332 (2011).
- Abdelwahed, W., Degobert, G., Stainmesse, S., Fessi, H. Freeze-drying of nanoparticles: Formulation, process and storage considerations. Advanced Drug Delivery Reviews. 58, 1688-1713 (2006).
- Holzer, M., Vogel, V., Mäntele, W., Schwartz, D., Haase, W., Langer, K. Physico-chemical characterisation of PLGA nanoparticles after freeze-drying and storage. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 72, 428-437 (2009).
- Lee, M. K., Kim, M. Y., Kim, S., Lee, J. Cryoprotectants for Freeze Drying of Drug Nano-Suspensions: Effect of Freezing Rate. Journal of Pharmaceutical Sciences. 98, 4808-4817 (2009).
- Wang, A. Z. Biofunctionalized targeted nanoparticles for therapeutic applications. Expert opinion on biological therapy. 8, 1063-1070 (2008).
- Jeong, B., Bae, Y. H., Kim, S. W. Drug release from biodegradable injectable thermosensitive hydrogel of PEG-PLGA-PEG triblock copolymers. J. Control Release. 63, 155-163 (2000).
- Gref, R. Biodegradable long-circulating polymeric nanospheres. Science. 263, 1600-1603 (1994).
