Here, we present detailed protocols for solid-state amide hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry (ssHDX-MS) and solid-state photolytic labeling mass spectrometry (ssPL-MS) for proteins in solid powders. The methods provide high-resolution information on protein conformation and interactions in the amorphous solid-state, which may be useful in formulation design.
बड़े पैमाने पर Spectrometric विश्लेषण द्वारा पीछा एमाइड / ड्यूटेरियम एक्सचेंज (ssHDX एमएस) और पक्ष-श्रृंखला photolytic लेबलिंग (SSPL एमएस) प्रोटीन चिकित्सा विज्ञान की lyophilized योगों निस्र्पक के लिए मूल्यवान हो सकता है। उपयुक्त प्रोटियोलिटिक पाचन द्वारा पीछा लेबल प्रोटीन संरचना और बातचीत पेप्टाइड स्तर के संकल्प के साथ मैप किया जा करने के लिए अनुमति देता है। प्रोटीन के बाद संरचनात्मक तत्वों मुख्य-चेन और अमीनो एसिड, अमीनो एसिड के अवशेष में परमाणुओं के विशिष्ट लेबलिंग प्रोटीन की संरचना और रचना में अंतर्दृष्टि प्रदान के पक्ष जंजीरों से रासायनिक बांड के एक नेटवर्क के द्वारा स्थिर रहे हैं। Lyophilized ठोस (जैसे, एफटीआईआर), ssHDX-एमएस और SSPL एमएस मात्रात्मक और साइट विशेष जानकारी उपलब्ध कराने में प्रोटीन का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया दिनचर्या विधियों के विपरीत। ड्यूटेरियम समावेश और गतिज मापदंडों की हद तक तेजी से और धीरे धीरे एमाइड पूल का आदान प्रदान करने के लिए संबंधित हो सकता है (एन तेजी, एन धीमी गति) और सीधे डिग्री को दर्शाता हैlyophilized योगों में प्रोटीन तह और संरचना के REE। स्थिर photolytic लेबलिंग बैक-विनिमय, ssHDX एमएस पर एक फायदा नहीं गुजरना पड़ता। यहाँ, हम Trehalose या सोर्बिटोल या तो युक्त lyophilized योगों में एक मॉडल के प्रोटीन के रूप में मायोग्लोबिन (एमबी) का उपयोग कर, ssHDX-एमएस और SSPL एमएस दोनों के लिए विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं।
प्रोटीन दवाओं बायोफर्मासिटिकल उद्योग के सबसे तेजी से बढ़ते क्षेत्र के हैं और हार्मोन संबंधी विकार, कैंसर और स्व-प्रतिरक्षित बीमारियों एक सहित पहले से असभ्य रोगों, के लिए होनहार नए उपचार प्रदान करते हैं। 2012 में, वैश्विक biotherapeutics बाजार 138,000,000,000 $ पहुंच गया और वर्ष से $ 179,000,000,000 तक पहुंचने की उम्मीद है 2018 दो। प्रोटीन बड़ा और पारंपरिक छोटे अणु दवाओं से ज्यादा कमजोर हैं और इसलिए गिरावट तीन के कई प्रकार के लिए अतिसंवेदनशील होते हैं। (यानी, फ्रीज सूखे) ठोस पाउडर lyophilized के रूप में पर्याप्त शैल्फ जीवन और स्थिरता सुनिश्चित करने के लिए, प्रोटीन दवाओं अक्सर तैयार कर रहे हैं। हालांकि, एक प्रोटीन अभी भी अपने मूल संरचना lyophilization प्रक्रिया 4,5 के दौरान संरक्षित नहीं है, खासकर अगर ठोस राज्य में गिरावट से गुजरना कर सकते हैं। कि संरचना बनाए रखा गया है आश्वस्त sufficien के साथ ठोस राज्य में प्रोटीन रचना जांच कर सकते हैं कि विश्लेषणात्मक तरीके हैं केवल यदि संभव हैटी संकल्प।
एनएमआर स्पेक्ट्रोस्कोपी 6 और एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफी 7 समाधान और क्रिस्टलीय ठोस 8 में प्रोटीन संरचना का आकलन करने के लिए आमतौर पर इस्तेमाल उच्च संकल्प तरीके हैं। क्योंकि excipients और इस्तेमाल प्रसंस्करण विधियों की प्रकृति के कारण, lyophilized प्रोटीन योगों आमतौर पर अनाकार के बजाय 9 क्रिस्टलीय हैं। एकरूपता और सूक्ष्म आदेश की कमी अनाकार ठोस पदार्थों में प्रोटीन के लिए ऊपर वर्णित तकनीकों अव्यावहारिक बना देता है। फूरियर अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी (FTIR) 10 बदलना, रमन स्पेक्ट्रोस्कोपी 11 और निकट अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी (NIR से) 12 नियमित रूप से देशी समाधान राज्य संरचना की है कि lyophilized पाउडर में प्रोटीन माध्यमिक संरचना की तुलना करने के बायोफर्मासिटिकल उद्योग द्वारा इस्तेमाल किया गया है। हालांकि, इन तरीकों कम संकल्प कर रहे हैं और केवल माध्यमिक संरचना में वैश्विक परिवर्तन के बारे में जानकारी प्रदान कर सकते हैं। एफटीआईआर का उपयोग कर ठोस राज्य संरचनात्मक लक्षण वर्णनलंबी अवधि के भंडारण स्थिरता के साथ कमजोर 13,14 या गरीब 15 सहसंबंध या तो दिखाया गया है। इन सीमाओं उपयुक्त उच्च संकल्प के तरीकों ठोस राज्य में प्रोटीन संरचनात्मक perturbations की पहचान करने के लिए आवश्यकता पर प्रकाश डाला।
प्रोटियोलिसिस और जन Spectrometric विश्लेषण के साथ युग्मित रासायनिक लेबलिंग जलीय घोल में प्रोटीन की संरचना और आणविक बातचीत की निगरानी के लिए एक शक्तिशाली दृष्टिकोण के रूप में उभरा है। दवा के विकास में, इस HDX एमएस प्रोटीन दवाओं 19 की रचना पर बाद translational संशोधनों के प्रभाव पर नजर रखने के लिए, रिसेप्टर दवा बातचीत 18 मैप करने के लिए, और तुलना के लिए, प्रतिजन एंटीबॉडी बातचीत 16,17 में मिलान मानचित्रण के लिए इस्तेमाल किया गया है biosimilars 20 के विकास में बैच करने वाली बैच विभिन्नता। इसी तरह, photoactivatable ligands के दवा लक्ष्यों की पहचान करने के लिए और बंधन आत्मीयता और नशीली दवाओं के रिसेप्टर बातचीत 21,22 की विशिष्टता निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। ई करने के लिएXtend lyophilized योगों के लिए इन तरीकों के आवेदन, हमारे समूह विकसित की है राज्य के ठोस हाइड्रोजन ड्यूटेरियम विनिमय मास स्पेक्ट्रोमेट्री (ssHDX एमएस) और ठोस राज्य photolytic लेबलिंग मास स्पेक्ट्रोमेट्री (SSPL एमएस) lyophilized नमूनों में प्रोटीन रचना और excipient बातचीत का अध्ययन करने के लिए उच्च संकल्प के साथ।
SsHDX-एमएस और SSPL एमएस दोनों में, प्रोटीन lyophilized ठोस में आदर्श प्रतिक्रिया की शर्तों के तहत लेबल है, और नमूने तो पुनर्गठन और के साथ या प्रोटियोलिटिक पाचन बिना मास स्पेक्ट्रोमेट्री द्वारा विश्लेषण कर रहे हैं। SSPL एमएस पक्ष श्रृंखला के वातावरण के बारे में जानकारी (चित्रा 1) प्रदान करता है, जबकि ssHDX एमएस, ड्यूटेरियम वाष्प को मुख्य श्रृंखला के लिए जोखिम के बारे में जानकारी प्रदान करता है। दो तरीकों इस प्रकार ठोस राज्य में प्रोटीन रचना के बारे में पूरक जानकारी प्रदान कर सकते हैं। यहाँ, हम के रूप में एमबी, (चित्रा 2) ssHDX-एमएस और SSPL एमएस का उपयोग कर lyophilized ठोस पदार्थों में प्रोटीन का अध्ययन कर प्रयोग करने के लिए एक सामान्य प्रोटोकॉल प्रदान करते हैंएक मॉडल प्रोटीन। हम दो अलग अलग excipients साथ योगों में मतभेद भेद करने के लिए दो तरीकों की क्षमता दिखाते हैं।
चित्रा 1:। विभिन्न लेबलिंग तंत्र के माध्यम से lyophilized ठोस में ssHDX और SSPL उपाय प्रोटीन संरचना (ए) HDX में, रीढ़ की हड्डी एमाइड एक प्रोटीन संरचना के समारोह और डी 2 हे पहुँच के रूप में ड्यूटेरियम के साथ विनिमय hydrogens। ठोस राज्य में, दर और ड्यूटेरियम विनिमय की हद डी 2 हे sorption, प्रोटीन गतिशीलता (खुलासा और घटनाओं refolding) और ठोस मैट्रिक्स में मौजूद excipients की प्रकृति के स्तर पर निर्भर करते हैं। PLeu की diazirine कार्यात्मक समूह से मध्यवर्ती एक प्रतिक्रियाशील carbene के गठन शुरू करता है और किसी भी xh के बंधन (एक्स किसी भी परमाणु =), या विज्ञापन में गैर-विशेष रूप से डाला जाता है एनएम pl में (बी), 365 पर यूवी विकिरणइसके तत्काल आसपास के क्षेत्र में एक सी = सी बांड भर ded। ठोस राज्य में, दर और लेबलिंग की हद तक स्थानीय लेबलिंग एजेंट की एकाग्रता, विकिरण समय, प्रोटीन संरचना और ठोस मैट्रिक्स में मौजूद excipients की प्रकृति पर निर्भर करते हैं। पैनलों ए और बी प्रोटीन में क्रमश: रीढ़ की हड्डी और पक्ष-चेन पर हो सकता है कि अधिक से अधिक सैद्धांतिक लेबलिंग दिखा।
चित्रा 2: योजनाबद्ध दिखा ठोस राज्य इस HDX एमएस (ए) और lyophilized तैयार करने में प्रोटीन के लिए पी एल-एम एस (बी)।
कई अध्ययनों से lyophilized नमूनों में स्थानीय पर्यावरण प्रोटीन गिरावट 5,29,30 को प्रभावित करता है कि सुझाव दिया है। हालांकि, ठोस अवस्था में प्रोटीन की संरचना और स्थिरता के बीच सीधा संबंध स्थापित करने की वजह से उच्च संकल्प विश्लेषणात्मक तरीकों की कमी के कारण संभव नहीं किया गया है। lyophilized पाउडर करने के लिए इस तरह के HDX और पी एल के रूप में मौजूदा उच्च संकल्प के तरीकों के आवेदन समाधान प्रोटोकॉल और सावधान डेटा व्याख्या के संशोधन की आवश्यकता है। इस HDX एमएस और पी एल-एमएस क्रमिक ठोस राज्य में प्रोटीन रचना की निगरानी के लिए अपनाया गया है। परिणाम यहां प्रस्तुत किया है और कहीं और 27,28,31-33 ठोस वातावरण में उच्च संकल्प के साथ प्रोटीन रचना की निगरानी करने के लिए इन तरीकों की क्षमता का प्रदर्शन किया है। डेटा विश्लेषण में महत्वपूर्ण कदम समाधान 34-36 में लेबलिंग से भिन्न नहीं है हालांकि, प्रयोगात्मक सेटअप और डेटा व्याख्या के दौरान महत्वपूर्ण विचार ठोस राज्य chemi के लिए आवश्यक हैंसीएएल लेबलिंग।
लेबलिंग अभिकर्मक के चुनाव में आकार और लेबलिंग की व्यवस्था पर आधारित होना चाहिए। ड्यूटेरियम के छोटे आकार pLeu के अपेक्षाकृत बड़े आकार के पक्ष-श्रृंखला के लिए लेबलिंग की सीमा जबकि पेप्टाइड रीढ़ की हड्डी है, आसानी से जांच की जा करने के लिए अनुमति देता है। कि लेबलिंग केवल मैट्रिक्स के लिए रीढ़ की हड्डी और पक्ष-श्रृंखला जोखिम पर निर्भर करता है इसलिए ssHDX और SSPL दोनों, किसी भी अमीनो एसिड के लिए कोई वरीयता दिखा। प्रभावी रूप से ठोस राज्य में प्रोटीन रचना की जांच करने के लिए, लेबलिंग प्रक्रिया को प्रभावित करने वाले बाहरी कारकों को ध्यान से नियंत्रित किया जाना चाहिए। कुल राशि और lyophilized ठोस में लेबलिंग एजेंट के स्थानिक वितरण जलीय समाधान से अलग है।
SsHDX में, ठोस मैट्रिक्स में डी 2 हे की राशि खुलासा प्रोटीन की दर (या आंशिक खुलासा), refolding, और ड्यूटेरियम विनिमय प्रभावित कर सकता है। इस प्रोटीन नमूना सामान्य रूप से डी 2 ओ की पर्याप्त मात्रा के साथ पतला है, जिसमें समाधान HDX, साथ ऐसा नहीं हैSsHDX दर पर जलयोजन के प्रभाव से सावधान स्क्रीनिंग आदर्श आरएच शर्तों के चयन के बारे में सूचित कर सकते हैं। नमी sorption की दर को नियंत्रित करने और हीड्रोस्कोपिक excipients (जैसे sucrose और Trehalose) युक्त योगों में पाउडर के पतन से बचने के लिए, ssHDX प्रशीतित शर्तों के तहत बाहर किया जा सकता है (2-8 डिग्री सेल्सियस)। उम्मीद के रूप में जलयोजन प्रभाव पर हमारे पिछले अध्ययन, नमी की मात्रा में वृद्धि के साथ विनिमय की दर और किस हद तक वृद्धि हुई है दिखाया। हमारे काम, 5 डिग्री सेल्सियस पर 43% की एक मध्यवर्ती आरएच की ज्यादा में एक उचित समय 24 में योगों भेद करने के लिए आदर्श साबित हो गया है। एक पठार तक पहुँच जाता है जब तक प्रतिक्रिया आमतौर पर किया जाता है। यह ठोस में नमी sorption और प्रसार HDX दर पर नियंत्रण नहीं है कि यह सुनिश्चित करता है। ≤2 मिलीलीटर की पूर्व lyophilization मात्रा के साथ छोटे ठोस नमूना आकार का उपयोग भी है कि डी ओ 2 वाष्प sorption जल्दी विनिमय अवधि में अनिवार्य रूप से पूरा हो गया है सुनिश्चित करने के लिए मदद करता है। हालांकि ssHDX एमएस प्रदान करता हैठोस राज्य में प्रोटीन की रचना पर मात्रात्मक जानकारी, डेटा की व्याख्या पूरी तरह से अकेले ssHDX अध्ययन के आधार पर नहीं किया जा सकता है, जहां कुछ शर्तें हैं। यह कमी आई ड्यूटेरियम तेज होने के कारण प्रोटीन संरचना के उच्च प्रतिधारण या नमूने में मौजूद प्रोटीन समुच्चय के महत्वपूर्ण राशि के लिए किया जा सकता है (नियंत्रण की तुलना में) एक नमूने में मनाया कि संभव है। ऐसे मामले में, ssHDX डेटा की व्याख्या अन्य पूरक के तरीकों से परिणाम की आवश्यकता है। Deuterated जन स्पेक्ट्रा में पीक विस्तार कई एमबी योगों 27,28 के लिए मनाया गया। यह डी 2 हे एकाग्रता में नमूने में आंशिक रूप से सामने आया प्रोटीन आबादी, स्थानिक विविधता की उपस्थिति, या स्थानिक ढ़ाल जैसे विभिन्न कारकों की वजह से हो सकता है। हालांकि, इन कारकों ssHDX-एमएस में प्रतिष्ठित किया है और आगे जांच की जरूरत नहीं कर रहे थे।
SSPL एमएस अपेक्षाकृत नया है के रूप में अन्य तरीकों, लगातार सीखने एबी जब की तुलनाउसके आवेदन और सीमाओं से बाहर की आवश्यकता है। SSPL में, तस्वीर-पार linker प्रोटीन के साथ lyophilized है। नमी की कमी ठोस मैट्रिक्स के भीतर घटकों की गतिशीलता को सीमित करता है, और ssHDX में नमी sorption के साथ हो सकता है कि आंशिक संरचनात्मक छूट SSPL में एक घटना नहीं है। यह फोटो-पार linker के तत्काल आसपास के क्षेत्र के लिए SSPL में लेबलिंग की सीमा। हालांकि, इस HDX एमएस, छाछ-स्तर संरचनात्मक जानकारी प्रदान कर सकते हैं covalently लेबल प्रोटीन की एमएस / एमएस विश्लेषण के विपरीत है। SSPL लेबलिंग सहसंयोजक और अपरिवर्तनीय है, वापस विनिमय उत्पन्न नहीं होती और नमूने तैयार है और लेबल के नुकसान के लिए चिंता के बिना विश्लेषण किया जा सकता है। लेबलिंग एजेंट के प्रसार को सुविधाजनक बनाने और ठोस मैट्रिक्स में लेबलिंग दक्षता में सुधार करने के लिए, SSPL बढ़ रही% आरएच के साथ किया जा सकता है। pLeu तेज भी photoreactive एजेंट की एकाग्रता में वृद्धि से सुधार किया जा सकता है। के रूप में वांछित pLeu के लिए प्रोटीन की दाढ़ अनुपात अलग किया जा सकता है। सामान्य में, समर्थक pLeu की एक 100x दाढ़ अतिरिक्तTein पर्याप्त लेबलिंग सुनिश्चित करेगा। बहरहाल, उच्च pLeu एकाग्रता ठोस मैट्रिक्स में प्रोटीन तृतीयक संरचना की हानि हो सकती है। इसलिए, लेबलिंग कैनेटीक्स और निर्माण रचना के अलावा, pLeu एकाग्रता का चयन भी प्रोटीन संरचनात्मक अखंडता को बनाए रखने के आधार पर किया जाना चाहिए। PLeu nonselectively xh के लेबल के रूप में समूह, यह संभव है (एक्स = सी, एन, ओ जहां) इसी तरह की लेबलिंग साइटों के साथ excipients बहुत प्रोटीन लेबलिंग के स्तर को प्रभावित कर सकते हैं। प्रोटीन लेबलिंग के लिए pLeu की उपलब्धता में excipients के हस्तक्षेप अभी तक लक्षण वर्णन किया जा रहा है। यह diazirine सक्रियण से उत्पन्न carbene छाछ-विशिष्ट नहीं है कि जाना जाता है, लेकिन एक अध्ययन एएसपी और ग्लू 36 की ओर पूर्वाग्रह की रिपोर्ट। यह अवशेषों विशिष्ट बातचीत के बारे में जानने के लिए अच्छा है, पेप्टाइड स्तर की जानकारी भी उपयोगी है और ठोस राज्य में उच्च मैट्रिक्स जोखिम के साथ क्षेत्रों को ब्लॉक करने के excipients डिजाइन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। SSPL एमएस हालांकि, विस्तृत गुणात्मक जानकारी प्रदान करता हैमात्रात्मक डेटा प्राप्त करने की आवश्यकता है और मजबूत मेट्रिक्स lyophilized प्रणालियों की एक किस्म भर में तैयार अंतर का विश्लेषण करने के लिए विकसित करने की आवश्यकता है।
एमएस / एमएस विश्लेषण के साथ संयुक्त एक अवशेषों विशिष्ट लेबल के उपयोग के आगे एमिनो एसिड के स्तर को संकल्प में वृद्धि कर सकते हैं। ऐसे 2,3-butanedione के रूप में लेबल अभिकर्मकों Arg, Cys के लिए लिस और एन -alkylmaleimide डेरिवेटिव के लिए एन -hydroxysuccinimide डेरिवेटिव ठीक lyophilized पाउडर में आणविक बातचीत नक्शा करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता लेबल करने के लिए। हालांकि इन अभिकर्मकों पीएच-निर्भर कर रहे हैं और प्रतिक्रियाओं के रूप में ठोस राज्य में photolytic लेबलिंग के रूप में अच्छी तरह से नियंत्रित नहीं किया जा सकता है। एक वैकल्पिक दृष्टिकोण auxotrophic सेल लाइनों, साइट निर्देशित उत्परिवर्तजनन या पक्ष श्रृंखला derivatization के उपयोग के साथ प्रोटीन अनुक्रम में फोटो-पार linker शामिल करने के लिए है।
हमारे पिछले ssHDX-एमएस और SSPL एमएस पढ़ाई प्रोटीन की लेबलिंग excipients की प्रकृति और मात्रा पर निर्भर करता है कि पता चला है24,27,28,31-33,37,38 इस्तेमाल किया। एमबी कम आणविक वजन 32 शर्करा के साथ-lyophilized सह से एमबी की ssHDX एमएस guanidine हाइड्रोक्लोराइड (Gdn.HCl) के साथ-lyophilized सह अधिक से अधिक ड्यूटेरियम तेज दिखाया। Gdn.HCl सूक्रोज के साथ 33 एमबी से photolytic लेबलिंग से अधिक से अधिक सुरक्षा से पता चला है के साथ एक अलग SSPL एमएस अध्ययन में, MB-lyophilized सह। इसके अलावा, ssHDX एमएस से मात्रात्मक माप अत्यधिक लंबी अवधि के भंडारण 28 के दौरान प्रोटीन की स्थिरता के साथ सहसंबद्ध किया गया है। इन अध्ययनों से प्रोटीन की ssHDX या SSPL lyophilized पाउडर में प्रोटीन की संरचनात्मक प्रतिधारण की हद को दर्शाता है कि सलाह देते हैं। हम lyophilized पाउडर में माध्यमिक संरचना की अवधारण के पक्ष श्रृंखला pLeu साथ लेबलिंग और ड्यूटेरियम मुद्रा से एमाइड के संरक्षण के लिए अनुकूल वातावरण प्रदान करता है कि विश्वास करते हैं। हालांकि, इन तरीकों से सूचनात्मक सामग्री की विस्तृत तुलना भविष्य में प्रदर्शन करने की जरूरत है। SsHDX-एमएस और SSPL-एमएस की उपयोगिता की स्थापना हालांकिएक सूत्रीकरण स्क्रीनिंग उपकरण के रूप में कई प्रोटीन के लिए लागू किया है कि अंततः की आवश्यकता होगी, हमारे हाल के अध्ययनों से परिणाम अपने व्यापक गोद लेने का समर्थन करता है। आगे के विकास के साथ, इन तरीकों बायोफर्मासिटिकल उद्योग में ठोस राज्य प्रोटीन योगों निस्र्पक के लिए व्यापक रूप से उपयोगी होने की उम्मीद कर रहे हैं।
The authors have nothing to disclose.
The authors gratefully acknowledge financial support from NIH R01 GM085293 (PI: E. M. Topp) and from the College of Pharmacy at Purdue University.
Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
Equine myoglobin | Sigma-Aldrich | M0630-5G | |
D-(+)-Trehalose dihydrate | Sigma Aldrich | #T9531 | |
D-Sorbitol | Sigma Aldrich | #240850 | |
L-Photo-leucine | Thermo Scientific | #22610 | |
Potassium phosphate monobasic | Sigma-Aldrich | #P0662 | |
Potassium phosphate dibasic | Sigma-Aldrich | #P3786 | |
Deuterium Oxide | Cambridge Isotope Laboratories | #DLM-4-PK | Alternate (Cat. No.: 151882, Sigma-Aldrich) |
Immobilized pepsin | Applied Biosystems | #2-3132-00 | |
Trypsin | Promega | #V511A | Chymotrypsin (Cat. No.: #V1062, Promega) can be additionally used |
Water, Optima LC/MS grade | Fisher Chemical | #7732-18-5 | |
Acetonitrile | Sigma-Aldrich | #34998 | |
Formic acid | Thermo Scientific | #28905 | |
ESI-TOF Calibrant | Agilent Technologies | #G1969-85000 | Highly flammable liquid |
Protein microtrap | Michrom Bioresources | TR1/25108/03 | |
Peptide microtrap | Michrom Bioresources | TR1/25109/02 | |
Analytical column | Agilent Technologies | Zorbax 300SB-C18 | |
Freeze dryer | VirTis AdVantage Plus | ||
Stratalinker equipped with five 365 nm lamps | Stratagene Corp. | Stratalinker 2400 | |
HPLC | Agilent Technologies | 1200 series LC | Refrigerated LC system for HDX-MS |
ESI-qTOF MS | Agilent Technologies | 6520 qTOF | |
HDExaminer (HDX-MS data analysis software) | Sierra Analytics | http://www.massspec.com/HDExaminer.html |