Summary

Un metodo per valutare le proprietà di rinforzo di etanolo in ratti senza acqua privazione, Saccarina dissolvenza o di formazione accesso esteso

Published: January 29, 2017
doi:

Summary

Questo protocollo descrive un nuovo metodo ed efficiente di avviare rapidamente operante rispondere per etanolo in ratti che, contrariamente a metodi standard, non richiede privazione di acqua o saccarina / saccarosio dissolvenza di avviare rispondere.

Abstract

metodi di auto-somministrazione per via orale operante sono comunemente usati per studiare le proprietà rinforzanti dell'etanolo negli animali. Tuttavia, i metodi standard richiedono la saccarina / dissolvenza saccarosio, privazione di acqua e / o di formazione esteso di avviare operante rispondere nei ratti. Questo documento descrive un nuovo metodo ed efficiente di avviare rapidamente operante rispondere per l'etanolo che è conveniente per gli sperimentatori e non richiede privazione di acqua o la saccarina / dissolvenza saccarosio, eliminando così il potenziale confondente di utilizzare dolcificanti in etanolo studi di auto-amministrazione operante. Con questo metodo, ratti Wistar tipicamente acquisire e mantenere auto-somministrazione di una soluzione di etanolo al 20% in meno di due settimane di allenamento. Inoltre, le concentrazioni di etanolo nel sangue ed i benefici sono correlati positivamente per una sessione di auto-somministrazione di 30 min. Inoltre, il naltrexone, un farmaco approvato dalla FDA per la dipendenza da alcol, che ha dimostrato di sopprimere l'etanolo autosomministrazionenei roditori, dose-dipendente diminuisce il consumo di alcol e la motivazione a consumare alcol per i ratti di auto-somministrazione di etanolo al 20%, convalidando così l'utilizzo di questo nuovo metodo per studiare le proprietà di rinforzo di alcol nei ratti.

Introduction

Lo sviluppo di modelli animali per studiare gli effetti rinforzanti della droga si è dimostrato uno strumento importante per studiare la tossicodipendenza umana. Più specificamente, operante autogestione è un modello comportamentale ampiamente utilizzato che è uno dei mezzi più efficaci per valutare gli effetti di rinforzo positivi di una soluzione di etanolo oralmente consumata. Un problema presto con lo sviluppo di un tale modello è stato il gusto aversive primario di alte concentrazioni di etanolo per la maggior parte dei roditori, un fenomeno che è condivisa anche negli esseri umani con poca o nessuna esperienza con l'alcol 1. Un protocollo standard per superare questa barriera richiede privazione di acqua e / o la saccarina o saccarosio sbiadimento per l'acquisizione e la manutenzione di auto-somministrazione. Tuttavia, questi due approcci non sono vantaggiose. Essi richiedono lunghi periodi di formazione per avviare semplicemente rispondere per l'etanolo e di ottenere un tasso di successo relativo di acquisizione. L'uso di edulcoranti introduce anche una potenziale distorsionel'interpretazione dei dati autosomministrazione. Queste limitazioni non si applicano al seguente protocollo.

Brevemente, Samson e colleghi 2 hanno dimostrato che sciogliendo etanolo in una soluzione dolce del 20% di saccarosio e poi dissolvenza la dolcezza oltre 4 settimane di formazione deve avviare rispondere per 10% di etanolo in acqua. Inoltre, l'assunzione di etanolo affidabile è di solito realizzato in 6 a 8 settimane 1-3. Questo approccio è molto problematico. In primo luogo, richiede lunghi periodi di formazione prima investigatori possono cominciare a misurare etanolo auto-somministrazione. Al contrario, per via endovenosa di auto-somministrazione di cocaina o eroina richiede 0 – 1 giorni di formazione pre-droga su una leva alimentare la distribuzione in alimenti animali ristretto, e stabile di rispondere per droga si ottiene spesso in 10 – 12 giorni di 4,5. Un altro limite di questo metodo è il fatto che la saccarina e saccarosio sono altamente gratificante ratti e suscitare pattern di attivazione cerebrale sanaloghe sui di sostanze d'abuso, introducendo così il potenziale per confonde in etanolo autosomministrazione studia 6-9. Infine, i ratti che acquistano auto-somministrazione di una soluzione di etanolo con questo metodo spettacolo variabilità nella acquisizione e la risposta tasso di 1,10, con una parte sostanziale dei ratti costantemente esclusi dalle sperimentazioni a causa di acquisizione senza successo e / o tasso di risposta insufficiente.

Al contrario, con questo protocollo, vi presentiamo un metodo semplice ma efficace per l'acquisizione e il mantenimento di orale auto-somministrazione di un etanolo al 20% in soluzione acquosa che non necessitano privazione di acqua, di saccarosio / dissolvenza la saccarina o formazione accesso esteso. Una recente indagine ha scoperto che auto-somministrazione di etanolo orale mostra una curva dose-risposta rovesciata a forma di U con più alta assunzione di etanolo durante l'autosomministrazione ad una concentrazione di etanolo 20%, fornendo così un razionale per la selezione di una soluzione di etanolo al 20% nel nostro sperimdisegno ental 11.

Protocol

Tutte le procedure sono condotte in conformità con la guida NIH per la cura e l'uso di animali da laboratorio. 1. Animal Care and Housing All'arrivo nella colonia, ratti maschi Wistar casa pesa 200 – 225 g all'arrivo a coppie in temperatura (21 ° C) e l'ambiente a umidità controllata con un ciclo luce-buio 12 h invertita. Nota: In base alla logica degli esperimenti, i ratti possono essere alloggiati. Lasciare i ratti per acclimatarsi al vivaio e il ciclo luce per al…

Representative Results

La figura 1 mostra il comportamento di autosomministrazione rappresentativo di ratti Wistar operant- e farmaco-naive (otto diverse coorti per un totale di 239 ratti) addestrati su un programma FR1 ad auto-somministrarsi il 20% di etanolo senza privazione di acqua o la saccarina / saccarosio dissolvenza durante le sessioni di 30 minuti. Con questo protocollo, i ratti avviare la leva premendo per ottenere un premio di etanolo molto rapidamente, già ottenendo più di 10 pr…

Discussion

Con questo protocollo, vi presentiamo un nuovo metodo per acquisire e mantenere stabile orale di auto-somministrazione di etanolo al 20% nei ratti che, contrariamente ai modelli classici di etanolo autosomministrazione, non richiedono l'uso di privazione di acqua, la formazione accesso esteso, o la saccarina / saccarosio dissolvenza 12. Inoltre, il naltrexone, un farmaco attualmente approvato dalla FDA per la dipendenza da alcol, diminuisce con successo alcol auto-somministrazione e la motivazione per con…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Questo lavoro è stato sostenuto dal Consiglio svedese per la ricerca.

Materials

Extra Tall MDF Sound Attenuating Cubicle, Interior: 22"W x 22"H x 16"D Med Associates Inc. ENV-018MD
Extra Tall Modular Test Chamber with modified Top, Waste Pan and Photobeam Med Associates Inc. ENV-007CT-PH
Stainless Steel Grid Floor for Rat or Small Primate Med Associates Inc. ENV-005
Retractable Lever Med Associates Inc. ENV-112CM 2 by SA chambers
Stimulus Light, 1" White Lens, Mounted on Modular Panel Med Associates Inc. ENV-221M 2 by SA chambers
Dual Cup Liquid Receptacle with 18ga Stainless Steel Pipes Med Associates Inc. ENV-200R3AM
Single Speed Syringe Pump, 3.33RPM Med Associates Inc. PHM-100
Liquid Delivery Kit Med Associates Inc. PHM-122-18
SmartCtrl 8 Input, / 16 Output Package Med Associates Inc. DIG-716P2
MED-PC software Med Associates Inc. SOF-735
http://www.mednr.com/ Med Associates Inc. A website that is open-source and has been created to offer researchers a place to exchange MEDState Notation code
Kendall Monoject 20cc Syringes, Regular Luer Tip VWR International MJ8881-520657
Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP, KOPTEC Decon Labs 2801
0.9% Sodium Chloride Injection, USP Hospira 0409-4888-50
Naltrexone hydrochloride Sigma Aldrich N3136-1G
23 G BD PrecisionGlide Needles BD 305145
Minivette POCT 50 µl, K3 EDTA Sarstedt 17.2113.150 For capillary blood collection 

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Cite This Article
Augier, E., Dulman, R. S., Singley, E., Heilig, M. A Method for Evaluating the Reinforcing Properties of Ethanol in Rats without Water Deprivation, Saccharin Fading or Extended Access Training. J. Vis. Exp. (119), e53305, doi:10.3791/53305 (2017).

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