쥐의 전립선 마이크로 해부 및 수술 거세
Summary
이 원고는 실험실 쥐의 전립선 마이크로 해부 및 수술 거세에 대한 프로토콜을 설명합니다. 우리는 또한이 프로토콜에 의해 생성 된 대표적인 결과를 도시한다. 마지막으로, 우리는 장점과 이러한 프로토콜의 사용에 대해 설명합니다.
Abstract
Mouse models are used extensively to study prostate cancer and other diseases. The mouse is an excellent model with which to study the prostate and has been used as a surrogate for discoveries in human prostate development and disease. Prostate micro-dissection allows consistent study of lobe-specific prostate anatomy, histology, and cellular characteristics in the absence of contamination of other tissues. Testosterone affects prostate development and disease. Androgen deprivation therapy is a common treatment for prostate cancer patients, but many prostate tumors become castration-resistant. Surgical castration of mouse models allows for the study of castration resistance and other facets of hormonal biology on the prostate. This procedure can be coupled with testosterone reintroduction, or hormonal regeneration of the prostate, a powerful method to study stem cell lineages in the prostate. Together, prostate micro-dissection and surgical castration opens up a multitude of opportunities for robust and consistent research of prostate development and disease. This manuscript describes the protocols for prostate micro-dissection and surgical castration in the laboratory mouse.
Introduction
전립선은 미국에서 남성 암의 가장 흔한 사이트입니다. 매년 전립선 암으로 진단됩니다 거의 220,000 남자, 약 27,000 남자는 질병 일에 굴복한다. 남성은 미국 1에서 전립선 암 진단 1 7 일생 위험이 있습니다. 양성 전립선 비대증 (BPH), 전립선의 연령과 관련된 비 암성 확대는 80 이상이 남성의 80 %에 영향을 미치는, 또한 광범위한 조건이다. 이와 같이, 전립선은 많은 연구의 초점이다.
마우스 모델은 3 전립선 질환을 연구하기 위해 널리 사용되어왔다. 전체 마우스 인간 전립선 선 (4)의 우수한 대표하지만, 유사성과 마우스 및 인간 전립선 해부학 생리학 (5) 사이의 차이가있다. 두 종에서 전립선은 요도를 둘러싸고, 방광의 기지에 위치해 있습니다. 인간의 전립선은 단일 보라입니다중앙, 전환, 주변 장치 및 전방 fibromuscular 기질 : 네 개의 구역으로 분할합니다. 전방, 복부 및 배면 측면 : 반대로 마우스 전립선 요도 주위의 상이한 위치에서 세 쌍의 돌출부로 구성된다. 세포 수준에서의 주된 차이점은 인체 내강의 셀 비율은 기저 세포가 1인지 : 1이지만 1 : 생쥐 6 4. 뮤린 기질은 인간에 대해 생쥐에서 다르다 – 근육 층 쥐 전립선 훨씬 얇다 동안 인간은, 더 광범위한 평활근있다. 마우스 전립선의 적절한 식별, 해부, 취급 마우스 전립선 연구에 필수적이다.
호르몬 대폭 인간 및 마우스 모두에서 전립선의 발달 및 항상성에 영향을 미친다. 에스트로겐 전립선 개발 7 역할을 보이는 반면, 전립선 암에서 가장 중요한 호르몬 테스토스테론이다. 테스토스테론은 선의 개발을 위해 필수적이다D 관리. 중 물리적 또는 화학적 거세에 따라, 약 90 성인 전립선 apoptose의 내강 세포의 %, 그리고 선이 줄어 듭니다. 테스토스테론은 거세 조건 하에서 개별적으로 재 도입되는 경우, 전립선 전체 용량 자체를 다시 생성 할 수있다. 테스토스테론은 남성 호르몬 결핍의 치료에 일반적으로 사용되는 치료 전략 이유 전립선 암을 유도하는 것으로 보인다. 그러나 많은 전립선 암은 안드로겐 박탈에 저항하게된다. 또한, 전립선 암의 안드로겐 결핍 치료 요법을받은 남성 거세 및 재생 조건이 사이클을 겪는다. 마우스에서 수술 거세는 남성 호르몬을 재 도입하여 전립선의 호르몬 재생과 함께 거세 저항성 전립선에 테스토스테론 순환의 효과를 연구 할 수있는 중요한 도구입니다.
이 글에서, 우리는 토론하고 locat입니다하기로 적절한 기술을 시연 할 예정이다전자 마이크로 해부 마우스 전립선뿐만 아니라 마우스를 외과 적 거세하기.
Protocol
Representative Results
Discussion
전립선 마이크로 해부 엽 특정 실험과 마우스 전립선 분석 (그림 1)을 허용한다. 유전자 조작 마우스 모델에서 표현형은 다른 사람에 보이지 않는 하나의 엽에서 볼 수있다. 또한, 조직 학적 분석을 위해,이 프로토콜은 순수한 전립선 조직의 최대 양 단면에 존재하는 다른 비뇨 기관 조직없이 절편 염색 될 수 있다는 것을 보장한다. 마지막으로, 단일 세포 실험이 프로토콜은 거의 순수…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 원고의 수치 중 일부는 넉넉한 바트 O. 윌리엄스의 실험실에 의해 제공되었다. 저자는 U54CA143803, CA163124, CA093900, 및 CA143055는 국립 암 연구소 (National Cancer Institute)에 의해 부여 지원됩니다.
Materials
| Surgical tools | Roboz | Various | |
| Formaldehyde | Sigma | F8775 | |
| OCT medium | VWR | 25608-930 | Must be placed on dry ice to freeze, and stored at -80C |
| PBS | Life Technologies | 10010 | |
| Isoflurane | Johns Hopkins | Also available from vendors online | |
| Cautery Pen | Medline | ESCT002 | |
| Silk suture | AD Surgical | M-S330R19 | |
| Surgical Wound Clips | Roboz | RS-9265 |
References
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