Hud tatueringar som ett nytt sätt för DNA-vaccin Leverans
Summary
Hud tatuering är en potent och säkert sätt att leverans DNA-vaccin intradermalt. Här, är en DNA-plasmid som kodar för EGFP som levereras av tatuering på huden av ett laboratorium mus och uttrycket av EGFP i hudcellerna därefter kontrolleras av konfokalmikroskopi.
Abstract
Nukleinsyra-baserad vaccination är ett ämne av växande intresse, särskilt plasmid-DNA (pDNA) som kodar för immunologiskt viktiga antigener. Efter den manipulerade pDNA administreras till vacciner, är det transkriberas och translateras till immunogena proteiner som kan framkalla svar från immunsystemet. Många sätt att leverera DNA-vaccin har undersökts, men varje leverans väg har sina egna fördelar och fallgropar. Hud tatuering är en ny teknik som är säker, kostnadseffektiv och bekvämt. Dessutom kan de punkterar orsakade av nålen också tjäna som en potent adjuvans. Här, vi) demonstrerar intradermal leverans av plasmid-DNA som kodar för förstärkt grönt fluorescerande protein (PCX-EGFP) i en musmodell med en tatuering anordning och b) bekräfta effektiv expression av EGFP i hudceller med konfokalmikroskopi.
Protocol
Representative Results
Discussion
DNA-vaccination anses säkrare än traditionella vaccinationsstrategier eftersom det inte kräver manipulation av, eller exponera de vacciner som, levande eller försvagade patogener 4. Beror emellertid resultatet av DNA-vaccination tungt på leverans rutten. Hud är rikligt förekommande i antigenpresenterande celler, såsom Langerhans celler och dendritiska celler 1, och därmed en idealisk plats för immunisering i termer av immunogenicitet och lättillgänglighet 5,6. Som ett resulta…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Vi vill tacka alla medlemmar i Kong Lab och Dr Yan Deng på Mikroskopi Core Office of Collaborative Science NYUMC för deras hjälp och teknisk support. Detta arbete stöddes av en pilot bidrag från New York University Center for AIDS Research (CFAR, NIH bidrag AI027742).
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalogue Number | Comments |
| pCX-EGFP plasmid DNA | Clontech | ||
| STEALTH Rotary Tattoo System | Worldwide Tattoo Supply | STEALTH-L | |
| Tattoo needles | Worldwide Tattoo Supply | 1207RSB | |
| EndoFree Plasmid Maxi Kit | Qiagen | 12362 | |
| 0.22 μm PVDF sterile filter | Millipore | SLGV013SL | |
| electrical hair trimmer | Commercially available | ||
| disposable safety razors | Commercially available | ||
| Silver Sulfadiazine Cream | Watson | NDC 0591-0810-55 | |
| Ketamine HCL | NDC 0856-2012-01 | ||
| Zylazine Sterile Solution | NADA 139-236 |
References
- Bins, A. D. A rapid and potent DNA vaccination strategy defined by in vivo monitoring of antigen expression. Nat Med. 11, 899-904 (2005).
- Pokorna, D., Rubio, I., Muller, M. DNA-vaccination via tattooing induces stronger humoral and cellular immune responses than intramuscular delivery supported by molecular adjuvants. Genet. Vaccines Ther. 6, 4 (2008).
- van den Berg, J. H. Optimization of intradermal vaccination by DNA tattooing in human skin. Hum. Gene Ther. 20, 181-189 (2009).
- Liu, M. A. DNA vaccines: a review. J. Intern. Med. 253, 402-410 (2003).
- Koide, Y., Nagata, T., Yoshida, A., Uchijima, M. DNA vaccines. Jpn. J. Pharmacol. 83, 167-174 (2000).
- Peachman, K. K., Rao, M., Alving, C. R. Immunization with DNA through the skin. Methods. 31, 232-242 (2003).
- Verstrepen, B. E. Improved HIV-1 specific T-cell responses by short-interval DNA tattooing as compared to intramuscular immunization in non-human primates. Vaccine. 26, 3346-3351 (2008).
- Potthoff, A. Immunogenicity and efficacy of intradermal tattoo immunization with adenoviral vector vaccines. Vaccine. 27, 2768-2774 (2009).
- Quaak, S. G. DNA tattoo vaccination: effect on plasmid purity and transfection efficiency of different topoisoforms. J. Control Release. 139, 153-159 (2009).
- Pokorna, D. Vaccination with human papillomavirus type 16-derived peptides using a tattoo device. Vaccine. 27, 3519-3529 (2009).
