Summary

قياسات العضلة العاصرة الاحليل سيستوميتريك والخارجية في الفئران مستيقظا مع القسطرة مزروع واقطاب السماح للقياسات المتكررة

Published: January 30, 2018
doi:

Summary

هذا البروتوكول الأول يصف العملية الجراحية لزرع قسطرة المثانة جنبا إلى جنب مع أقطاب مصرة الاحليل الخارجي، والثانية، قياس وظيفة المثانة والإحليل الخارجية الدائمة العضلة العاصرة في الحيوانات مستيقظا مزروع.

Abstract

يتم تقييم الدالة المسالك البولية السفلي أساسا عن طريق تحليل وظيفة المثانة سيستوميتريك في القوارض. وعادة ما تتم سيستوميتريس التقليدية كتحليل المحطة الطرفية تحت التخدير يوريتان. فمن المعروف جيدا أن المخدرات مخدر يمكن أن يؤثر على وظيفة المثانة. وبالتالي، يهدف هذا الأسلوب لإجراء قياسات سيستوميتريك المثانة ومصرة الاحليل الخارجي في الفئران مستيقظا طفيفة من ضبط النفس. ولهذا الغرض، يتم زرع قسطرة مثانة في قبة المثانة. في وقت لاحق، هي مزروع قطبين الثنائية إلى العضلة العاصرة الاحليل الخارجي وهو خياطة قطب الأرضي للهيكل العظمى وعضلات غير مستجيبة. قسطرة المثانة والأقطاب الثلاثة أخيرا نفق تحت الجلد في منطقة الرقبة والملصقة على تسخير. مع هذه التقنية، يمكن قياس المسالك البولية السفلي في نقاط زمنية متعددة في نفس الحيوان لتقييم وظيفة الجهاز البولي السفلي. التطبيق الرئيسي من هذا الأسلوب هو متابعة المتزامنة المثانة ومصرة الاحليل الخارجية الدالة في الفئران صحية مستيقظا وبعد التعريفي للمرض أو الإصابة. وعلاوة على ذلك، يمكن إجراء الرصد اللاحقة المسالك البولية السفلي أثناء تقييم الإصابة/المرض ورصد فعالية العلاج.

Introduction

واستخدمت معظم الدراسات لتحليل تخزين البول ويفرغ الدالة والخلل، نماذج القوارض. من خلال تفعيل متتابعة من ردود الفعل، ينتج ميكتوريشن. تنسيق ردود الفعل هذه أمر ضروري لفعالية تبطل1. توفر تقنيات تسجيل سيستوميتريك أدوات قيمة لتحليل وظيفة المثانة البولية تحت تحكم العصبية1.

سيستوميتريس الأكثر تقليدية في الفئران القيام به كإجراء تحليل واحدة ونهائية في التخدير، أساسا يوريتان2، والتركيز على المثانة البولية فقط. ومع ذلك، في بعض الأمراض مثل الخلل العصبية في المسالك البولية السفلي (نلوتد)، هو المثانة البولية، ليس فقط، بل أيضا منفذ المثانة، الاحليل المصرة الخارجية، مختلة3،4. وهذا يجعل نلوتد صعوبة في المتابعة، إلا إذا كان يتم فحص المثانة في قياس سيستوميتريك واحد. للحصول على نتائج موثوقة قابلة للمقارنة للبشر، من الضروري لقياس كل من المثانة البولية ووظيفة العضلة العاصرة الاحليل الخارجية و التفاعلات2بدقة. وعلاوة على ذلك، من الأهمية بمكان لإجراء التحليلات الفنية في الفئران مستيقظا التخدير من المرجح جداً أن يغير المثانة الدالة2،،من56. سيستوميتريك جيدة تسجيل في الحيوانات مستيقظا هو الأساس لتحديد دالة وعطل المثانة7.

محطة سيستوميتري الحيوانات الصغيرة المستخدمة (مثلاً، كاتاماونت سيستوميتري محطة (قانون الأحوال المدنية)) وحدة لإجراء تحليلات سيستوميتريك في الحيوانات الصغيرة مستيقظا8. عن طريق قسطرة مثانة دائم واقطاب مزروع مصرة الاحليل الخارجي، يمكن إجراء القياسات المتكررة على مدى فترات وقت أطول2. وهكذا، احتجاز ثاني أكسيد الكربون يوفر أداة قيمة لغير العصبية والتقييمات نلوتد في نموذج القوارض، التي يمكن تغيير باثوميتشانيسمس أثناء متابعة قصيرة أو متوسطة الأجل. بالإضافة إلى ذلك، يتضمن هذا الأسلوب تحليلاً سيستوميتريك خفضت الحرفية باستخدام ريسترينير لإجراء قياسات المثانة في الفئران مستيقظا.

في هذه الورقة، ويصف لنا النهج الجراحية بشكل دائم زرع قسطرة مثانة واقطاب مصرة الاحليل الخارجي، جنبا إلى جنب مع قياسات سيستوميتريك في الفئران مستيقظا.

Protocol

وافق جميع الإجراءات الموصوفة هنا لجنة “الأخلاقيات الحكومية النمساوية” للبحوث الحيوانية (بونديسمينيستيريوم für Wissenschaft، Forschung und Wirtschaft، WF/V/3b) وكانت متفقة مع الرابطة “تقييم المختبر” الرعاية الحيوانية المبادئ التوجيهية لاستخدام الحيوان. وكانت الفئران المستخدمة لهذا النهج الفئران لويس أنثى، ع…

Representative Results

تخطيطي تبين عملية القياسات سيستوميتريك مستيقظا يرد في الشكل 1 ، والتشريح الداخلي لزرع قسطرة المثانة ويرد في الشكل 2. جراحة تستغرق حوالي 2 حاء التسكين بعد الجراحة والمضادات الحيوية، كما هو موضح في البروتوكول، تشمل الألم والالتهابات على مدى…

Discussion

هذا البروتوكول وصف العملية الجراحية قسطرة دائمة وغرس أقطاب الاحليل المصرة وسيستوميتريك تسجيل تقنية في الفئران مستيقظا، وخفة ضبط النفس بما في ذلك كل من التحليل المتزامن للمثانة البولية و العضلة العاصرة الاحليل الخارجي.

هي خطوات حاسمة خلال جراحة زرع قسطرة المثانة، تجنب الت…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

المؤلفين لا تملك أي شكر وتقدير.

Materials

Polyethylene tubing PE 50 Becton Dickinson 427411 Catheter
Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) Ethicon EH7403H Suture
Teflon coated steel wire Cooner wire AS631 Electrode material
Silver wire 0.250 mm World Precision Instruments AGW1030 Electrode material
Rotilabo – PVC tube Carl Roth 97241 Harness
Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) Ethicon V4940H Suture
Quick Connect Single Harness SAI Infusion Technologies QCH-23CW Harness
Shrinking tubes ChiliTec 17894 Electrode soldering
Soldering wire Pb60 Sn40 Stannol LD0029 Electrode soldering
Fluxing agent 157 Castolin Eutectin 157 0150 Electrode soldering
Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 801-87-050-10-001101 Electrode soldering
Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box Preci-dip 890-18-003-10-001101 Electrode soldering
Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) Catamount Research and Development Inc. CAT-CYT-R
Differential amplifier with active headstage AD instruments DP-311 EMG amplifier
Restrainer Medium size for rats 200-300 g emka Technologies HLD-RM
Uro Dyn Software Zürich of University MTA-based
Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age Charles River, Sulzfeld, Germany animals

References

  1. Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).
  2. Schneider, M. P., et al. A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats. BJU Int. 115, 8-15 (2015).
  3. Cruz, C. D., Cruz, F. Spinal cord injury and bladder dysfunction: new ideas about an old problem. Scientific World Journal. 11, 214-234 (2011).
  4. de Groat, W. C., Yoshimura, N. Plasticity in reflex pathways to the lower urinary tract following spinal cord injury. Exp Neurol. 235, 123-132 (2012).
  5. Matsuura, S., Downie, J. W. Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat. Neurourol Urodyn. 19, 87-99 (2000).
  6. Cannon, T. W., Damaser, M. S. Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat. Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).
  7. Patra, P. B., Thorneloe, K. S. Enhanced sensitivity to afferent stimulation and impact of overactive bladder therapies in the conscious, spontaneously hypertensive rat. J Pharmacol Exp Ther. 338, 392-399 (2011).
  8. Herrera, G. M., Meredith, A. L. Diurnal variation in urodynamics of rat. PloS One. 5, e12298 (2010).
  9. Chang, H. Y., Havton, L. A. Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats. Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1248-F1253 (2008).
  10. Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics. Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).
check_url/kr/56506?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Foditsch, E. E., Roider, K., Sartori, A. M., Kessler, T. M., Kayastha, S. R., Aigner, L., Schneider, M. P. Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements. J. Vis. Exp. (131), e56506, doi:10.3791/56506 (2018).

View Video