Muis Pneumonectomie Model van Compenserende Lung Groei

Summary

Mouse pneumonectomy is a commonly employed model of compensatory lung growth. This procedure can be used in conjunction with lineage tracing or transgenic mouse models to elucidate underlying mechanisms.

Abstract

In humans, disrupted repair and remodeling of injured lung contributes to a host of acute and chronic lung disorders which may ultimately lead to disability or death. Injury-based animal models of lung repair and regeneration are limited by injury-specific responses making it difficult to differentiate changes related to the injury response and injury resolution from changes related to lung repair and lung regeneration. However, use of animal models to identify these repair and regeneration signaling pathways is critical to the development of new therapies aimed at improving pulmonary function following lung injury. The mouse pneumonectomy model utilizes compensatory lung growth to isolate those repair and regeneration signals in order to more clearly define mechanisms of alveolar re-septation. Here, we describe our technique for performing mouse pneumonectomy and sham pneumonectomy. This technique may be utilized in conjunction with lineage tracing or other transgenic mouse models to define molecular and cellular mechanism of lung repair and regeneration.

Introduction

De hoofdfunctie van de long te voorzien van zuurstof en kooldioxide uitwisseling tussen een organisme en de atmosfeer. Bij de mens, een gastheer van aangeboren en verworven voorwaarden leiden tot een verminderde oppervlakte long gebied, wat resulteert in verminderde longfunctie. Dwz long – hoewel een groot aantal therapieën zoals inhalatiecorticosteroïden, bronchodilatoren, extra zuurstof en chronische mechanische ventilatie wordt gebruikt om de gevolgen van verminderde longfunctie ^1-3 beperken, zou de ideale therapie voor deze aandoeningen hergroei van functionele longweefsel bevorderen regeneratie.

Zoogdieren weefselregeneratie is goed gedocumenteerd. De Afrikaanse Stekelmuizen kunnen grote delen van de huid te regenereren zonder littekenvorming ^4. De distale falanx in de mens kan regenereren na letsel of amputatie ^5-7. Na pneumonectomie (PNX), compenserende long groei optreedt bij muizen ^8, ratten ^9, doengs ¹⁰ en ¹¹ mens. Per definitie, compenserende long groei gaat het niet alleen uitbreiding van bestaande luchtruim, maar opnieuw septatie van deze vergroot luchtruim met de uitbreiding van de bijbehorende microcirculatie ^12. Genexpressie analyse heeft aangetoond dat dit model recapituleert veel van de signalering evenementen van longontwikkeling ^13. Vier weken na muis PNX, alveolaire oppervlakte gelijk is aan die van schijn geopereerde dieren ^14. In dit manuscript, beschrijven we de muis PNX en sham PNX procedures.

Protocol

OPMERKING: Animal gebruik statement: Alle procedures in deze studie werden uitgevoerd met toestemming en volgens de richtlijnen van de Institutional Animal Gebruik en onderhoud Comité (IACUC) in Cincinnati Children's Hospital. Acht weken oude C57BL / 6J mannelijke muizen werden verkregen van Jackson Laboratories (Bar Harbor, ME) en men acclimatiseren gedurende één week vóór gebruik. Tot de operatie werden de dieren gehuisvest in een pathogeenvrije barrière-faciliteit en voorzien geautoclaveerd chow en gefilter…

Representative Results

. Een perceel van PNX en schijngeopereerde muis gewichten wordt gegeven in Figuur 6 In onze handen, overleving is consequent 95-100% voor zowel PNX en sham pneumonectomie. Voor een beschrijving van de wijze waarop de rechter long opnieuw groeit in dit model en het verwachte tijdsverloop, verwijzen we de lezer naar manuscripten van Gibney et al. 15 en Wang et al. 14 Een aantal gemeenschappelijke valkuilen moet vermeden worden om de muis…

Discussion

We hebben de meest gedetailleerde beschrijving van de muis PNX en muis schijnvertoning PNX procedures gemeld to-date. We hebben de lezer op de hoogte van een aantal van de gemeenschappelijke valkuilen die de onderzoekers leren van de procedure doorgaans tegenkomen gemaakt, en we hebben een aantal technieken ontwikkeld door ons laboratorium te verzachten tegen deze valkuilen geschetst. Andere laboratoria met behulp van dit model kunnen andere techniek aanpassingen hebben ontwikkeld of maken gebruik van verschillende inst…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments (optional)
6-inch Vascular Clip Applicator	Teleflex Medical (WECK)	137062
Horizon Small Titanium Red Clip	Teleflex Medical (WECK)	1201
Narrow Pattern 12cm Curved Forceps	Fine Science Tools	11003-12
Curved Serated 10 cm Graefe Forceps	Fine Science Tools	11052-10
Castroviejo Needle Holder	Fine Science Tools	12565-14
Straight 9 cm Strabismus Scissors (Blunt Tip)	Fine Science Tools	14075-09
Straight 8.5 cm Hardened Fine Scissors	Fine Science Tools	14090-09
Straight, Blunt Tip Cohan-Vannas Spring Scissors	Fine Science Tools	15000-12
Skin Glue	Gluture	32046
22 ga angiocatheter
24 ga angiocatheter
3 mL luer lock syringe
4 short retractors
2 long retractors
5-0 Prolene on curved cutting needle	Ethicon	8698G
0.5 mL syringe on 27 ga needle
Normal Saline
Buprenorphine
Press-n-Seal Wrap	Glad Products Company
12 inch X 12 inch cork board stack	Office Depot
70% Ethanol
Betadine
Mouse Ventilator	Hugo Sachs Elektronnik	Minivent Type 845
Isoflurane Vaporizer	OHMEDA	Excel 210 SE
artificial tear ointment	puralube	NDC: 17033-211-38