Murine Experimental Model van de oorspronkelijke tumor Ontwikkeling en peritoneale metastase<em> via</em> Orthotope Inenting met ovariumcarcinoom Cells
Summary
Het meerstaps proces van peritoneale verspreiding van ovariumcarcinoom verduidelijken de huidige studie beschrijft een murine experimenteel model van originele tumorontwikkeling en metastase via orthotope peritoneale inoculatie met deze tumorcellen.
Abstract
Epitheliaal ovariumcarcinoom (EOC) is geassocieerd met een slechte prognose omdat het peritoneale verspreiding toont. De prognose te verbeteren, is het belangrijk om peritoneale verspreiding beheersen. Het is echter nog onduidelijk hoe tumorcellen losmaken van primaire letsels en hechten aan de mesothelium. De oprichting van een geschikt diermodel is nodig om een goed begrip van het mechanisme van peritoneale verspreiding in vivo te krijgen. In de huidige studie introduceren we de werkwijze van de lokale injectie van EOC cellen in de muizen ovariële oppervlak om de ontwikkeling van metastasen, waaronder het peritoneum en gelegen organen. Vrouwelijk naakt muizen (BALB / c nu / nu) en 8 weken oud werden gebruikt. Onder een microscopisch gezichtsveld, EOC cellen (1 x 10 5 cellen / gl medium extracellulaire matrix (ECM) -gebaseerde hydrogel / eenzijdige ovarium / muis) werden in muizen eierstokken geïnjecteerd door een retroperitoneale benadering van de dorsale flank. De voorgestelde methode is een less invasieve procedure voor de muis en minimaliseert beschadiging van de eierstok. Hier beschrijven we de methodologische stappen in de ontwikkeling van het origineel en metastatische tumorvorming van EOC.
Introduction
Epitheliale ovariumcarcinoom (EOC) is goed voor het hoogste tarief van kanker-gerelateerde sterfte onder gynaecologische maligniteiten 1. EOC is geassocieerd met een slechte prognose, voornamelijk vanwege de late symptomen en wordt vaak geassocieerd met meerdere intraperitoneale verspreidingen en metastasen 2-4. Peritoneale verspreiding is een multi-step proces. Allereerst tumorcellen losmaken van de primaire letsels en migreren naar de buikholte. Wanneer de tumorcellen hechten aan de peritoneale mesothelium, beginnen ze weefsel binnen te dringen door de mesothelium 5,6. Om beter te begrijpen van de tumor biologie (bv, de progressie van kanker en therapeutische respons), muis modellen bieden een schat aan informatie. Een xenograft met menselijke kankercellen wordt veel gebruikt voor muismodellen waarin menselijke kankercellen subcutaan geïnoculeerd, intraperitoneaal, intraveneus en orthotopically. Een dier model met een orthotopically grafted tumor kan efficiënter en nauwkeuriger resultaten op ten de tumoromgeving bij mensen geven ten opzichte van een diermodel met een geïmplanteerde tumor heterotoop. Daarom is voor vele menselijke tumoren, orthotope transplantatie modellen zijn vastgesteld 7-11.
Hier beschrijven we de orthotope enting van humane cellen EOC door een retroperitoneale benadering van de dorsale flank, die beperkte invasiviteit opzichte ventrale inoculatie. Deze techniek kan een verscheidenheid aan bruikbare informatie over EOC, vooral het mechanisme van intraperitoneale verspreiding verschaffen.
Protocol
Representative Results
Discussion
Dierlijke modellen zijn van essentieel belang om de mechanismen van de ontwikkeling van tumoren, progressie, metastase en werkzaamheid van het geneesmiddel te analyseren tegen kankercellen. Muizen die humaan ovarium kankercellen eveneens zijn gebruikt als diermodel. Hier beschrijven we een minder invasieve procedure voor het beheer van de ovariële tumor cellen op een orthotope website. Deze procedure, enting in de eierstokken door een retroperitoneale benadering van de dorsale flank biedt aanzienlijke voordelen boven a…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
De auteurs danken de leden van de afdeling Obstetrie en Gynaecologie en de biologie van kanker voor hun nuttige discussies en technische bijstand. Deze studie werd ondersteund door een Japan Maatschappij ter Bevordering van de Wetenschap (JSPS) Grant-in-Steun voor Wetenschappelijk Onderzoek (15K15604, om H. Kajiyama).
Materials
| Matrigel matrix | BD | 354234 | ECM-based hydrogel |
| Insulin syringe | TERUMO | SS-05M2913 | 1/2cc, 29Gx1/2" |
| Suturing needle with suture | 11mm, 3/8, Nylon6-0 | ||
| Reflex 7mm Wound Clip Applier | CellPoint Scientific | 204-1000 | |
| Reflex 7mm wound clips | CellPoint Scientific | 203-1000 |
References
- Jemal, A., et al. Global cancer statistics. CA Cancer J Clin. 61 (2), 69-90 (2011).
- Kajiyama, H., et al. Long-term clinical outcome of patients with recurrent epithelial ovarian carcinoma: is it the same for each histological type. Int J Gynecol Cancer. 22 (3), 394-399 (2012).
- Kikkawa, F., et al. Advances in treatment of epithelial ovarian cancer. Nagoya J Med Sci. 68 (1-2), 19-26 (2006).
- Yoshikawa, N., et al. Clinicopathologic features of epithelial ovarian carcinoma in younger vs. older patients: analysis in Japanese women. J Gynecol Oncol. 25 (2), 118-123 (2014).
- Kajiyama, H., et al. Involvement of SDF-1alpha/CXCR4 axis in the enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma. Int J Cancer. 122 (1), 91-99 (2008).
- Terauchi, M., et al. Possible involvement of TWIST in enhanced peritoneal metastasis of epithelial ovarian carcinoma. Clin Exp Metastasis. 24 (5), 329-339 (2007).
- Bronstein, L., Zechner, C., Koeppl, H. Bayesian inference of reaction kinetics from single-cell recordings across a heterogeneous cell population. Methods. 85, 22-35 (2015).
- Guo, W., Zhang, S., Liu, S. Establishment of a novel orthotopic model of breast cancer metastasis to the lung. Oncol Rep. 33 (6), 2992-2998 (2015).
- Lewis-Tuffin, L. J., et al. Src family kinases differentially influence glioma growth and motility. Mol Oncol. , (2015).
- Saar, M., et al. Orthotopic tumorgrafts in nude mice: A new method to study human prostate cancer. Prostate. 75 (14), 1526-1537 (2015).
- Zou, Y., et al. miR-29c suppresses pancreatic cancer liver metastasis in an orthotopic implantation model in nude mice and affects survival in pancreatic cancer patients. Carcinogenesis. 36 (6), 676-684 (2015).
- Lau, D. H., Lewis, A. D., Ehsan, M. N., Sikic, B. I. Multifactorial mechanisms associated with broad cross-resistance of ovarian carcinoma cells selected by cyanomorpholino doxorubicin. Cancer Res. 51 (19), 5181-5187 (1991).
- Bao, L., Matsumura, Y., Baban, D., Sun, Y., Tarin, D. Effects of inoculation site and Matrigel on growth and metastasis of human breast cancer cells. Br J Cancer. 70 (2), 228-232 (1994).
- Huang, M. J., et al. Epidemiological investigation on major depressive disorder in the most heavily damaged areas from Wenchuan earthquake in 2008. Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi. 31 (2), 167-170 (2010).
- Ma, L., et al. Mortality of neonatal respiratory failure related to socioeconomic factors in Hebei province of China. Neonatology. 100 (1), 14-22 (2011).
- Lin, Z., et al. Serum levels of FGF-21 are increased in coronary heart disease patients and are independently associated with adverse lipid profile. PLoS One. 5 (12), e15534 (2010).
- Liu, B., et al. Lumbar interspinous non-fusion techniques: comparison between Coflex and Wallis. Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao. 30 (11), 2455-2458 (2010).
- Zhang, Y., et al. Wave intensity analysis of carotid artery: a noninvasive technique for assessing hemodynamic changes of hyperthyroid patients. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 30 (5), 672-677 (2010).
- Song, G. S., et al. Comparative transcriptional profiling and preliminary study on heterosis mechanism of super-hybrid rice. Mol Plant. 3 (6), 1012-1025 (2010).
- Wan, L., et al. The analysis of variation of Han female adolescent bone development in Henan and Zhejiang province. Fa Yi Xue Za Zhi. 26 (2), 97-99 (2010).
- Wang, H. B., et al. Excitation-emission fluorescence characterization study of the three phenolic compounds. Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi. 30 (5), 1271-1274 (2010).
