Summary

लार लार ग्रंथि, Ixodes Scapularis Ticks से और Hemolymph संग्रह

Published: February 21, 2012
doi:

Summary

संक्रमित टिक hemolymph, लार की गिल्टी, और लार के संग्रह अध्ययन कैसे टिक जनित रोगज़नक़ों रोग का कारण करने के लिए महत्वपूर्ण है. हम इस प्रोटोकॉल में प्रदर्शन कैसे खिलाने से hemolymph और लार ग्रंथियों को इकट्ठा करने के लिए<em> Scapularis Ixodes</em> Nymphs. हम भी महिला से लार संग्रह का प्रदर्शन<em> मैं scapularis</em> वयस्कों.

Abstract

Ticks दुनिया भर में पाए जाते हैं और कई टिक जनित बीमारियों के साथ मनुष्य के दु: ख है. Ticks रोगज़नक़ों कारण है कि Lyme रोग और टिक जनित प्रत्यावर्ती ज्वर (Borrelia एसपीपी), रॉकी पर्वत बुखार देखा (रिकेटसिआ rickettsii), ehrlichiosis (Ehrlichia chaffeensis और ई. सम), anaplasmosis (Anaplasma phagocytophilum) इन्सेफेलाइटिस (टिक के लिए वैक्टर जनित इन्सेफेलाइटिस वायरस), (Babesia एसपीपी). babesiosis, में कोलोराडो टिक बुखार (Coltivirus) और Tularemia (Francisella tularensis) के 1-8. को ठीक से मेजबान में प्रेषित किया जा इन संक्रामक एजेंटों विभिन्न जीन अभिव्यक्ति को विनियमित, टिक प्रोटीन के साथ बातचीत, और 3,9-13 टिक के माध्यम से विस्थापित. उदाहरण के लिए, Lyme रोग एजेंट, Borrelia burgdorferi, अंतर जीन अभिव्यक्ति के माध्यम से टिक पशुस्थानिक 14,15 चक्र की दावत और अकाल चरण के लिए adapts. इसके अलावा, के रूप में एक Ixodes टिक खपतbloodmeal Borrelia दोहराने के लिए और hemocoel है, जहां वे लार की गिल्टी के लिए यात्रा कर रहे हैं और मेजबान में निष्कासित कर दिया 9,16-19 लार के साथ प्रेषित में आद्यमध्यांत्र से विस्थापित.

मेजबान के रूप में एक टिक फ़ीड आम तौर पर एक मजबूत और hemostatic और सहज प्रतिरक्षा 11,13,20-22 प्रतिक्रिया के साथ जवाब. मैं इन मेजबान प्रतिक्रियाओं के बावजूद, scapularis कई दिनों के लिए फ़ीड क्योंकि टिक लार प्रोटीन है कि immunomodulatory, lytic एजेंटों, anticoagulants, और fibrinolysins 3,11,20,21,23 खिला टिक सहायता कर सकते हैं. immunomodulatory गतिविधियों टिक लार या लार ग्रंथि निकालने (SGE) द्वारा पास प्रसारण, प्रसार, कई टिक जनित 3,20,24-27 रोगज़नक़ों के प्रसार और सुविधा. आगे समझने के लिए कैसे टिक जनित संक्रामक एजेंटों के रोग का कारण यह करने के लिए सक्रिय रूप से काटना ticks के खिला और टिक लार इकट्ठा करने के लिए आवश्यक है. इस वीडियो प्रोटोकॉल के लिए विच्छेदन तकनीक को दर्शाता हैhemolymph का संग्रह और सक्रिय रूप से मैं खिलाने से लार की गिल्टी को हटाने के scapularis nymphs के 48 के बाद और 72 घंटे के बाद माउस नियुक्ति. हम भी एक वयस्क महिला मैं से लार संग्रह का प्रदर्शन scapularis टिक.

Protocol

1. स्लाइड तैयार करने के लिए संग्रह hemolymph (मूवी 1) धीरे से 5 मिनट के लिए एक और 3% सामयिक हाइड्रोजन पेरोक्साइड में पशु जगह से सक्रिय रूप से खिला ticks है और हटाने के फिर सतह बाँझ 10 मिनट के लिए 70% इथेनॉल मे…

Discussion

टिक hemolymph, लार की गिल्टी, और लार का संग्रह टिक जनित रोगज़नक़ संचरण के अध्ययन में महत्वपूर्ण है, प्रसार, प्रसार, प्रसार, और दोनों टिक और 6,11-13,20,23,29 मेजबान में दृढ़ता. वहाँ 30,31 टिक काटना के लिए कई तरीके हैं. ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखकों के लिए वेक्टर जनित रोगों के पशु संसाधन शाखा के डिवीजन शुक्रिया अदा करना चाहूँगा, विशेष रूप से Andrea पीटरसन, लिसा Massoudi, वेरना ओ, और जॉन लिडेल उनके और चूहों और खरगोशों की देखभाल और रखरखाव के लिए. हम भी एमी Ullmann, थेरेसा रसेल, और बारबरा जे जॉनसन इस पांडुलिपि की ओर उनके योगदान के लिए धन्यवाद देना चाहूंगा. अंत में, हम सीडीसी पर संचार के लिए एसोसिएट निदेशक के कार्यालय में Alissa Eckert इस पांडुलिपि के फिल्मांकन के साथ जुड़े सभी कानूनी निर्देशन के लिए ग्राफिक चित्रों और जमीमा Lavelle उत्पादन के लिए स्वीकार करना होगा.

Materials

Reagent Company Catalogue Number
Hydrogen peroxide Fisher H312-500
Ethanol Acros 61509-5000
PBS Boston Bioproducts BM-2205
Dumont Fine forceps (3C) Fisher NC9906085
Silane treated microscope slides Bioworld 42763007-1
Pap pen Bioworld 21750008-1
Super frost plus microscope slides Fisher 12-550-18
Pilocarpine Sigma P6503-5G
Protease inhibitor cocktail Sigma P2714
#11 disposable scalpel Feather 2975#11
Nontoxic modeling clay Fisher S17307
Capillary tubes Chase scientific Glass, inc 40A502

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Patton, T. G., Dietrich, G., Brandt, K., Dolan, M. C., Piesman, J., Gilmore Jr., R. D. Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks. J. Vis. Exp. (60), e3894, doi:10.3791/3894 (2012).

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