माउस आंख में जीन थेरेपी वैक्टर और स्टेम सेल के इंजेक्शन Subretinal
Summary
इस शल्य चिकित्सा तकनीक माउस आँख की subretinal अंतरिक्ष में जीन थेरेपी वैक्टर और स्टेम कोशिकाओं के इंजेक्शन को दिखाता है.
Abstract
दृष्टि की हानि संयुक्त राज्य अमेरिका में लगभग 3.4 लाख लोगों को प्रभावित करता है और आगामी वर्षों में वृद्धि की उम्मीद है 1 हाल ही में, जीन थेरेपी और स्टेम सेल प्रत्यारोपण रेटिना अपक्षयी रोगों से उत्पन्न अंधापन के इलाज के लिए महत्वपूर्ण चिकित्सकीय उपकरण बन गए हैं. ऑटोलॉगस प्रत्यारोपण की उम्र से संबंधित धब्बेदार अध: पतन के लिए कई रूपों (AMD), आईरिस वर्णक उपकला कोशिका प्रत्यारोपण के रूप में उत्साहजनक परिणाम उत्पन्न किया है, और मानव नैदानिक परीक्षणों जीन और स्टेम सेल उपचार के अन्य रूपों के लिए शुरू कर दिया है 2 इन RPE65 जीन प्रतिस्थापन शामिल हैं. Leber जन्मजात अंधता और RPE सेल है Stargardt रोग में मानव भ्रूण स्टेम कोशिकाओं (ते) का उपयोग कर प्रत्यारोपण के साथ रोगियों में चिकित्सा 3-4 अब यह है कि जीन थेरेपी वैक्टर और स्टेम कोशिकाओं रेटिना रोगों के साथ रोगियों के उपचार के लिए उपलब्ध हैं, यह महत्वपूर्ण है सत्यापित करने के लिए पशु मॉडल में इन संभावित उपचारों से पहले लागू होते हैंउन्हें मानव अध्ययन में रही है. माउस जीन थेरेपी और आंखों में स्टेम कोशिका प्रत्यारोपण वैक्टर की चिकित्सीय प्रभावकारिता परीक्षण के लिए एक महत्वपूर्ण वैज्ञानिक मॉडल बन गया है 5-8 इस वीडियो लेख में, हम जीन थेरेपी वैक्टर या स्टेम कोशिकाओं के subretinal अंतरिक्ष में इंजेक्षन तकनीक मौजूद है माउस आंख जबकि आसपास के ऊतकों को नुकसान को कम.
Protocol
Representative Results
Discussion
इस वीडियो तकनीक subretinal इंजेक्शन शल्य प्रक्रिया को सफलतापूर्वक पूरा करने, और यह सुनिश्चित करना है कि जीन थेरेपी सदिश या आवश्यक स्थान पर कुशलतापूर्वक नेत्र रोग के इलाज में स्टेम कोशिकाओं को रखा जाता है पर …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Takayuki नागासाकी से प्रायोगिक सहायता, अंधापन को रोकने के इस शोध अनुसंधान नेत्र और दृश्य अनुसंधान में जानवरों के इस्तेमाल के लिए ARVO वक्तव्य के साथ अनुपालन. KJW NIH 5T32EY013933 और 5T32DK007647-20 अनुदान द्वारा समर्थित है. VBM NIH अनुदान K08EY020530 द्वारा समर्थित है.
Materials
| Name | Company | Catalog | Comments |
| 0.8-1.10 x 100 mm Capillary Tube (glass) | Kimble Glass, Inc. | 34502 99 | |
| Flaming/Brown Micropipette Puller | Sutter Instrument | P-97 | Narishige microforge can be used instead. Catalog #MF-900 |
| Sigmacote | Sigma Aldrich | SL2-25ML | Silicone |
| Dubecco’s Phosphate Buffered Saline with Calcium Chloride and Magnesium Chloride | Gibco-Invitrogen | 14040-133 | |
| Safety-Lok 25 3/4G x 12″; Blood Collection Set | B-D Vacutainer | 367298 | |
| 1 ml Sub-Q 26 5/8G Slip-Tip Syringe | Becton-Dickinson | 309597 | |
| 0.5-10 μl Finnpipette II Adjustable-Volume Pipetter | Fisherbrand | 21-377-815 | |
| 1-200 μl Natural Beveled Tips | USA Scientific, Inc. | 1111-1700 | |
| Discovery.V8 Stereo Microscope | Zeiss | MC1500 | |
| 60 mm x 15 mm Style Treated Polystyrene Cell Culture Dish | Corning Incorporated | 430166 | |
| Vannas Straight Scissors | Storz Ophthalmics | E3383 S | |
| Curved Dressing Forceps with Serrations Delicate | Storz Ophthalmics | E1408 | |
| 15 Degree Microsurgery Knife | Wilson Ophthalmic Corp. | 091204 | |
| Ketamine | Ketaset III | NADA #45-290 | |
| Xylazine | Lloyd Laboratories | NADA #139-236 | |
| Bupivacaine (Marcaine) | AstraZeneca | N/A | |
| Buprenorphine | Sigma Aldrich | B9275 |
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