Vidro Filtros de lã para a concentração de vírus e transmitidas pela água Agrícolas patógenos zoonóticos
Summary
Os filtros de lã de vidro têm sido utilizados para concentrar os vírus pela água por um número de grupos de pesquisa em todo o mundo. Aqui, mostramos uma abordagem simples para a construção de filtros de lã de vidro e demonstrar os filtros são também eficazes na concentração waterborne virais, agentes patogénicos bacterianos e protozoários.
Abstract
O primeiro passo fundamental na avaliação de níveis de patógenos em água contaminada suspeita é a concentração. Métodos de concentração tendem a ser específicas para um determinado grupo patógeno, por exemplo Ambiental dos EUA Método Agência de Protecção 1623 para Giardia e Cryptosporidium 1, o que significa que vários métodos são necessários se o programa de amostragem é a segmentação mais do que um grupo patógeno. Outra desvantagem dos métodos actuais é o equipamento pode ser complicado e caro, por exemplo, o método VIRADEL com o filtro de cartucho para a concentração de vírus 1MDS 2. Neste artigo vamos descrever como construir filtros de lã de vidro para a concentração de agentes patogênicos. Após eluição do filtro, o concentrado é passível de um passo de concentração em segundo lugar, tal como centrifugação, seguido por detecção de agentes patogénicos e enumeração por métodos de cultura ou molecular. Os filtros têm várias vantagens. A construção é fácil e os filtros podem ser construídos para umny tamanho para atender aos requisitos específicos de amostragem. As peças de filtro são baratos, tornando possível a recolha de um grande número de amostras, sem que prejudica gravemente a um orçamento do projecto. Grandes volumes de amostra (100S a 1.000 s L) pode ser concentrada, dependendo da taxa de entupimento de turvação da amostra. Os filtros são altamente portátil e com o mínimo de equipamento, tais como uma bomba e medidor de fluxo, eles podem ser implementados no campo para a amostragem de água potável acabado, água de superfície, a água subterrânea, e do escoamento agrícola. Por último, o vidro de filtração lã é eficaz para a concentração de uma variedade de tipos de organismos patogénicos para que apenas um método é necessário. Aqui nós relatamos sobre a eficácia do filtro em concentrar enterovirus humano por via aquática, S almonella enterica, Cryptosporidium parvum e vírus da gripe aviária.
Protocol
Discussion
Os filtros de lã de vidro têm sido usadas por vários grupos de pesquisa 3,5,6 a concentrar-se humanos vírus entéricos de uma variedade de fontes de água, tais como água potável terminado 7, a água subterrânea 8,9, água de superfície 10, a água do mar 11, as águas residuais 12, e escoamento agrícola 13. Relatamos aqui os filtros são também eficazes na concentração de vírus de influenza aviária, bem como os agentes patogénic…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Agradecemos William T. Eckert para narrar o vídeo. Desenvolvimento do protocolo de lã de vidro fez parte da água Wisconsin e Julgamento de Saúde para Riscos entéricos (WAHTER Study), financiado pela EPA dos EUA ESTRELA Grant R831630. Alaska amostras foram coletadas por A. Reeves, A. Ramey e Meixell B. com apoio financeiro do USGS. Qualquer utilização dos nomes de comércio, produto ou empresa é apenas para fins descritivos e não implica o endosso pelo governo dos EUA.
Materials
| Name of reagent or item | Company | Catalogue number |
| Hydrochloric acid | Fisher Scientific | A144-500 |
| Sodium hydroxide | Fisher Scientific | BP359-212 |
| Phosphate Buffered Saline Sodium chloride Potassium phosphate-dibasic Potassium phosphate-monobasic |
Fisher Scientific Fisher Scientific Fisher Scientific |
BP358-212 BP363-500 BP362-500 |
| Sodium hypochlorite i.e., household bleach | The Clorox Co. | |
| Sodium thiosulfate, anhydrous | Fisher Scientific | S 475-212 |
| Beef extract, desiccated | Becton, Dickinson and Company | 211520 |
| Glycine | Fisher Scientific | G46-500 |
| Oiled sodocalcic glass wool
Or R-11 unfaced fiberglass insulation |
Isover
Johns Manville |
Bourre 725 QN |
| Polypropylene mesh | Industrial Netting | xN4510 |
| 2″x4″ Sch 80 PVC threaded pipe nipple | Grainger | 6MW35 |
| 2″ Sch 40 PVC cap | Grainger | 5WDW3 |
| Male adapter nylon fitting (1/2″x1/2″) | US Plastic Corp. | 62178 |
| Sample bottles for eluate- 1 liter | Fisher Scientific | 03-313-4F |
| 60 mL syringe | Fisher Scientific | NC9661991 |
| pH strips | Whatman | 2614 991 |
| Prefilter, Polypropylene, 10 inch cartridge, 10 μm | McMaster-Carr | 4411K75 |
| Prefilter housing | Cole-Parmer | S-29820-10 |
References
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