Summary

评估抗小鼠动脉功能使用压力Myography

Published: June 07, 2013
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Summary

在压力myography,一艘船一个完整的小部分安装到两个小插管,加压到一个合适的管腔压力。在这里,我们描述的方法来衡量鼠标3的血管舒张反应<sup> RD</sup为了在C57和sGCα的肠系膜动脉<sub> 1</sub<sup> – / -</sup>小鼠使用压力myography。

Abstract

压力肌动描记系统是精美实用的小动脉功能评估,加压到一个合适的透压力。接近生理条件实现压力myography的允许深入刻画的内在反应的药理和生理刺激,可以外推到在体内行为的血管床。压力肌动描记有几个优点,比传统的线myographs。例如,较小的阻力血管,可以研究在严格控制和生理相关的腔内压力。在这里,我们学习三阶肠系膜动脉(长3-4毫米),预先使用新福林,血管放松对乙酰胆碱的反应能力。肠系膜动脉插管连接到加压和密封系统,保持在恒定的压力为60毫米汞柱的安装。容器的内腔和外直径是后续的狡黠的记录,可使用视频摄像头,允许实时定量去氧肾上腺素和乙酰胆碱的血管收缩和血管舒张,。

为了演示的适用性的压力myography研究心血管疾病的病因学,我们评估了在小鼠模型的全身性高血压的内皮依赖性的血管功能。高血压缺陷小鼠可溶性鸟苷酸环化酶(sGCα1 – / – )的α亚基上129S6(S6)的背景(sGCα1 -/-S6),但不是当上C57BL / 6(B6)背景(sGCα 1 -/-B6)。使用压力myography,我们证明了sGCα1缺乏业绩受损的内皮依赖性血管舒张。血管功能障碍更加明显在sGCα1 -/-S61sGCα-/-B6小鼠,可能贡献的纳克较高的血压比sGCα1 -/-B6小鼠在sGCα1 -/-S6。

压力myography是一个比较简单,但敏感机制有用的技术,可用于评估各种刺激血管的收缩和舒张的效果,从而增强我们深入了解心血管疾病的机制。

Introduction

压力肌动描记系统用来测量小动脉,静脉和其他血管的生理功能和属性。动脉或静脉的一个完整的小部分被安装到两个小玻璃插管,加压至一个合适的腔的压力,使容器保持其大部分在体内的特征( 图12)。在压力肌动描记接近生理条件反映了体内的血管床的行为,允许调查孤立船只的内在属性( 生肌音)。压力myography超过的线myography,肌肉收缩的评估是通过直接的机械耦合的力换能器1的一些优点,包括(i)微动脉阻力,它定义了在血管系统的整体电阻,可以研究,而丝肌动描记限于较大的动脉导管,(ⅱ)吨帽子来损伤血管内皮细胞的风险被降低了,因为没有电线需要通过血管腔,(ⅲ),更好地保持该船只的自然形状,及(iv)可以在范围广泛的研究,容器尺寸压力或剪切力2。

研究微船舶可以比学习更大的动脉导管,以帮助了解病理生理学和分子机制,有助于心血管疾病如高血压血管张力改变更多的信息。例如,8周高脂肪的饮食喂养小鼠血管内皮功能相关的减值可以证明在第二阶肠系膜动脉,但不是在主动脉环( 图3)。压力myography的另一个优点是,内在生肌收缩的压力容器是否存在,并可以研究,在这种现象中的血管内皮细胞的作用和功能。在这里,我们DESCRIBE使用压力肌动描记小鼠肠系膜三阶阻力动脉血管反应性研究中设置的障碍一氧化氮(NO)-cGMP信号。

Protocol

1。溶液的制备 500X EDTA股票:称取500毫克EDTA钠2·2H 2 O,溶于50毫升去离子水。在室温下保存。 氯化钾去极化的解决方案。 准备K10X原液:3.69克氯化钠,氯化钾,18.64克0.36克硫酸镁无水,0.41克KH 2 PO 4,0.46克CaCl 2·2H 2 O溶解在250毫升的去离子水。在室温下保存。 对于100毫升最终的氯化钾溶液1X去极化:将0.21的NaHCO 3,0.18克?…

Representative Results

NO的中心参与血压体内平衡维持在6,在动物模型中7人类。控制血管平滑肌松弛的能力NO介导的可溶性鸟苷酸环化酶(SGC),含血红素的异二聚体酶生成cGMP的8。最近,血压修改遗传变异被确定轨迹包含sGCα1和1sGCβ基因,说明在人类9调节血压相关的SGC。有趣的是,雄性小鼠缺乏SGC(sGCα1 – / – )的α亚基上129S6(S6)的背景(sGCα1</…

Discussion

老鼠是许多研究者的实验模型的选择,部分是因为引进遗传修饰小鼠模型,从而产生人类生理的可能性。作用于血管的阻力小的状态,但并不代表较大的导管容器主要确定了整个血管系统11的血流量的调节。动脉阻力的大小,在小动物,如小鼠,可防止使用钢丝肌动描记研究微血管功能。压力myographs不仅克服这个限制,但也允许在接近生理条件下,血管功能的测量。

?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

作者想承认DRS。黄保罗和德米特里Atochin的的使用DMT的压力肌动描记和DRS。冰蓝羽和庄磊老鼠喂食高脂肪的饮食或饮食标准。

资金来源

这项工作是支持的科学家发展格兰特10SDG2610313从美国心脏协会(ES收购),埃莉诺和万里海岸50周年纪念奖学金计划学者在哈佛医学院医学(ES收购)。

Materials

Name Company Cataloge No.
NaCl Fisher Scientific BP358
CaCl2 (2H2O) Fisher Scientific C79-500
KCl Sigma P9333
MgSO4 Fisher Scientific M65-500
KH2PO4 Sigma P3786
NaHCO3 Fisher Scientific BP328
NaOH Fisher Scientific S318
D-Glucose Sigma G8270
EDTA Fisher Scientific BP121
HEPES Sigma H3375
Phenylephrine Acros Organics AC20724
Acetylcholine Sigma A6625
Pressure Myograph System DMT

References

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Cite This Article
Shahid, M., Buys, E. S. Assessing Murine Resistance Artery Function Using Pressure Myography. J. Vis. Exp. (76), e50328, doi:10.3791/50328 (2013).

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