Peau tatouage comme une nouvelle approche pour la livraison des vaccins ADN
Summary
Tatouage de la peau est un moyen puissant et sûr de vaccin à ADN livraison par voie intradermique. Ici, un ADN plasmidique codant pour la EGFP est délivré par le tatouage sur la peau d'une souris de laboratoire, et l'expression de la EGFP dans les cellules de la peau est alors contrôlé par microscopie confocale.
Abstract
Base d'acide nucléique vaccination est un sujet d'intérêt croissant, en particulier l'ADN plasmidique (ADNp) codant pour des antigènes immunologiquement importants. Après la ADNp ingénierie est administré aux vaccins, il est transcrite et traduite en protéines immunogènes qui peuvent provoquer des réactions du système immunitaire. De nombreux moyens de fournir des vaccins à ADN ont été étudiées, mais chaque itinéraire de livraison a ses propres avantages et inconvénients. Tatouage de la peau est une nouvelle technique qui est sûr, rentable et pratique. En outre, les piqûres infligées par l'aiguille pourrait également servir un adjuvant puissant. Ici, on a) démontrer l'administration intradermique de codage ADN plasmidique amélioré la protéine fluorescente verte (pCX-EGFP) dans un modèle de souris à l'aide d'un dispositif de tatouage et b) de confirmer l'expression effective de l'EGFP dans les cellules de la peau en utilisant la microscopie confocale.
Protocol
Representative Results
Discussion
La vaccination par ADN est considéré comme plus sûr que les stratégies de vaccination traditionnels car il ne nécessite pas de manipulation, ou exposer les vaccins, les agents pathogènes vivants ou atténués 4. Toutefois, le résultat de la vaccination ADN dépend fortement de l'itinéraire de livraison. La peau est abondante dans les cellules présentatrices d'antigène, comme les cellules de Langerhans et les cellules dendritiques 1, et donc un site idéal pour la vaccination en te…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nous tenons à remercier tous les membres du Laboratoire Kong et le Dr Yan Deng chez Core microscopie, Bureau de la science collaborative, NYUMC pour leur aide et soutien technique. Ce travail a été soutenu par une subvention pilote à partir du Centre de New York University for AIDS Research (CFAR, NIH AI027742).
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalogue Number | Comments |
| pCX-EGFP plasmid DNA | Clontech | ||
| STEALTH Rotary Tattoo System | Worldwide Tattoo Supply | STEALTH-L | |
| Tattoo needles | Worldwide Tattoo Supply | 1207RSB | |
| EndoFree Plasmid Maxi Kit | Qiagen | 12362 | |
| 0.22 μm PVDF sterile filter | Millipore | SLGV013SL | |
| electrical hair trimmer | Commercially available | ||
| disposable safety razors | Commercially available | ||
| Silver Sulfadiazine Cream | Watson | NDC 0591-0810-55 | |
| Ketamine HCL | NDC 0856-2012-01 | ||
| Zylazine Sterile Solution | NADA 139-236 |
References
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