ניטור של פרמטרים מערכתיים והבדיה המודינמית בעכברים
Summary
הסרט הזה מדגים כיצד לרכוש פרמטרים המודינמיים מערכתיים וכבדים בעכברים. כל הניטור כולל רכישה של פרמטרים חיוניים, לחץ מערכתי בדם, לחץ ורידים מרכזיים, קצב זרימת עורק כבד נפוץ, ולחץ וריד שער, כמו גם את קצב זרימת הפורטל בעכברים.
Abstract
השימוש במודלים של עכברים במחקר ניסיוני יש חשיבות עצומה ללימוד פיזיולוגיה של כבד והפרעות pathophysiological. עם זאת, בשל גודלו הקטן של העכבר, פרטים טכניים של הליך הניטור תוך הניתוחי המתאים לעכבר תוארו לעתים רחוקות. בעבר שכבר דווח בנוהל מעקב כדי לקבל פרמטרים המודינמית לחולדות. עכשיו, אנחנו מותאמים ההליך לרכישת פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים בעכברים, מינים פי עשר קטנים יותר מחולדות. סרט זה מדגים את המכשור של בעלי החיים, כמו גם את תהליך רכישת הנתונים הדרושים כדי להעריך פרמטרים המודינמיים מערכתיים וכבדים בעכברים. פרמטרים חיוניים, כולל טמפרטורת גוף, קצב נשימה וקצב לב נרשמו לאורך כל ההליך. פרמטרים המודינמית מערכתיים מורכבים של לחץ בעורק התרדמה (CAP) ולחץ מרכזי ורידים (CVP). פרמטרים זלוף כבדית כוללים פורטל vלחץ עין (PVP), קצב זרימת פורטל וכן את קצב הזרימה של העורק המשותף בכבד (טבלת 1). מכשור ורכישת נתונים כדי להקליט את הערכים נורמלים הושלמו בתוך 1.5 h. פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים נשארו בטווח נורמלי במהלך הליך זה.
הליך זה הוא מאתגר אבל אפשרי. יש לנו כבר מיושם בהליך זה כדי להעריך פרמטרים המודינמיים בכבד בעכברים נורמלים, כמו גם במהלך 70% כריתה חלקית ובאונת כבד הידוק ניסויים. אומר PVP לאחר כריתה (n = 20), הייתה 11.41 ± 2.94 CMH 2 O שהיה גבוה באופן משמעותי (P <0.05) מאשר לפני הכריתה (6.87 ± 2.39 CMH 2 O). התוצאות של אונת כבד מהדקת ניסוי הצביעו על כך שנוהל מעקב זה הוא רגיש ומתאים לאיתור שינויים קטנים בלחץ פורטל וקצב זרימת פורטל. לסיכום, הליך זה הוא אמין בידיהם של מיקרו מנתח מנוסה אבל צריך להיות מוגבל לexperiments לאן עכברים נחוצים ביותר.
Introduction
המטרה הכללית של הווידאו הזה הייתה להדגים הליך ניטור בזמן אמת לרכישת פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים. הרציונל לפיתוח הליך זה הוא גדול הערך שלה עבור התערבויות ניסיוניות בעכברים שדורשים קבלת פרמטרים המודינמית מערכתיים וכבדים. ההליך יכול להיות מיושם על בעלי חיים תמימים ובזמן או לאחר התערבות כירורגית ניסיונית hepato-מרה ניתנה, כגון כריתה חלקית, קשירת וריד שער והשתלה כבד.
רכישה של נתונים המודינמית כבד במכרסמים דורשת הליך פולשני המוצע. לא ניתן להשיג זלוף כבד הלא פולשני. עם זאת, יש חלופות לרכישת לחץ הדם המערכתי. טכניקות ניטור כגון טכניקת שרוול זנב 8 כבר נוצלו לרכישת לחץ הדם בשני חולדות ועכברים. טכניקת שרוול הזנב יכולה להיות מיושמת בconsciבעלי חיים מפוקפקים. כאשר מודדים את לחץ הדם, את החיה צריכה להיות ממוקמת וקבוע בתנוחה לא נוחה ספציפית. במדריך של מכשיר זנב השרוול, היצרן קובע כי עכברים עלולים להיות עצבניים והדגישו שעשויה להפחית את זרימת הדם בזנב. תחת נסיבות ש, לחץ דם ההיקפי שנרכשו בזנב עשוי להיות נמוך בהרבה מלחץ הדם המרכזי.
נוהל המעקב המלא בוצע עם צג מרובה ערוצים משולב באמצעות שורה של חיישנים לרכישת נתונים. לחץ הדם היה מתקבל על ידי הכנסת קטטר לתוך הכלי המתאים לאחר נתיחה זהירה מייקרו וחשיפה מתחת למיקרוסקופ. קצב הזרימה שנמדד על ידי הצבת זרימת בדיקה transonic מסביב לכל כלי.
אנחנו כבר דיווחו נוהל מעקב במהלך ניתוח דומה לחולדות וכתוצאה מסדרה מקיפה של הנתונים המודינמית פיסיולוגיים דומים לSinglנתוני דואר דיווחו מקבוצות אחרות 7. לכן אנחנו נחשבים בהליך זה כדי לייצג את בסיס טוב להתאמת לעכבר, מינים פי 10 קטנים יותר מהחולדה. ההבדל העיקרי להליך העכברוש הוא השימוש בצנתרי מילר לרכישת נתונים בלחץ דם ולא מערכת צנתר מבוסס נוזל. נתוני זרימה גם נרכשו עם בדיקות זרימת transonic, רק אלה קטנים בהרבה לכלי עכברוש המקבילים.
בשל גודלו הקטן של בעלי החיים, מכשור של עכברים הוא מאתגר מבחינה טכנית, אבל אפשרי. ברגע המכשור יושלם, רכישת נתונים וניתוח נתונים חיים העיקרי הוא פשוטה, שכן קובץ הגדרה מוגדר מראש יכול לשמש. קובץ ההגדרה יש להגדיר פעם אחת בתחילת סדרה של ניסויים וניתן לאחסן ולהשתמש בהם לכל הניסויים הבאים.
עד עכשיו אנחנו מוחלים בהליך זה כדי להעריך את ההשפעות המודינמית כבד בניסויים חריפים. מדדנו CAP וPVP לפני ומייד לאחר 70% כריתה חלקית (PH) ובהידוק / ניסויים מהדק-de. אנחנו הידקתי את רצועת hepato-התריסריון של האונה הימנית המייצגת 20% מהכבד המוני ואחרי הידוק קצר (5min) של החציון ואונה לרוחב שמאל מייצג לחלוטין 90% מהמסה הכבד. De-ההידוק התחיל עם שחרור המהדק מהאונה הימנית ואחריו לשחרר את החציון ואונה לרוחב עזבה. זמן הידוק מקסימאלי היה מתחת 10 דקות.
Protocol
Representative Results
Discussion
ניטור של פרמטרים המודינמיים בכבד הוא כלי מחקר חשוב בHepatology וניתוח כיס המרה. רכישה של נתונים המודינמית כבד מסייעת לאפיין את ההשפעה של נהלי כיס המרה על מערכת הדם. רכישה של נתונים המודינמית כבד נחוץ גם כדי לחקור את ההשפעה של תרופות המשפיעות לחץ פורטל וזרימת פורטל, למשל,…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
מחקר זה נתמך על ידי Ministery הגרמני הפדרלי לחינוך ולמחקר (BMBF) במימון "כבד רשת וירטואלית". אני רוצה להודות לפרנק שוברט ורנה גומפרט ממרכז התקשורת של Jena חולים האוניברסיטאי על עזרתם בהפקת הווידאו ויצירת האנימציה ואיזבל Jank להקלטת אודיו.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| PowerLab 16/30 | ADInstruments | PL3516 | |
| Quad Bridge Amp | ADInstruments | FE224 | Bridge amplifier |
| Animal Bio Amp | ADInstruments | FE136 | |
| Needle Electrodes for FE136 (3 pk) | ADInstruments | MLA1213 | |
| Perivascular Flowmeter Module | Transonic | TS420 | |
| Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB | Transonic | MA0.5PSB/MA1PSB | |
| SPR-1000 Mouse Pressure Catheter | Millar instruments | 841-0001 | |
| fluid filled catheter | Terumo | SR+DU2619PX | 26G, 0.64×19mm |
| micro scissors | F·S·L | No. 14058-09 | |
| micro serrefine | F·S·L | No.18055-05 | |
| Micro clamps applicator | F·S·L | No. 18057-14 | |
| Straight micro forceps | F·S·L | No. 00632-11 | |
| Curved micro forceps | F·S·L | No. 00649-11 | |
| needle-holder | F·S·L | No. 12061-01 | |
| 6-0 silk | ethicon | ||
| 6-0 prolene | ethicon | ||
| 7-0 prolene | ethicon | ||
| 10-0 prolene | ethicon | ||
| Tail cut-off device | Kent Scientific | www.kentscientific.com | |
| LabChart7 | ADInstruments | data analysis software |
References
- Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).
- Bernhard, W., et al. Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25 (6), 725-731 (2001).
- Cheever, A. W., Warren, K. S. Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow. 18, 405-407 (1963).
- Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine. Acta Trop. 89 (1), 13-16 (2003).
- Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. Venous resistance increases during rat anaphylactic shock. Shock. 29 (6), 733-739 (2008).
- Geerts, A. M., et al. Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation. Int. J. Exp. Pathol. 89 (4), 251-263 (2008).
- Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats. Lab Anim. 44 (3), 254-263 (2010).
- Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice. Hypertension. 25 (5), 1111-1115 (1995).
- Kuga, N., et al. Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse. J. Physiol.. 587 (Pt 4), 745-752 (2009).
- Muraki, T., Strain Kato, R. difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice. Psychopharmacology (Berl). 89 (1), 60-64 (1986).
- Nielsen, J. M., et al. Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration. Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293 (1), H534-H540 (2007).
- Sakamoto, M., et al. Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen. Eur. J. Clin. Invest. 35 (3), 220-225 (2005).
- Reverter, E., et al. Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis. Liver Int. 34 (1), 16-25 (2014).
