Abstract
जंगली जानवरों सामान्यतः helminths की एक विस्तृत श्रृंखला से parasitized रहे हैं. helminths के चार प्रमुख प्रकार "roundworms" (नेमाटोड), "कांटेदार की अध्यक्षता में कीड़े" (acanthocephalans), "flukes" (trematodes), और "tapeworms" (cestodes) कर रहे हैं. helminths इकट्ठा करने के लिए इष्टतम विधि सबसे helminths अभी भी जिंदा हो जाएगा के बाद से कम से कम 4-6 घंटे मर गया है कि एक मेजबान की जांच करने के लिए है. एक पूरी तरह से शव - परीक्षा का आयोजन किया जाना चाहिए और सभी प्रमुख अंगों की जांच की. अंग पानी और एक स्टीरियो माइक्रोस्कोप के तहत जांच की सामग्री चलाने के अंतर्गत एक 106 माइक्रोन चलनी पर धोया जाता है. (या तो 70% इथेनॉल, 10% बफर formalin, या शराब से formalin-एसिटिक एसिड में) सभी helminths गिने जाते हैं और एक प्रतिनिधि संख्या तय कर रहे हैं. प्रजातियों की पहचान के लिए, helminths या तो lactophenol (नेमाटोड और छोटे acanthocephalans) में मंजूरी दे दी है या (trematodes, cestodes, और बड़े acanthocephalans) हैरिस 'hematoxylin या Semichon के लाल रंग का उपयोग दाग. Helminths Keye हैंविभिन्न संरचनाओं (जैसे. पुरुष नेमाटोड में spicules या cestodes में rostellum) का परीक्षण करके प्रजातियों के लिए डी. यहाँ उल्लिखित प्रोटोकॉल किसी भी हड्डीवाला पशु के लिए लागू किया जा सकता है. वे विभिन्न अंगों को पहचानने और अन्य ऊतक मलबे या पेट सामग्री से helminths अंतर करने में सक्षम होने पर कुछ विशेषज्ञता की आवश्यकता होती है. संग्रह, संरक्षण, और धुंधला न्यूनतम उपकरणों और अभिकर्मकों की आवश्यकता है कि सरल तकनीक है. विशेष रूप से प्रजातियों के वर्गीकरण पहचान,, बहुत समय लगता हो सकता है और एक विशेषज्ञ या डीएनए विश्लेषण के लिए नमूनों को प्रस्तुत करने की आवश्यकता हो सकती है.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Fixing | |||
Alcohol-Formalin-Acetic Acid (AFA) | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) F75F-1GAL (formaldehyde) BP2401500 (glacial acetic acid) |
Ethanol 85% (85 ml) + formaldehyde 37% (10 ml) + glacial acetic acid (5 ml) |
Ethanol for killing and long-term preservation | Fisher Scientific | A407-1 | Ethanol 100% (70 ml) + distilled water (30 ml) |
Ethanol for fixing and DNA studies | Fisher Scientific | AC61511-0010 | Ethanol 80-90% (80-90 ml) + distilled water (20-10 ml), respectively |
Formalin Buffered | Fisher Scientific | SF100-4 | Formalin 10% (10 ml) + distilled water (90 ml) |
Glycerine-alcohol | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) AC15365-1000 (glycerine) |
Ethanol 70% (95 ml) + glycerine (5 ml) |
Clearing, staining and mounting | |||
Ethanol for dehydrating during staining | Fisher Scientific | A407-1 | Ethanol 80%, 95%, 100% (80 ml, 95 ml, 100 ml) + distilled water (20 ml, 5 ml, 0 ml) |
Lactophenol | Fisher Scientific | R400-27 | - |
Phenol | Fisher Scientific | A931I-1 (phenol) A407-1 (ethanol) |
Phenol 100% (80 ml) + ethanol 100% (20 ml) |
Harris’ Hematoxylin | Fisher Scientific | S25347 (hematoxylin) A407-1 (ethanol) A567-500 (ammonium aluminum sulfate) S25553 (sodium iodate) |
Hematoxylin (5 g) + ethanol 100% (50 ml) + ammonium aluminum sulfate (100 g) + sodium iodate (0.37 g) + distilled water (1,000 ml) |
Semichon’s acetic carmine | Fisher Scientific | BP2401500 (glacial acetic acid) S25236 (carmine) A407-1 (ethanol) |
Glacial acetic acid (100 ml) + carmine (1.5 g) + distilled water (100 ml). Heat in a boiling water bath for 15 min and cool. Filter to make stock solution. Mix 1:2 with 70% alcohol for staining. |
Xylene | Fisher Scientific | X4-4 | Use only under a chemical fume hood. |
Methyl salicylate | Fisher Scientific | S25437 | - |
Ethanol basic | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) S25159A (concentrated ammonium hydroxide) |
Ethanol 70% (100 ml) + ammonium hydroxide (0.1 ml) |
Ethanol acid | Fisher Scientific | A407-1 (ethanol) SA9233-100 (hydrochloric acid) |
Ethanol 70% (99.5 ml) + hydrochloric acid (0.5 ml) |
Canada balsam | Fisher Scientific | B10-100 | - |
References
- Atkinson, C. T., Thomas, N. J. Parasitic Diseases of Wild Birds. Hunter, D. B. , John Wiley & Sons, Blackwell Press. Hoboken, New Jersey, USA. (2009).
- Parasitic Diseases of Wild Mammals. Samuel, W. M., Pybus, M. J., Kocan, A. A. , Second Edition, Iowa State University Press. Ames, Iowa, USA. (2001).
- Yamaguti, S. Parts 1 and 2. The Digenetic Trematodes of Vertebrates. Systema Helminthum. I, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1958).
- Yamaguti, S. Synopsis of Digenetic Trematodes of Vertebrates. I and II, Keigaku Publishing Company. Tokyo, Japan. (1971).
- Gibson, D. I., Jones, A., Bray, R. A. Keys to the Trematoda. 1, CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2002).
- Jones, A., Bray, R. A., Gibson, D. I. Keys to the Trematoda. 2, CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2005).
- Bray, R. A., Gibson, D. I., Jones, A. Keys to the Trematoda. 3, CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2008).
- Yamaguti, S. Acanthocephala of Vertebrates. Systema Helminthum. V, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1963).
- Yamaguti, S. The Cestodes of Vertebrates. Systema Helminthum. II, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1959).
- D, G. Keys to the Cestode Parasites of Vertebrates. CRC Handbook of Tapeworm Identification. , CRC Press Inc. Boca Raton, Florida, USA. (1986).
- Khalil, L. F., Jones, A., Bray, R. A. Keys to the Cestode Parasites of Vertebrates. , CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (1994).
- Yamaguti, S. The Nematodes of Vertebrates. Parts 1 and 2. Systema Helminthum. III, Interscience Publishers Inc. New York, New York, USA. (1961).
- Anderson, R. C., Chabaud, A. G., Willmott, S. Keys to the Nematode Parasites of Vertebrates: Archival Volume (Nos). 1-10. , CAB International Publishing and The Natural History Museum. Wallingford, Oxfordshire, UK. (2009).