Hémorragie intracérébrale chez la souris Modélisation: L'injection de sang autologue ou collagénase bactérienne

Summary

Modèles animaux cliniquement pertinentes de l'hémorragie intracérébrale (HIC) sont nécessaires pour étendre notre connaissance des accidents vasculaires cérébraux hémorragiques et d'examiner de nouvelles stratégies thérapeutiques. Dans cette étude, nous décrivons et évaluons deux modèles ICH qui mettent en œuvre des injections unilatérales soit du sang total autologue ou la collagénase bactérienne dans les noyaux gris centraux (corpus striatum) de souris.

Abstract

Hémorragie intracérébrale spontanée (ICH) définit une maladie potentiellement mortelle neurologique qui représente 10-15% de toutes les hospitalisations liés à l'AVC et pour laquelle aucun traitement efficace n'est disponible à ce jour ^1,2. En raison de l'hétérogénéité de l'ICH chez l'homme, divers modèles précliniques sont nécessaires pour explorer en profondeur les stratégies thérapeutiques potentiels ^3. ICH expérimentale est généralement induite chez des rongeurs par injection intra-parenchymateux de sang autologue soit la collagénase bactérienne ou ^4. Le modèle approprié est choisi en fonction de la physiopathologie de l'induction et la progression de l'hémorragie des blessures. Le modèle simule l'injection de sang d'une hémorragie à progression rapide. Alternativement, la collagénase bactérienne par voie enzymatique perturbe la membrane basale des capillaires cérébraux, entraînant un saignement actif qui évolue généralement sur ​​plusieurs heures ^5. Résultante oedème perihematomal et les déficits neurofonctionnels peuvent être quantifiés en arrièrem les deux modèles. Dans cette étude, nous avons décrit et évalué un modèle d'injection double modifiée de sang total autologue ^6, ainsi que d'un modèle d'injection de collagénase bactérienne ICH ^7, les deux qui ciblent les noyaux gris centraux (corpus striatum) des hommes souris CD-1. Nous avons évalué les déficits neurofonctionnels et un œdème cérébral à 24 et 72 heures après l'induction de l'ICH. Injection intrastriatale de sang autologue (30 pi) ou la collagénase bactérienne (0.075U) a provoqué des déficits neurofonctionnels reproductibles chez les souris et un œdème cérébral significativement augmenté à 24 et 72 h après la chirurgie (p <0,05). En conclusion, les deux modèles donnent des uniformes infarctus hémorragiques et représentent méthodes de base pour la recherche préclinique ICH.

Protocol

Toutes les procédures ont été menées en conformité avec le Guide du NIH pour le soin et l'utilisation des animaux de laboratoire et approuvé par le Comité de protection des animaux et l'utilisation à Loma Linda University. 1. Les préparatifs préopératoires Des techniques aseptiques sont recommandés pour toutes les interventions chirurgicales. Désinfecter l'appareil stéréotaxique et préparer les outils chirurgicaux stériles avan…

Discussion

Les modèles animaux d'hémorragie intracérébrale (HIC) contribuent largement à une compréhension approfondie de la physiopathologie de la maladie, et sont couramment utilisés pour développer et évaluer de nouvelles stratégies thérapeutiques dans un cadre préclinique. Injections intra-parenchymateuses de sang autologue ou la collagénase bactérienne sont bien établies méthodes pour générer ICH chez les rongeurs. Les deux méthodes ont été initialement développées chez le rat, mais en raison de l&#…

Materials

Material	Company	Catalogue Number	Comment
Stereotactic Head Frame	Stoelting Co.	51600
Nanomite Syringe Pump	Harvard Apparatus	PY2 70-2217
Hamilton Syringe	Hamilton Company	1725RN (250 μl) 1701 RN (10 μl)	26 Gauge needle for 250 μl and 10 μl syringes.
Microdrill	Fine Science Tools	18000-17
Microdrill burr	Fine Science Tools	19007-09	0.9 mm diameter
Collagenase Type VII-S	Sigma-Aldrich	C2399
Microhematocrit Capillary Tubes	Fisher Scientific	22-362-574	unheparinized
Bone Wax	Ethicon	W31
Suture	Ethicon	1676G
Ketamine	JHP Pharmaceuticals	42023-115-10	Ketalar
Xylazine	LLOYD Laboratories	139-236	AnaSed