Abstract
초파리 유전학의 힘은 점점 호르몬 신호 전달과 신진 대사의 질문에이 유기체 인간 질병 모델의 개발에 적용되고있다. 이러한 신진 대사 속도와 같은 매개 변수 측정을위한 민감한 방법 등의 과일 파리 같은 작은 동물의 생리 및 질병의 이해를 구동하기 위해 필요하다. 여기에 설명 된 방법은 포도당이나 지방산 등의 14 C 표지 기판 미량 함유 식품을 공급 성인 초파리 소수 연료의 산화를 평가한다. 공급 기간과 추가 실험 조작 후에, 파리, 방사성 CO 2 중탄산 칼륨과 같은 방사성 표지 된 기질의 산화 반응에서 생성 된 후 트랩 호기 KOH 포화 된 여과지를 함유하는 유리 병에 위치 메쉬 캡핑 짧은 튜브로 전송 KHCO 3. 이것은 방사성 중탄산은 섬광 계수에 의해 측정된다. 이 수성이다연료 산화의 연구, uantitative 재현하고 간단한 방법. 방사성 표지 된 글루코스, 지방산, 또는 아미노산의 사용은 공급 금식 같은 다른 유전 적 배경을 다른 조건으로 에너지 대사에 서로 다른 연료 원의 기여의 결정을 허용한다. 이것은 생체 에너지 대사에서 측정하는 데 다른 방법을 보완 및 대사 조절의 이해를 촉진한다.
Introduction
모델 생물 초파리 melanogaster의에서 작업 유전 원리, 발달 과정, 성장, 노화, 행동, 내성과 인간의 질병 1,2의 이해에 크게 기여하고있다. 초파리의 유전 및 세포 생물학적 접근 방법의 무수한은이 분야에서 발전을 주도하고있다. 그러나, 초파리의 신진 대사의 연구는 더 느리게 개발 등 작은 동물의 신진 대사 매개 변수를 측정의 어려움에 상당 부분 기인하고있다. 당뇨병과 같은 인간의 질병을 연구하는 모델로 초파리를 이용하여과 성장과 다양한 병리에 신진 대사의 기여를 이해에 대한 관심은 개발이 생물 3,4를위한 대사 기술을 적용 할 필드를 밀었다.
신뢰할 수있는 방법은 이제 초파리 대사 매개 변수의 수의 측정에 사용할 수 있습니다. 예를 들면, 식품 섭취를 평가 간단
특히 O이 소비의 측정과 결합 된 총 CO 2 생산의 측정은, 전신 에너지 대사에 대한 통찰력을 제공한다. 그러나, 영양을 식별하지 않는이 법안은 아데노신 삼인산 (ATP) 생산을 위해 산화된다. 탄수화물, 지방산, 단백질 : 영양소의 세 가지 주요 클래스는 CoA를 아세틸하는 TCA 회로 다음 변환을 입력 할 수 있습니다. 글루코오스 -6- 포스페이트, 글루코오스 또는식이 저장된 글리코겐으로부터 유도는 아세틸 CoA를 형성하는 피루 베이트 탈수소 효소에 의해 피루브산 탈 카복실되고 변환 될 수있다. 다음 시트르산 회로 입사 아세틸 -CoA ß 산화 수율로식이로부터 또는 저장 트리글리세리드로부터 유도 된 지방산의 고장. 최종적으로아미노산의 대부분은 알파 - 케 토글 루타 레이트 등의 아실 CoA 또는 시트르산 사이클의 중간체 인 아세틸 피루브산으로 변환 후 시트르산 회로를 입력 할 수있다.
기저 및 자극 조건에서 에너지 대사 영양 관련 기여 방사성 트레이서를 사용하여 모니터링 할 수있다. 여기에 제시된 프로토콜 12,13 배양에서 배양 세포에서 산화를 평가하기 위해 사용되는 프로토콜로부터 초파리에서 사용하기 위해 적합하다. 이 방법에서, 초파리는 공급 (14) C-방사성 표지 대사 기판 (탄수화물, 지방산, 또는 아미노산) 짧은 (시간)의 규정 또는 긴 (일) 펄스, 레이블이없는 음식 추격 한 다음에 노출됩니다 챔버 중탄산 호기 CO 2 포집 수산화 칼륨 (KOH) 포화 된 여과지를 포함. 방사성 표지는 중탄산 섬광 계수에 의해 정량화 될 수있다. 실험 사이의 방사성 표지-CO 2 생산의 차이파리 알 기는 예 유전자형 간의 연료 대사 연장 빠르거나 본질적인 차이에 걸쳐 ATP 생산을위한 다른 연료의 사용을 반영 할 수있다.
Protocol
방사성 표지 대사 기판을 포함하는 플라이 음식 1. 준비
- 2 μCi를 방사성 표지 된 기질 (D- 글루코스 [6- (14) C] 글루코스, D- [1- (14) C] 또는 [1-14 C] -palmitic 산 40 - - 60 mCi의 / A 미세 원심 분리 관에서 혼합 한 15 μL FD & C 청색 1 호 식품 염료 mmol) 및 H 2 O 25 ㎕의 총 부피를 같게한다.
주의 : 탄소 14 저에너지 베타 터이며 공기 짧은 범위를 가진다. 그러나 방사성 표지 분자 또는 실험자에 의해 우발적 인 섭취의 유출 방지하기 위해주의를 기울입니다. 식품 유리 병은 쉽게 뒤집어 비행; 방사성 표지는 액체 형태로 특히 때, 팁 것을 방지하는 용기를 수용해야합니다 (1.2 단계) 또는 응고 식품 (단계 1.4)에. 공급되는 또는 방사성 표지 CO 2의 소량을 내쉬고 시작합니다 방사성 표지 된 기판을 공급 한 파리. 이 파리는 흄 후드에 아크릴 상자에 보관하고, 작은 접시 KOH의 캘리포니아의해야n은 CO 2 스크러버로서 사용 상자에 설정 될 수있다. - 피펫 빈 플라이 식품 유리 병의 바닥에 방사성 표지 기판과 파란색 염료 믹스의 모든 (높이 : 9.4 cm, 폭 : 2.2 cm).
- (- 음식 10 ㎖를 함유 한 유리 병에 대해 높은 전력 레벨에서 20 초 15) 식품 단지 액화 될 때까지 가열 표준 전자 레인지에서 음식 비행.
- 푸른 색의 균일 성을 모니터링하는 것은 완전한 혼합을 보장하기 위해, 소용돌이 빠르게 방사성 표지 기판 / 파란색 염료 혼합 975 μl의 용융 음식을 추가합니다.
- 30 분 - 음식이 식 20 실온에서 완전히 응고 할 수 있습니다.
성인 과일 파리 2. 먹이 방사성 표지 대사 기질
- 성인 마취하는 압력 조절기와 CO 2 탱크 아크릴 기재에 융착 접속 다공성 폴리에틸렌으로 이루어진 CO 2 마취 장치를 이용 날아간다. / 분 5 L로 마취 장치에 CO 2 흐름.
- 전송 마취(- 바이알 당 30 파리 N = 15) d를 방사성 표지, 파란색으로 염색 한 음식을 포함하는 튜브 (으)로 운항하는 항공사. 캡 거품 마개 유리 병, 그리고 파리가 일어날 때까지 수평으로 휴식. 뚜껑이 아크릴 용기에 전송 튜브 (180cm X 180cm X 240cm 높이).
- 2에 대한 방사성 표지 음식에 파리를 전송하기 전에 24 시간 - - 단기 공급을 위해, 18 파리를 굶어. 3 시간 공급 단계 T 그는 기아 단계가 중요합니다 공급 파리 안정적으로 그들에게 제시 음식의 새로운 소스를 먹을 수 없기 때문에 . (5)의 과정을 통해 장기 급지 - 8 일 파리 고갈 될 필요는 없지만, 실험자는 파리에 수납 된 바이알에서 방사성 표지 된 식품의 수분 함량을 모니터하고 바이알에 물을 첨가하는 바늘과 주사기를 사용해야 건조 식품과 함께.
- 전송 새로운 유리 병으로 그들을 "도청"로 레이블이 지정되지 않은 음식 (으)로 운항하는 항공사. (2)의 초기 추적 기간 - 4 시간은 파리가 자신의 손톱에서 방사성 표지 음식 입자를 청소 할 수 있으며 방사성 표지의 소화를 허용장내에 남아있는 에드 음식. 푸른 복부를 찾기 위해 파리의 육안 검사에 의해 장내를 통해 음식의 진행 상황을 모니터링합니다.
- 그 후, 전송은 다른 음식 유형으로 운항하는 항공사 96 시간 유전 18 C 또는 30 ℃에서 - - 또는 주위 온도 (12 (12의 효과 측정을위한 표준 식품 1 % 한천에 24 시간 호흡에 금식 상태 대 공급) 조작 예를 들어, 온도에 민감한 GAL80 (GAL80 TS)를 사용하여).
주 :이 체이스 기간의 길이는 실험이 수행되면서 달라진다. 예를 들어, 30 ℃에서 96 시간 체이스 순서대로 GAL80 TS를 사용하여 실험에 필요할 수있다 완전히 GAL4 종속 유전자 발현을 활성화합니다.
이산화탄소 -collection 장치의 제조 3
- 14 C-포도당 또는 14 C-팔 미트 산, 그쪽으로 표시 파리를 포함 구성 "포드 비행"하는 재료, 메쉬 캡 튜브를 조립t는 대기에 개방 유지됩니다. 25mm 길이, 둥근 바닥 튜브를 떠나, 12mm X 75mm 폴리 프로필렌 튜브의 상단에 50mm를 잘라. 130 μm의 나일론 메쉬의 35mm X 35mm 사각형을 준비합니다. 또한, 테이프 디스펜서에 투명 테이프를 구하십시오.
- 이산화탄소 -collection 장치의 재료를 조립합니다. 각 포드 플라이를 들어, 20 ㎖ 유리 섬광 바이알, 오프 중심 구멍을 가진 고무 상부 스토퍼 잘 상부 스토퍼의 구멍을 통해 삽입되는 중심 학년 GF / B 유리 미세 섬유 필터 종이 (2.1 cm 직경 어셈블 원, 1 ㎛ 기공). GF / B 여과지 때문에 높은 습윤 강도 및 높은 로딩 용량이 사용된다.
- 사용의 날에 5 % KOH의 신선한를 준비합니다. 단지 3.4 단계 전에 접어 아니라 그 고무 상부 스토퍼 구멍을 통해 나사 결합되는 중앙에 원형 GF / B 여과지를 놓고, 5 % KOH 100 ㎕로 포화. 그림 1을 참조하십시오.
- 레이블이없는 미디어하는 인큐베이션 (들)에 따라nesthetize는 CO 2로 날아갑니다. 브러시는 나일론 메쉬로 차단 폴리 프로필렌 튜브, 모자로 날아와 튜브에 메쉬를 준수하는 투명 테이프를 사용합니다. 파리 깨어과 메쉬가 안전하게 튜브에 부착되기 전에 탈출 방지하기 위해 신속하게 작업 할 수 있습니다. 파리의 동일한 수는 특정 실험에 대한 각 플라이 포드에 사용되어야한다; 10 - 플라이 포드 당 20 파리는 섬광 계수 (아래 단계 4.1)에 의해 측정을 위해 충분한 방사성 표지-CO 2 생산하고 있습니다.
- 20 ㎖의 유리 섬광 유리 병에 파리 포드를 전송합니다. 고무 상단 마개가 잘 KOH 포화 GF / B 여과지를 포함하는 센터를 들고 유리 병 캡. 유리 섬광 유리 병의 입술 위에 고무 상단 마개의 넓은 정상을 접습니다. 그림 1을 참조하십시오.
- 세트 유리 뚜껑이, 아크릴 용기에 파리를 포함하는 유리 병, 시간 (2 ~ 12 시간이 잘 작동)의 다양한 기간 동안 품어.
결과 4. 분석
- 에서4 ml의 신틸레이션 칵테일을 함유하는 6 ml의 플라스틱 섬광 바이알로 배양, 뚜껑을 벗기다 유리 바이알 및 전송 KOH 포화 GF / B 여과지의 끝.
- 필요한 경우, 저장 기판의 후 결정을 위해 -80 ℃에서 드라이 아이스와 저장소의 비행 포드에서 파리를 동결. 이러한 샘플은 방사성하고 그에 따라 저장해야합니다.
- / μCi를을 CPM을 결정하기 위해 0.5 μCi를 방사성 표지 기판 - 배경 역할을하지 않는 GF / B 형 종이 필터를 포함하는 하나 0.1을 포함하는 하나 2 등 : 추가 섬광 유리 병을 준비합니다.
- 제조사의 프로토콜에 따라, 섬광 계수기를 사용하여 각 시료에 대한 CPM을 측정한다.
- 시간당 비행 당 pmol의 14 CO 2 / CPM 및 pmol의 14 CO 2를 계산합니다. 각 샘플에 대한 CPM 값의 배경 CPM을 뺍니다. 깔끔한 방사성 표지 기판 데이터에서 배경 보정 CPM / 샘플의 μCi를 카운트 계산합니다.
- 사용제조자가 제공 한 특정 활성 및 방사성 표지 된 기질의 농도를 방사 (예를 들어, 50 μCi를 / μmol, 0.1 μCi를 μL / 각각)이 pmol의 / CPM을 계산하도록. pmol의 14 CO 2 / 샘플 14 CO 2 / 샘플 CPM에서 배경 보정 플라이 포드 데이터를 변환하기 위해이 요소를 사용합니다. 그리고 파리의 수와 비행 포드 시간의 숫자로 나눕니다.
Representative Results
방사성 기질의 대사로부터 생성되는 호기 및 포획 방사성 CO 2의 양 플라이 포드 파리의 수뿐만 아니라 동물의 CO 2 회수 장치에 소요되는 시간과 상관한다. 이를 테스트하기 위해 18 시간 동안 금식 한 파리 2 시간 동안 방사성 표지 팔 미트 산 (0.02 μCi를 / μL 음식)를 공급 한 후 3 ~ 6 시간의 배양을위한 12 또는 25 동물의 그룹에서 방사성 표지 CO 2 생산을위한 시험 하였다. 25 파리 제조 CO 2의 양은 12 파리 제조 거의 두 배였으며, 각 그룹의 양이 항온 처리 시간은 6 시간 (도 2a)을 3 시간으로 증가 될 때 두배. pmol의 14 CO 2 / 파리 / 시간은 각 그룹에서 거의 동등했다.
금식 ß 오하여 지방산 류의 분해를 촉진xidation; 따라서 지방산 산화에서 CO 2 생산 먹인 동물에 비해 절식 동물에서 증가한다. 이 경우인지 확인하려면 18 시간이 파리 2 시간 동안 방사성 팔 미트 산을 공급 하였다 금식. 짧은 펄스 공급 후, 파리의 두 그룹으로 분할하고, 3 시간 동안 비 표지 즉석 식품을 1 % 아가로 전송 한 다음 2 시간 동안 포드 비행 옮겼다. 두 개의 별도의 실험에서, ß 산화가 금식 동물 증가되었음을 나타내는 식품 (그림 2B)에 쫓아 파리와 비교 한천 생산 훨씬 더 많은 방사성 표지 CO 2에 쫓아 날아갑니다.
도 1 호기 수집 장치 방사성 표지 CO 2.
방사성 표지 대사 기판을 소비 한 파리는는 "비행 포드"(FP), 메시 (M)로 출장 컷오프 원심 분리기 튜브에 배치했다. 플라이 포드 100 μL 포화 GF / B 여과지를 포함하는 중앙 웰 (CW)를 배치되는 오프 - 센터 홀을 포함하는 고무 상부 스토퍼 (S)와 20 ㎖ 유리 섬광 바이알에 넣고, 캡핑 5 % KOH. 호기 CO 2는 KOH와 반응 중탄산 여과지에 포집된다. 갇혀, 방사성 표지 CO 2가 포화 여과지의 섬광 계수에 의해 정량화 할 수있다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 2 시간 14 CO 2 생산의 상관 관계와 파리에서의 수연준 금식 조건에 비행 포드와 응답합니다.
(A) 방사성 표지 팔미 테이트 공급 파리에서 생산 된 14 CO 2의 양 (N = 12 (오픈 바) 또는 25 (폐쇄 바)) 파리 포드에서 소비와 시간 (3 또는 6 시간 시험 파리의 수와 상관 관계 ). 당 비행을 바탕으로, 파리는 0.99, 1.13, 1.10 및 1.01 pmol의 14 CO 2 / 시간 (그래프 데이터로 올바른 순서로 같은 왼쪽에 나열된 데이터)를 생산했다.
(B) 음식을 추격했다 파리보다 팔미 테이트 더 많은 방사성 표지 산화 한천에 추격했다 파리. 데이터는 두 실험이며 표준 편차 수단으로보고되는 N = 16-17 파리 / 그룹 (실험 1); N = 10 파리 / 그룹 (실험 2). * P = 0.017, 학생의 t-test를. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
Discussion
이 프로토콜은 성인 초파리 특정 방사성 표지 된 기질의 산화를 측정하는 방법을 설명한다. 이 방법은 간단 정량적 재현성 성이며,이 ATP 생산에 산화 영양소 (들)를 식별 할 수 있기 때문에 전체 CO 2 생산 O이 소비를 측정하는 기존의 방법을 보완한다.
여기에 설명 된 방법을 사용하여 특정 방사성 표지 된 기질의 산화로부터 유리 CO 2의 측정은 전체 CO 2 생산을 측정하는 기술을 보완한다. 총 CO 2 제품 (V의 CO2가) 및 총 O 2 소모량 (V O2)가 공지되면, 대사 속도를 산출 할 수 있고, 산화 반응을위한 연료 소스 호흡 교환 비율에 기초하여 추정 될 수있다 (V를 대사량의 평가를 허용 CO2 / V의 O2 = RER). 언제탄수화물 배타적 기판 RER = 1이지만, 지방산은 단독 소스 RER = 0.7, 포도당, 지질의 산화 반응의 화학량 론에 의해이 때. 초파리 (14)의 산소 소비를 측정하는 장치의 부재에있어서, 상기 산화성 연료 소스를 식별 할 수 없다. 라벨이 추적 한 방사성 기판 또는 다른 양 및 방사성 표지 CO 2 생산의 측정 속도로 운항하는 항공사에 의해 그러나, 하나는 자극 동안이나 효과에 대해 서로 다른 시간 지점에서 주어진 기판을 산화하는 파리의 능력에 대한 결론을 도출 할 수 있습니다 연료의 산화에 돌연변이를 부여.
이 프로토콜에서 중요한 단계가 있습니다. 유출 및 연구 분야의 오염을 방지하기 위해, 방사성 물질을 사용할 때는 먼저주의를 기울여야한다. 단계 2.1 및 3.4 중 파리 마취 둘째, 실험자 장시간 CO (2)의 효과를 피하기 위하여 신속하게 작동해야신진 대사와 행동에 노출. 20 파리의 그룹 마취 새로운 바이알에 20 초 이하에서 비행 포드로 전송할 수 있습니다. 식품 유리 병에 마취 장치에서 전송하면, 유리 병은 음식 표면에 갇히지에서 마취 파리를 방지하기 위해 옆에 휴식해야한다. 파리 단계 2.2에서와 같이 여러 날에 걸쳐 공급 방사성 표지 음식 경우, 실험자는 파리 탈수에 민감로 음식이 건조하지 않도록 보장해야한다.
연방 또는 금식 상태 사전 라벨링 라벨의 선택, 표시 시간의 길이, 플라이 포드 기간, 마취의 방법은이 방법을 사용할 때, 문제 및 변형을 실시 할 수있는 파라미터이다. (- 3 시간 2) 사전에 금식 기간을 실시하지 않는 방사성 표지 음식의 상당량을 소비 할 가능성이 첫째, 짧은 라벨링 기간을 실시 날아갑니다. 라벨 C 둘째, 검색한 대사 표현형에 대한 이끌어 낼 수있는 결론에 영향을 미칩니다. 예를 들어, D-에서 방사성 표지 CO 2 생산 [1- (14) C] 글루코스는 시트르산 사이클 또는 펜 토스 포스페이트 션트 통해 산화를 반영 할 수는 D-에서 방사성 CO 2 생산 반면 [6- (14) C] 글루코스 산화 반영 시트르산 회로 통해서만 12,15,16. 필수 아미노산 (17, 18)에 대한 방사성 트레이서 파리 먹이는 것은 단백질 유래의 아미노산의 산화를 평가하는 좋은 전략이 될 것이다. 마지막으로, 방사성 표지 포도당과 긴 표시 기간은 또한 중성 지방 (19)와 같은 쉽게 피루브산과 interconverts 알라닌 등의 아미노산과 같은 분자의 다른 클래스에이 전구 물질의 혼입의 가능성을 올립니다. 이것은 분자 (6)의 서로 다른 클래스에 혼입 된 방사능을 측정함으로써 평가 될 수있다. 사실, 파리의 별도의 동료가 공급 될 수 방사선동일한 방식으로 기판 iolabeled하고, 예를 들면 조건 (6)에 저장된 공급 글리코겐 및 트리글리세리드 유지 금식된다 플라이 포드 실험 또는 방사능 표지의 측정에 사용된다. 또 다른 전략은 방사성 표지식이 영양소 자체 산화 이들 영양소 저장되지 형태 공개 가능성 단락 표시 기간을 사용하는 것이다. 셋째, 파리의 두 그룹이 처음 주어진 시간에 걸쳐 14 CO 2 생산의 동일 등급하지만, 매우 상이한 레이트를 가질 수 있다는 것도 가능하다. 따라서, 플라이 창에 지출 파리 시간의 양을 변화하면 표현형의 변화를 평가할 때 변경하는 중요한 매개 변수 일 수있다. 마지막으로,이 프로토콜은 CO 2 마취 플라이 포드 장치에 파리를 넣어 짧은 기간의 사용을 요구한다. CO 2 마취 플라이 포드 실험의 과정을 통해 대사 기능에 영향을 미칠 수있다. 또 다른 a를pproach은 신진 대사 속도 (20)에 영향을주지 않습니다 질소 마취를 사용하는 것입니다.
연료의 산화 및 신진 대사 속도와 같은 복잡한 시스템을 측정하는 기술과 마찬가지로, 여기에 설명 된 방법은 한계가있다. 첫째, 기판의 다른 시작 양 분석의 CO 2 컬렉션 위상을 입력 따라서 방사성 음식의 다른 양을 소비 할 수있는 다른 그룹에 날아 것이 가능하다. 이것은 큰 샘플 크기의 실험을 수행함으로써 한꺼번에 파리를 공급함으로써 어느 정도에 대해 제어 될 수있다. 비슷한 푸른 색 용기는 방사성 표지를 소비 한 것이며 실험의 추적 부분에 이월 할 수와 짧은 라벨 기간 동안, 파리. 파리의 그룹에 남아있는 방사성 표지의 양을 또한 실험의 끝에서 상기 공급 및 초기 추적 기간 종료 후 파리 별도 코호트를 측정 할 수있다. 사이 둘째, 활동 수준파리 포드에서 파리의 그룹이 다를 수 있습니다. 이는 실험적으로 결정된 데이터를 해석 할 때 고려되어야 할 것이다. 셋째로,이 기술은 전체 CO 2 생산 특정한식이 영양제 또는 영양소의 저장 형태 (들) 만 생산을 측정하지 않는다. 이 프로토콜은 대체하지 않습니다하지만 다른 및 추가 정보를 제공하기 때문에 대신 VCO (2)의 측정을 보완.
여기에 기재된 방법은 특정 대사 기질 미량의 산화 반응의 산물이며, 방사성 CO 2 호기 측정한다. 포도당 지방산 또는 아미노산 - - 사용 된 상표를 변화시킴으로써 하나는 기아 같은 다른 유전 적 배경에 다른 생리 학적 조건하에 대사 상이한 기판들의 기여를 평가하기 위해 더욱 정교한 실험을 설계 할 수있다. 이 기술의 미래 응용 프로그램은 metabolis의 측정을 포함개발의 애벌레와 번데기 단계, 각각 영양소 저장 및 고장의 극단을 특징으로 초파리의 수명주기의 두 단계에서 m.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| PALMITIC ACID, [1-14C]-, 50 µCi | PerkinElmer | NEC075H050UC | |
| GLUCOSE, D-[6-14C]-, 50 µCi | PerkinElmer | NEC045X050UC | |
| Glucose, D-[1-14C]-, 50µCi | PerkinElmer | NEC043X050UC | |
| Drosophila Vials, Narrow, Polystyrene | Genesee Scientific | 32-116 | |
| Round-Bottom Polypropylene Tubes, 12 x 75 mm | Fisher Scientific | 14-959AA | |
| Mesh, nitex nylon, 120 µm | Genesee Scientific | 57-102 | |
| 20 ml borosilicate glass scintillation vials | Fisher Scientific | 03-337-15 | |
| Flask top stopper with off-center hole | Fisher Scientific | K882310-0000 | |
| Polypropylene center well | Fisher Scientific | K882320-0000 | |
| Whatman GF/B glass microfiber filter paper, circle, 2.1cm diameter | Fisher Scientific | 09-874-20 | |
| Ecoscint A | National Diagnostics | LS-273 | |
| 6 ml Scintillation Vials with Push-On/Twist-Off Caps | National Diagnostics | SVC-06 |
References
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