Subaraknoid Kanama bir fare modeli
Summary
Willis perforasyon intralüminal Circle subaraknoid kanama standartlaştırılmış bir fare modeli tarif edilmektedir. Gemi perforasyon ve subaraknoid kanama intrakranial basınç izleme tarafından izlenir. Buna ek olarak, çeşitli çok önemli parametreler kaydedilir ve fizyolojik koşulları sağlamak için kontrol edilir.
Abstract
Bu Video yayında subaraknoid kanama (SAK), standart bir fare modeli sunulmuştur. Kanama Willis perforasyon (KİP) endovasküler Çemberi tarafından uyarılan ve intrakranial basınç (ICP) izleme ile kanıtlanmıştır. Böylece arteriyel dolaşımı çevreleyen subaraknoid boşluk ve serebellar çatlaklar homojen bir kan dağılımı elde edilir. Vücut ısısı, sistemik kan basıncı, kalp hızı ve hemoglobin doygunluk: Hayvan Fizyolojisi, entübasyon, mekanik ventilasyon, ve çeşitli fizyolojik ve kardiyovasküler parametreler sürekli on-line izleme tarafından yapılmaktadır. Bu şekilde serebral perfüzyon basıncı sıkı bir şekilde ekstravaze kan daha az değişken bir hacim içinde elde izlenebilir. Bu farelerde endovasküler filament perforasyon daha iyi standardizasyonu sağlar ve tüm model yüksek tekrarlanabilir yapar. Bu nedenle, vahşi tip ve genetik ve farmakolojik çalışmaları için patofizyolojik hazırly değişmiş fareler.
Introduction
SAK hastalar için en yararlı sonuç ile inme alt tipi olduğu: Hastaların% 40 kanama 1 sonra bir ay içinde ölür ve hayatta kalanlar nadiren klinik olarak olumlu bir sonuç var.
Spontan UAHS (% 80) büyük çoğunluğu, çoğunlukla arter, baziler arter ve orta serebral arter (MCA) 2 iletişim anterior ve posterior boyunca yer intrakranial anevrizmaların yırtılması kaynaklanır.
Bu anevrizma hayvanlarda Modele zordur ve bu nedenle SAK hayvan modelleri ya da subaraknoid boşluk / beyin veya ventriküllere subaraknoid kabın endovasküler delme ile kan enjeksiyonu ile gerçekleştirilir.
Kan hacmi doğrudan 3 kontrol edilebilir gibi cisterna magna içine otolog kan enjeksiyonu yapmak kolay ve tekrarlanabilir. Ne yazık ki SAK fizyopatolojinin bazı yönleri, örneğindamar yaralanması, bu prosedür ile model olamaz. SAK indüksiyonu için başka bir teknik yaklaşım, bir intrasisternal ven 4 açılmasıdır.
Ancak, MCA şube intraluminal CWP modelleri insanlarda patofizyolojisi en yakın 5 prosedür olarak görünmektedir. Yöntem, Veelken ve arkadaşları 6,7 ile Bederson ve arkadaşları tarafından ve aynı zamanda geliştirilmiş ve ilk olarak sıçanlarda tarif edilmiştir. Daha sonra intraluminal perforasyon modeli farelere 8,9 uyarlanmıştır. Bir filament dış karotid arter (ECA) içine sokulur ve iç karotid arter (ICA) ile kafa tabanına ilerletilir. MCA dallanma noktasında filaman gemi deler ve kafatası tabanında subaraknoid boşluk içine bir kanama neden olur. Kan daha sonra çatlamalar ve kan damarları boyunca kalan subaraknoid alana dağıtır. Kanama perforasyon yerinde pıhtı oluşumu durdu, ama rebleedings, WH edilirich hastalarda 10, oluşabilir genellikle zararlıdır. Buna göre, endovasküler lif modeli son yıllarda yaygın olarak kullanılan SAK modeli oldu. Filaman perforasyon modelinde en sık bahsedilen dezavantajı kanama hacmi doğrudan kontrol edilemeyen ve bu nedenle de değişken olabilir olmasıdır. Bu değişkenlik anlamlı hayvan fizyolojisi ve post-hemorajik ICP sıkı kontrolü ile azaltılabilir.
Fareler, genetik olarak modifiye edilmiş suşların çok sayıda mevcut olan büyük avantaj vardır. Ancak, küçük boyutları için cerrahi işlemler büyük türleri, örneğin, sıçan ya da tavşan daha karmaşık olma eğilimindedir. Bu nedenle farelere sıçanlar için geliştirilen tekniklerin küçültülür genellikle fareler hemoglobin saturasyonu ve kalp hızı izleme için çok sınırlı bir vücut ağırlığı ve kan hacmi noninvaziv kan basıncı ve kan gazı analizi için teknikleri yanı sıra gibi örneğin istenen sonuçlara yol açmazmümkün uygulanmalıdır. Buna uygun olarak, mevcut yayının amacı farelerde SAK için filaman delme modeli tanımlamak için ve bu model bir standart ve yüksek ölçüde tekrarlanabilir biçimde yapılabilir ne kadar göstermektir.
Protocol
Representative Results
Discussion
SAK sonrası tedavi seçenekleri kısıtlı ve çoğunlukla etkisiz vardır. Bu nedenle post-hemorajik beyin hasarının patofizyolojisi daha yeni tedavi hedefleri belirlemek ve yeni tedavi yaklaşımları geliştirmek için anlaşılması gerekir. Standardize ve genetiği değiştirilmiş hayvanlar, yani farelerde, iyi tekrarlanabilir hayvan modelleri gibi soruşturma için çok önemlidir. Yakından insanlarda patofizyolojiye benzer olarak cwp modeli SAK için yaygın olarak kullanılan bir model haline gelmi…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Güncel araştırma Solorz-Zak Araştırma Vakfı tarafından finanse edilmektedir.
Materials
| Equipment | |||
| operation microscope | Leica | KL2500 | |
| isoflurane vaporizer | Harvard Instruments | Continuous Flow Vaporizer | |
| respirator | Hugo Sachs | Minivent 845 | |
| microcapnograph | Hugo Sachs | Type 340 | |
| temperature controller | FHC | DC Temperature Controller | |
| dental drill | Paggen | Labset- N | |
| ICP monitor | Codman | ICP monitor | |
| blood pressure monitor | AD Instruments | Bridge Amp FE221 | |
| syringe pump | World Precision Instruments | SP101IZ | |
| pulsoximeter | Kent Scientific | MouseSTAT | |
| LDF | Perimed | Periflux 5000 | |
| analog data monitor | AD Instruments | Power Lab 16/35 | |
| Material | |||
| cement for ICP probe fixation | Speiko | Carboxylate cement | |
| glue for LDF probe fixation | Bob Smith Industries | Cyanoacrylate glue (Maxi Cure and Insta Set) | |
| venous catheter | Johnson & Johnson | Jelco winged i.v. catheter; REF 4076 | modified intubation tube |
| tubing for femoral catheter | Smiths Medical | Fine Bore Polythene Tubing; ID 0.28 mm OD 0.61 mm; REF 800/100/100 | cut to 30 cm length |
| filament for vessel perforation | Ethicon | Prolene 5-0 | cut to 12 mm length |
| surgical equipment | Fine Scientific Instruments | forceps medical #5, vessel scissors 8 cm, microclip 4 mm jaw |
References
- Cahill, J., Zhang, J. H. Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction. Stroke. 40, 86-87 (2009).
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. Lancet. 369, 306-318 (2007).
- Lin, C. L., et al. A murine model of subarachnoid hemorrhage-induced cerebral vasospasm. J. Neurosci. Methods. 123, 89-97 (2003).
- Altay, T., et al. A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice. J. Neurosci. Methods. 183, 136-140 (2009).
- Feiler, S., Friedrich, B., Scholler, K., Thal, S. C., Plesnila, N. Standardized induction of subarachnoid hemorrhage in mice by intracranial pressure monitoring. J. Neurosci. Methods. 190, 164-170 (2010).
- Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke. 26, 1086-1091 (1995).
- Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats. Stroke. 26, 1279-1283 (1995).
- Kamii, H., et al. Amelioration of vasospasm after subarachnoid hemorrhage in transgenic mice overexpressing CuZn-superoxide dismutase. Stroke. 30, 867-871 (1999).
- Parra, A., et al. Mouse model of subarachnoid hemorrhage associated cerebral vasospasm: methodological analysis. Neurol. Res. 24, 510-516 (2002).
- Broderick, J. P., Brott, T. G., Duldner, J. E., Tomsick, T., Leach, A. Initial and recurrent bleeding are the major causes of death following subarachnoid hemorrhage. Stroke. 25, 1342-1347 (1994).
- Thal, S. C., Plesnila, N. Non-invasive intraoperative monitoring of blood pressure and arterial pCO2 during surgical anesthesia in mice. J. Neurosci. Methods. 159, 261-267 (2007).
- Hockel, K., Trabold, R., Scholler, K., Torok, E., Plesnila, N. Impact of anesthesia on pathophysiology and mortality following subarachnoid hemorrhage in rats. Exp. Transl. Stroke Med. 4, 5 (2012).
- Wang, Z., Schuler, B., Vogel, O., Arras, M., Vogel, J. What is the optimal anesthetic protocol for measurements of cerebral autoregulation in spontaneously breathing mice?. Exp. Brain Res. 207, 249-258 (2010).
- Schwartz, A. Y., Masago, A., Sehba, F. A., Bederson, J. B. Experimental models of subarachnoid hemorrhage in the rat: a refinement of the endovascular filament model. J. Neurosci. Methods. 96, 161-167 (2000).
- Feiler, S., Plesnila, N., Thal, S. C., Zausinger, S., Scholler, K. Contribution of matrix metalloproteinase-9 to cerebral edema and functional outcome following experimental subarachnoid hemorrhage. Cerebrovasc. Dis. 32, 289-295 (2011).
