تقييم الشريان المقاومة الفئران وظيفة عن طريق الضغط تخطيط العضل
Summary
في تخطيط العضل الضغط، هي التي شنت على شريحة صغيرة سليمة من سفينة على اثنين قنية صغيرة وضغط لضغط اللمعية مناسبة. هنا، نحن تصف طريقة لقياس استجابة ارتخاء وعائي من الفأرة 3<sup> طريق</sup> النظام الشرايين المساريقي في C57 وsGCα<sub> 1</sub<sup> – / -</sup> الفئران باستخدام تخطيط العضل الضغط.
Abstract
نظم مخطاط العضل الضغط هي بشكل رائع مفيد في تقييم وظيفي من الشرايين الصغيرة، ضغط لضغط بطريق مناسبة. في حالة فسيولوجية قرب المحرز في تخطيط العضل الضغط يسمح توصيف متعمقة من الاستجابات الذاتية للمؤثرات الدوائية والفسيولوجية، والتي يمكن استقراء لفي السلوك المجراة من السرير الوعائي. مخطاط العضل الضغط لديها العديد من المزايا أكثر من myographs الأسلاك التقليدية. على سبيل المثال، يمكن دراستها سفن أصغر مقاومة في الضغوط داخل اللمعة لرقابة مشددة وذات الصلة من الناحية الفسيولوجية. هنا، علينا أن ندرس قدرة 3 ش النظام الشرايين المساريقي (3-4 مم طويل)، preconstricted مع فينيليفرين، لايتي-الاسترخاء في استجابة لأستيل. هي التي شنت الشرايين المساريقي على اثنين قنية متصلا نظام الضاغط ومختومة أن يتم الحفاظ على الضغط المستمر من 60 مم زئبق. قطر التجويف والخارجي للسفينة هي المستمر وسجلت خبيث باستخدام كاميرا الفيديو، مما يسمح الكمي الوقت الحقيقي من تضيق الأوعية وارتخاء وعائي ردا على فينيليفرين وأستيل كولين، على التوالي.
للتدليل على تطبيق تخطيط العضل الضغط لدراسة مسببات مرض القلب والأوعية الدموية، قمنا بتقييم وظائف الاوعية الدموية التي تعتمد على البطانة في نموذج الفئران من ارتفاع ضغط الدم النظامية. الفئران تعاني من نقص في α 1 الوحيدات من محلقة يعترضه القابلة للذوبان (sGCα 1 – / -) هي ارتفاع ضغط الدم عندما على 129S6 (S6) الخلفية (sGCα 1 -/-S6) ولكن ليس عندما على C57BL / 6 (B6) الخلفية (sGCα 1 -/-B6). باستخدام تخطيط العضل الضغط، علينا أن نظهر أن sGCα النتائج 1 نقص في ضعف ارتخاء وعائي التي تعتمد على البطانة. الخلل الأوعية الدموية أكثر وضوحا في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران، من المحتمل contributiنانوغرام إلى ارتفاع ضغط الدم في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران.
تخطيط العضل الضغط هي تقنية بسيطة نسبيا، ولكن حساسة ومفيدة ميكانيكيا التي يمكن استخدامها لتقييم تأثير مختلف المحفزات على انقباض الأوعية الدموية والاسترخاء، وبالتالي زيادة البصيرة لدينا في الآليات الكامنة وراء مرض القلب والأوعية الدموية.
Introduction
وتستخدم أنظمة مخطاط العضل الضغط لقياس وظيفة فسيولوجية وخصائص الشرايين الصغيرة والأوردة والأوعية الأخرى. هي التي شنت على شريحة صغيرة سليمة من الشريان أو الوريد على اثنين قنية زجاجية صغيرة وضغط لضغط اللمعية مناسبة، والسماح للسفينة للحفاظ على معظم الخصائص في الجسم الحي (الشكلان 1 و 2). في حالة فسيولوجية قرب في مخطاط العضل ضغط يعكس السلوك في الجسم الحي من السرير الأوعية الدموية، مما يسمح التحقيق في الخصائص الذاتية (على سبيل المثال لهجة عضلي) من سفن معزولة. بعض من مزايا تخطيط العضل الضغط على تخطيط العضل الأسلاك، حيث يتم تقييم تقلص العضلات عن طريق اقتران الميكانيكية مباشرة إلى محول القوة 1، وتشمل (ط) أن الشرايين المقاومة الصغرى، التي تحدد المقاومة الشاملة وضعت في نظام الأوعية الدموية، ويمكن دراستها، في حين ومخطاط العضل سلك تقتصر على الشرايين قناة أكبر، (الثاني) ريتم تقليل قبعة من مخاطر تضر البطانة منذ أي أسلاك يجب أن تمرر من خلال التجويف السفينة، (الثالث) أن الشكل الطبيعي للسفينة يتم الاحتفاظ أفضل، و (رابعا) أن البعد سفينة يمكن دراستها في مجموعة واسعة من الضغوط أو إجهاد القص 2.
يمكن دراسة السفن الصغيرة تكون أكثر إفصاحا من دراسة الشرايين قناة أكبر للمساعدة في فهم الآليات الجزيئية الفيزيولوجيا المرضية والتي تساهم في تغير نغمة الأوعية الدموية في أمراض القلب والشرايين مثل ارتفاع ضغط الدم. على سبيل المثال، يمكن أن يظهر ضعف في وظيفة بطانة الأوعية الدموية المرتبطة تغذية الفئران حمية عالية الدهون لمدة 8 أسابيع في 2 ND-النظام الشرايين المساريقي 3 ولكن ليس في حلقات الأبهر (الشكل 3). ميزة أخرى لتخطيط العضل ضغط انقباض عضلي هو أن الجوهرية للسفينة الضغط موجود، وأن دور ووظيفة البطانة في هذه الظاهرة يمكن دراستها. هنا، ونحن أن descrمتد استخدام مخطاط العضل الضغط لدراسة تفاعل الأوعية الدموية من الماوس المساريقي 3 ش النظام الشرايين مقاومة في محيط من أكسيد النيتريك ضعف (NO)، المركب الإشارة.
Protocol
Representative Results
Discussion
الفئران هي نموذج تجريبي المفضل لكثير من المحققين، وذلك جزئيا بسبب إمكانية إدخال تعديلات وراثية، وبالتالي توليد نماذج الماوس لالفيزيولوجيا المرضية الإنسان. وضع فعال في الأوعية المقاومة الصغيرة ولكن ليس من السفن قناة أكبر يحدد إلى حد كبير تنظيم تدفق الدم في جميع أنح?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
سيكون الكتاب أن نعترف الدكاترة. بول هوانغ وديمتري Atochin للاستخدام من DMT الضغط مخطاط العضل والدكاترة. Binglan يو تشونغ لى وعن توفير الفئران التي تغذت على حمية عالية الدهون أو نظاما غذائيا عاديا.
مصدر التمويل
وأيد هذا العمل من قبل عالم التنمية المنحة 10SDG2610313 من جمعية القلب الأمريكية (لES بايز)، وإلينور ومايلز شور 50 برنامج زمالة الذكرى للعلماء في الطب من كلية الطب في جامعة هارفارد (لES بايز).
Materials
| Name | Company | Cataloge No. |
| NaCl | Fisher Scientific | BP358 |
| CaCl2 (2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 |
| KCl | Sigma | P9333 |
| MgSO4 | Fisher Scientific | M65-500 |
| KH2PO4 | Sigma | P3786 |
| NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328 |
| NaOH | Fisher Scientific | S318 |
| D-Glucose | Sigma | G8270 |
| EDTA | Fisher Scientific | BP121 |
| HEPES | Sigma | H3375 |
| Phenylephrine | Acros Organics | AC20724 |
| Acetylcholine | Sigma | A6625 |
| Pressure Myograph System | DMT |
References
- Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. Mesenteric artery contraction and relaxation studies using automated wire myography. J. Vis .Exp. (55), e3119 (2011).
- Arribas, S. M., Daly, C. J., McGrath, I. C. Measurements of vascular remodeling by confocal microscopy. Methods Enzymol. 307, 246-273 (1999).
- Lei, C., Yu, B., et al. Inhaled Nitric Oxide Attenuates the Adverse Effects of Transfusing Stored Syngeneic Erythrocytes in Mice with Endothelial Dysfunction after Hemorrhagic Shock. Anesthesiology. , (2012).
- Buys, E. S., Cauwels, A., et al. sGCα1β1 attenuates cardiac dysfunction and mortality in murine inflammatory shock models. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 297 (2), H654-H663 (2009).
- Buys, E. S., Sips, P., et al. Gender-specific hypertension and responsiveness to nitric oxide in sGCα1 knockout mice. Cardiovasc. Res. 79 (1), 179-186 (2008).
- Panza, J. A., Quyyumi, A. A., Brush, J. E., Epstein, S. E. Abnormal endothelium-dependent vascular relaxation in patients with essential hypertension. N. Engl. J. Med. 323 (1), 22-27 (1990).
- Huang, P. L., Huang, Z., et al. Hypertension in mice lacking the gene for endothelial nitric oxide synthase. Nature. 377 (6546), 239-242 (1995).
- Friebe, A., Koesling, D. The function of NO-sensitive guanylyl cyclase: what we can learn from genetic mouse models. Nitric Oxide. 21 (3-4), 149-156 (2009).
- Ehret, G. B., Munroe, P. B., et al. Genetic variants in novel pathways influence blood pressure and cardiovascular disease risk. Nature. 478 (7367), 103-109 (2011).
- Buys, E. S., Raher, M. J., et al. Genetic modifiers of hypertension in soluble guanylate cyclase alpha1-deficient mice. J. Clin. Invest. 122 (6), 2316-2325 (2012).
- Kauffenstein, G., Laher, I., Matrougui, K., Guerineau, N. C., Henrion, D. Emerging role of G protein-coupled receptors in microvascular myogenic tone. Cardiovascular Research. 95 (2), 223-232 (2012).
- Ruilope, L. M. Hypertension in 2010: Blood pressure and the kidney. Nat. Rev. Nephrol. 7 (2), 73-74 (2011).
- Michael, S. K., Surks, H. K., et al. High blood pressure arising from a defect in vascular function. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (18), 6702-6707 (2008).
- Mendelsohn, M. E. In hypertension, the kidney is not always the heart of the matter. J. Clin. Invest. 115 (4), 840-844 (2005).
