Human inre bröstartären (IMA) Transplantation och stentning: A Human modell för att studera utvecklingen av in-stent restenos
Summary
Denna video visar en modell för att studera utvecklingen av intimal hyperplasi efter stentutveckling med en människa kärl (IMA) i en immunbrist råttmodell.
Abstract
Preklinisk in vivo forskningsmodeller att undersöka patobiologiska och patofysiologiska processer i utvecklingen av intimal hyperplasi efter kärlet stentning är avgörande för translationsrörelse metoder 1,2.
De vanligaste djurmodeller inkluderar möss, råttor, kaniner och grisar 3-5. Dock fortfarande översättningen av dessa modeller i kliniska svårt, eftersom dessa biologiska processer redan studerat i animaliska fartyg men aldrig utförts tidigare i mänsklighetens forskningsmodeller 6,7. I den här videon visar vi en ny humaniserad modell för att övervinna denna translationella gap. Den visade metoden är reproducerbar, enkel och snabb att utföra och är lämplig för att studera utvecklingen av intimal hyperplasi och tillämpningen av olika stent.
Denna video visar hur du utför stenten tekniken i mänskliga kärl följt av transplantation till immunbrist råttor ochidentifierar ursprung prolifererande celler såsom människa.
Protocol
Discussion
Även om olika in vivo forskning modeller befintliga att undersöka utvecklingen av intimal hyperplasi efter stentbehandling, dessa modeller fortfarande inför translationella hinder att övervinna. Dessutom stora djurmodeller är dyra och särskilt boende förhållanden och kirurgisk utrustning inte är tillgänglig för alla laboratorier.
Med hjälp av en människa IMA att studera utvecklingen av mänskliga intima proliferation och in-stent restenos studerades innan ex situ</e…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Författarna tackar Christiane Pahrmann för hennes bidrag. Speciellt tack till Ethicon, Norderstedt, Hamburg (Tyskland) för att ge suturmaterial.
Medel
Sonja Schrepfer har fått ett forskningsanslag från Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 och SCHR992/4-1).] Arbetet stöddes av ISHLT Shumway karriärutveckling Grant 2010 och Falk forskningsfinansieringen (Stanford University).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalog number | Comments |
| 2 French Fogarty catheter | Baxter Healthcare, Deerfield, IL, USA | 120602F | |
| Yukon Stent | Translumina GmbH, Hechingen, Germany | Use the stent of your choice according to your study protocol | |
| RPMI media | Biochrom | Nr.F1275 | |
| heparin | Baxter | 2B0953 | |
| isoflurane | Abbot | B506 | |
| Provo-Iodine | Betadine Puredue Pharma | EAN:5995327165830 | |
| 80% ethanol | Geyer | ETV 80/0500 | |
| Micro clamp | Harvard Apparatus | PY2-61-0186 | |
| Sutures 8-0 | Johnson& Johnson, | 2808G | |
| Sutures 6-0 | Johnson& Johnson, | 1698 H | |
| Carprofen | Feizer Vet | PZN:0110208 | |
| Metamizol | Ratiopharm | ||
| Target retrieval solution, pH9 | Dako | S2368 | |
| Image-iT FX signal enhancer | Invitrogen | I36933 | |
| mouse monoclonal anti-GFP antibody | BD living colors | 632381 | |
| primary antibody diluent | Dako | S3022 | |
| goat-anti-mouse IgG, Alexa Fluor 488 | Invitrogen | A11017 | |
| secondary antibody diluent | Dako | S0809 | |
| rabbit polycolonal anti-smooth muscle α-actin | Abcam, | ab5694 | |
| goat-anti-rabbit IgG, Alexa Fluor 555 | Invitrogen | A21430 | |
| Prolong Gold antifade reagent | Invitrogen | P36930 |
References
- Deuse, T., Ikeno, F., Robbins, R. C., Schrepfer, S. Imaging In-Stent Restenosis: An Inexpensive, Reliable, and Rapid Preclinical Model. J. Vis. Exp. (31), e1346 (2009).
- Oyamada, S. Trans-iliac rat aorta stenting: a novel high throughput preclinical stent model for restenosis and thrombosis. J. Surg. Res. 166, e91-e95 (2011).
- Chamberlain, J. A novel mouse model of in situ stenting. Cardiovascular research. 85, 38-44 (2010).
- Deuse, T. Introducing the first polymer-free leflunomide eluting stent. Atherosclerosis. 200, 126-134 (2008).
- Finn, A. V. Differential healing after sirolimus, paclitaxel, and bare metal stent placement in combination with peroxisome proliferator-activator receptor gamma agonists: requirement for mTOR/Akt2 in PPARgamma activation. Circulation research. 105, 1003-1012 (2009).
- Tellez, A. Coronary bare metal stent implantation in homozygous LDL receptor deficient swine induces a neointimal formation pattern similar to humans. Atherosclerosis. 213, 518-524 (2010).
- Suzuki, Y., Yeung, A. C., Ikeno, F. The pre-clinical animal model in the translational research of interventional cardiology. JACC Cardiovasc. Interv. 2, 373-383 (2009).
- Holt, C. M. Intimal proliferation in an organ culture of human internal mammary artery. Cardiovascular research. 26, 1189-1194 (1992).
- Swanson, N., Javed, Q., Hogrefe, K., Gershlick, A. Human internal mammary artery organ culture model of coronary stenting: a novel investigation of smooth muscle cell response to drug-eluting stents. Clin. Sci. (Lond). 103, 347-353 (2002).
