Uno degli ostacoli principali nelle terapie attuali delle cellule staminali sta determinando il metodo più efficace per fornire queste cellule ai tessuti ospitanti. Qui, descriviamo uno a base di chitosano metodo di consegna che sia efficiente e semplice l'approccio, consentendo nel contempo derivate da tessuto adiposo cellule staminali per mantenere il loro multipotenza.
Cellule staminali multipotenti hanno dimostrato di essere estremamente utile nel campo della medicina rigenerativa 1-3. Tuttavia, per utilizzare queste cellule efficace per la rigenerazione tissutale, un certo numero di variabili devono essere prese in considerazione. Queste variabili includono: il volume totale e la superficie del sito di impianto, le proprietà meccaniche del tessuto e il microambiente tessuto, che comprende la quantità di vascolarizzazione e dei componenti della matrice extracellulare. Pertanto, i materiali utilizzati per fornire queste cellule deve essere biocompatibile con una composizione chimica definita, pur mantenendo una resistenza meccanica che imita il tessuto ospite. Tali materiali devono anche essere permeabile all'ossigeno e nutrienti per fornire un microambiente favorevole per le cellule per attaccare e proliferare. Il chitosano, un polisaccaride cationico con biocompatibilità, possono essere facilmente modificati chimicamente ed ha una elevata affinità per legare in vivo con macromolecules 4-5. Chitosano imita la porzione glicosaminoglicano della matrice extracellulare, consentendogli di funzionare come un substrato per l'adesione cellulare, la migrazione e la proliferazione. In questo studio si utilizzano chitosano in forma di microsfere per fornire derivate da tessuto adiposo cellule staminali (ASC) in una base di collagene tridimensionale scaffold 6. Un ideale cellula-microsfere rapporto è stato determinato rispetto al tempo di incubazione e la densità delle cellule per ottenere massimo numero di celle che possono essere caricati. Una volta ASC sono seminate su microsfere chitosano (CSM), essi sono incorporati in un ponteggio collagene e possono essere mantenute in coltura per lunghi periodi. In sintesi, questo studio fornisce un metodo per fornire con precisione le cellule staminali all'interno di un biomateriale tridimensionale patibolo.
Uno degli ostacoli principali delle cellule staminali in terapia a base di sta sviluppando metodi efficienti per la consegna delle cellule alle regioni determinate per la riparazione. Grazie al paziente a paziente variabilità, il tipo di tessuto, dimensioni e profondità lesione, la metodologia di cellule staminali che forniscono devono essere determinati caso per caso. Anche se l'incorporamento cellule staminali all'interno di una matrice e di consegnarli al sito della ferita sembra essere un approccio logico …
The authors have nothing to disclose.
DOZ è supportata da una sovvenzione concessa dalla Fondazione di Ginevra. SN è stato sostenuto da una borsa post-dottorato dal Initiative Tissue Engineering Pittsburgh.
Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number | Comments |
Hanks BalancedSalt Solution (HBSS) | Gibco | 14175 | Consumable |
Fetal Bovine Serum | Hyclone | SH30071.03 | Consumable |
Collagenase Type II | Sigma-Aldrich | C6685 | Consumable |
70-μm nylon mesh filter | BD Biosciences | 352350 | Consumable |
100-μm nylon mesh filter | BD Biosciences | 352360 | Consumable |
MesenPRO Growth Medium System | Invitrogen | 12746-012 | Consumable |
L-glutamine | Gibco | 25030 | Consumable |
T75 Tissue Culture Flask | BD Biosciences | 137787 | Consumable |
Chitosan | Sigma-Aldrich | 448869 | Consumable |
Acetic Acid | Sigma-Aldrich | 320099 | Consumable |
N-Octanol | Acros Organics | 150630025 | Consumable |
Sorbitan-Mono-oleate | Sigma-Aldrich | S6760 | Consumable |
Potassium Hydroxide | Sigma-Aldrich | P1767 | Consumable |
Acetone | Fisher Scientific | L-4859 | Consumable |
Ethanol | Sigma-Aldrich | 270741 | Consumable |
Trinitro Benzenesulfonic Acid | Sigma-Aldrich | P2297 | Consumable |
Hydrochloric Acid | Sigma-Aldrich | 320331 | Consumable |
Ethyl Ether | Sigma-Aldrich | 472-484 | Consumable |
8-μm Tissue Culture Plate Inserts | BD Biosciences | 353097 | Consumable |
1.5-ml Microcentrifuge Tubes | Fisher | 05-408-129 | Consumable |
MTT Reagent | Invitrogen | M6494 | Consumable |
Dimethyl Sulfoxide | Sigma-Aldrich | D8779 | Consumable |
Qtracker Cell Labeling Kit (Q tracker 655) | Molecular probes | Q2502PMP | Consumable |
Type 1 Collagen | Travigen | 3447-020-01 | Consumable |
Sodium Hydroxide | Sigma-Aldrich | S8045 | Consumable |
12-Well Tissue Culture Plates | BD Biosciences | 353043 | Consumable |
Centrifuge | Eppendorf | 5417R | Equipment |
Orbital Shaker | New Brunswick Scienctific | C24 | Equipment |
Humidified Incubator with Air-5% CO2 | Thermo Scientific | Model 370 | Equipment |
Overhead Stirrer | IKA | Visc6000 | Equipment |
Magnetic Stirrer | Corning | PC-210 | Equipment |
Vacuum Desiccator | – | – | Equipment |
Particle Size Analyzer | Malvern | STP2000 Spraytec | Equipment |
Water Bath | Fisher Scientific | Isotemp210 | Equipment |
Spectrophotometer | Beckman | Beckman Coulter DU800UV/Visible Spectrophotometer | Equipment |
Vortex | Diagger | 3030a | Equipment |
Microplate Reader | Molecular Devices | SpectraMax M2 | Equipment |
Light/Fluorescence Microscope | Olympus | IX71 | Equipment |
Confocal Microscope | Olympus | FV-500 Laser Scanning Confocal Microscope | Equipment |
Scanning Electron Microscope | Carl Zeiss MicroImaging | Leo 435 VP | Equipment |
Transmission Electron Microscope | JEOL | JEOL 1230 | Equipment |