Neuronale Transfektionsmethoden

Transfektion – der Prozess der Übertragung von genetischem Material in Zellen – ist ein leistungsfähiges Instrument für die schnelle und effiziente Manipulation der Genexpression in Zellen. Da dieses Verfahren verwendet werden kann, um die Expression spezifischer Proteine zu verhindern oder die Expression von fremden oder modifizierten Proteinen anzutreiben, ist die Transfektion ein äußerst nützliches Instrument für die Untersuchung der zellulären und molekularen Prozesse, die die Neuronenfunktion regeln. Allerdings haben reife Nervenzellen eine Reihe von Eigenschaften, die es schwer machen sie zu transfizieren, deswegen sind spezialisierte Techniken zur genetischen Manipulation dieses Zelltyps erforderlich.

Dieses Video bespricht die Grundlagen und das Grundprinzip hinter der Transfektion von Neuronen. Drei allgemeine Strategien werden für die neuronale Transfektion diskutiert, darunter die Nukleofektion, die Genkanone und die virale Transduktion. Neben der Beschreibung, wie jedes dieser Verfahren die Probleme mit der Transfektion von Neuronen überwindet, umfasst die Präsentation eine Beschreibung, wie alle drei Verfahren durchgeführt werden. Schließlich werden mehrere Anwendungen der neuronalen Transfektion vorgestellt, wie die Expression der fluoreszierenden Tubulin Proteinen, um die Neuronenmorphologie zu visualisieren und selektives Gen-Silencing, um ein Zellkulturmodell der Parkinson-Krankheit zu erzeugen.