IBD의 DSS 유발 모델에서 창자 염증을 조사
Summary
염증성 장 질환의 실험적 모델은 우리가 pathogenesis와 관련된 복잡한 본래과 적응 면역 반응을 조사 수 있습니다. histological 채점, 프로 – 염증 크린 시토킨 및 myeloperoxidase 활동 부량 사용하여, 하나는 염증성 장 질환에서 볼 이러한 반응을 평가하기 시작할 수 있습니다.
Abstract
염증성 장 질환 (IBD)은 장내 pathologies의 범위, 궤양 대장염 (UC) 및 Crohn의 질병 (CD)하는 가장 일반적인 구성되어 있습니다. UC와 CD, 모두 콜론에 존재하면, 설사, 직장 출혈, 복통 및 체중 감소를 포함시킬 수 있습니다 유사한 증상 프로필을 생성합니다. 1 IBD의 pathogenesis이 알려지지 않은 남아 있지만, 그것은 모두를 포함 multifactorial 질병으로 설명되어 있습니다 유전과 환경 요소 2.
IBD의 몇 가지 기능이 유사한 colonic 염증 수많은 변수와 변수의 동물 모델이 있습니다. 이러한 dextran 황산염 나트륨 (DSS)과 같은 대장염 – 유도 화학 물질의 특정 농도의 이러한 요구 관리 특정 종의 변종에 감염될 자발적으로 발생하는 사람의 대장염 범위의 동물 모델. 내장 염증의 화학 유도된 모델은 IBD의 가장 일반적으로 사용되는 최상의 설명 모델입니다. Admini마시는 물 속에 DSS의 stration이 관리 프로토콜에 따라 급성 또는 만성 대장염을 생산하고 있습니다. DSS 전시 체중 감소와 느슨한 대변 또는 설사의 증상 주어진 세 동물은, 때때로 직장 출혈의 증거. 여기 4,5를 우리는 방법을 설명하는 대장염 개발 및 결과 염증 반응은 DSS의 다음과 같은 관리를 특징하실 수 있습니다. 이러한 방법은 염증의 대리 마커로 사용할 수 histological hematoxylin / eosin 스테인드 결장 섹션의 분석, 프로 – 염증 크린 시토킨의 측정 및 myeloperoxidase의 결정 (MPO) 활동 6. 포함
질병 상태에있는 염증 반응의 정도는 임상 증상의 존재 또는 점막 조직의 조직학의 변경에 의해 평가하실 수 있습니다. Colonic histological 피해 지하실 건축, 염증 세포 침투, 근육 t의 손실을 고려 채점 시스템을 사용하여 평가됩니다hickening, 고블렛 셀 고갈, 그리고 토굴 농양. 양적 7과 같은 인터루킨 (IL) – 1β, IL – 6와 종양의 괴사 인자 (TNF) – α와 같은 급성 염증성 속성,와 프로 – 염증성 크린 시토킨 수준을 사용하여 확인할 수 있습니다 기존 엘리사 방법. 또한, MPO 활동은 colorimetric 분석을 사용하여 측정할 수 있으며 염증의 인덱스로 사용 8.
실험적 대장염에서 질병 심각도는 종종 MPO 활동 증가와 프로 염증 크린 시토킨 높은 수준의와 상관있다. 대장염의 심각 및 염증 – 관련 피해 hematoxylin / eosin 스테인드 colonic 조직 섹션을 사용하여 대장의 상태를 histopathological 평가 이외에, 대변 일관성과 출혈을 조사하여 평가하실 수 있습니다. Colonic 조직 조각은 MPO 활동 및 시토킨 생산을 결정하는 데 사용할 수 있습니다. 합쳐 놓으면, 이러한 조치는 장의 염증 반응을 평가하는 데 사용할 수 있습니다실험 대장염의 동물 모델.
Protocol
Discussion
DSS 대장염은 장의 염증의 널리 사용되는 화학적으로 유도된 모델입니다. 이 모델에서는, 마우스는 상피 세포를 직감하고 점막 장벽의 무결성을 방해하기 위해 독성 것으로 생각됩니다 DSS와 보충 식수 제공됩니다. DSS 10 관리가 느슨한 대변, 배설물 출혈이 특징입니다 급성 대장염을 유도, 그리고 granulocytes로 침투 10. DSS 관리하는 동안은 대장염은 일반적으로 배설물 잠혈 검사로 ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 건강 연구의 캐나다 연구소에서 보조금 (CIHR)와 Crohn의과 캐나다의 대장염 재단 (CCFC)에 의해 지원됩니다.
Materials
| Name of reagent/equipment: | Company | Catalogue number | Comments |
| Eppendorf Safe-Lock Microcentrifuge Tube (2mL) | eppendorf | 0030 120.094 | |
| Biotek EL808 Absorbance plate reader | Biotek | EL808 | |
| Dextran sulphate sodium salt reagent grade (molecular weight 36,000-50,000 Da) | MP Biomedicals | 160110 | |
| Gen5 (software) | Biotek | Version 1.10.8 | |
| Hexadecyltrimethylammonium bromide (HTAB) | Sigma-Aldrich | H5882-100G | |
| Hydrogen peroxide, 30 wt.% solution in water | Sigma-Aldrich | 216763 | Store at 2-8°C |
| Microtest plate 96-well flat bottom | Sarstedt | 82.1581 | For single use only |
| o-Dianisidine | Sigma-Aldrich | D-3252 | Light sensitive. Store at 2-8°C |
| Potassium phosphate, dibasic | Caledon | 6620-1 | |
| Potassium phosphate, monobasic | EMD Chemicals | PX1565-1 | |
| Protease inhibitor cocktail | Sigma-Aldrich | P8340 | Store at -20°C |
| Triton X-100 | Sigma-Aldrich | T8787 | |
| Tungsten Carbide beads for Tissue Lyser II | QUIAGEN | 69997 |
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