Cystometric и внешние уретры сфинктера измерения проснулся крыс с имплантированным катетера и электродов, позволяя для повторных измерений
Summary
Этот протокол описывает первый хирургическая процедура имплантации постоянного катетера мочевого пузыря, в сочетании с наружного сфинктера уретры электродов и во-вторых, измерение функции мочевого пузыря и уретры сфинктер в имплантированных спать животных.
Abstract
Главным образом функция нижних мочевыводящих путей оценивается посредством анализа функции мочевого пузыря cystometric грызунов. Обычные cystometries обычно выполняются как терминал анализ под наркозом уретана. Хорошо известно, что анестетики могут влиять на функцию мочевого пузыря. Таким образом цель этой техники является для выполнения cystometric измерений наружного сфинктера уретры и мочевого пузыря в слегка сдержанной проснулся крыс. Для этой цели катетером мочевого пузыря имплантируется в купол мочевого пузыря. Впоследствии два электрода вживляются двусторонних для наружного сфинктера уретры и местах электрод зашивается к неотвечающим скелетных мышц. Катетер мочевого пузыря и три электроды наконец туннель подкожно в область шеи и прикреплены к обвязке. С этой техникой нижних мочевыводящих путей может быть измерена в нескольких точках времени же животное, чтобы оценить функцию нижних мочевыводящих путей. Основное применение этой техники является продолжением одновременных мочевого пузыря и внешние уретры сфинктера функции проснулся здоровых крыс и после индукции болезни или травмы. Кроме того последующие нижних мочевыводящих путей мониторинга может выполняться во время оценки болезни/травмы и контролировать эффективность лечения.
Introduction
Для анализа мочи хранения и Отмена функции и дисфункции, большинство исследований использовали грызунов модели. Благодаря последовательной активации рефлексов производится мочеиспускания. Координация этих рефлексов имеет важное значение для эффективного мочеиспускания1. Cystometric запись методы предоставляют ценные инструменты для анализа функции мочевого пузыря под его нейронных управления1.
Большинство обычных cystometries крыс сделали как единый, окончательный анализ в анестезии, главным образом уретана2и сосредоточиться исключительно на мочевого пузыря. Однако в некоторых патологий как нейрогенной дисфункции нижних мочевыводящих путей (NLUTD), не только мочевого пузыря, но и выходе мочевого пузыря, наружного сфинктера уретры, является неблагополучной3,4. Это затрудняет NLUTD последующей деятельности, если только в одном cystometric измерение рассматривается мочевого пузыря. Чтобы получить достоверные результаты, которые сопоставимы с людей, важно точно измерить мочевого пузыря и внешние уретры сфинктера функции и его взаимодействий2. Кроме того важно выполнять функциональные анализы проснулся крыс, как анестезии весьма вероятно, изменить мочевого пузыря функция2,5,6. Хороший cystometric, запись в спать животных является основой для идентификации мочевого пузыря функции и неисправности7.
Мелких животных цистометрия станции используется (например, Catamount цистометрия станции (CCS)) — это единица для выполнения анализов cystometric в небольших просыпаются животные8. С помощью катетером мочевого пузыря постоянным и электродов имплантированных наружного сфинктера уретры повторяющихся измерений могут быть выполнены над больше времени периоды2. Таким образом, CCS предоставляет ценный инструмент для не нейрогенный и NLUTD оценок в грызунов модели, в которой Патомеханизмы можно изменить во время краткосрочных или среднесрочных решений. Кроме того этот метод включает в себя анализ артефакта снижение cystometric с помощью фиксатор для проведения измерения мочевого пузыря в бодрствовать крыс.
В настоящем документе мы описываем хирургический подход к постоянно имплантата катетером мочевого пузыря и наружного сфинктера уретры электродов, наряду с cystometric измерения проснулся крыс.
Protocol
Representative Results
Discussion
Этот протокол описывает хирургической процедуры постоянного катетера и имплантация электродов уретрального сфинктера и cystometric, запись технику в awake, слегка сдержанной крыс, включая как одновременный анализ мочевого пузыря и Внешние уретры сфинктера.
Важнейшие шаги во в…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы не имеют каких-либо подтверждений.
Materials
| Polyethylene tubing PE 50 | Becton Dickinson | 427411 | Catheter |
| Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) | Ethicon | EH7403H | Suture |
| Teflon coated steel wire | Cooner wire | AS631 | Electrode material |
| Silver wire 0.250 mm | World Precision Instruments | AGW1030 | Electrode material |
| Rotilabo – PVC tube | Carl Roth | 97241 | Harness |
| Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) | Ethicon | V4940H | Suture |
| Quick Connect Single Harness | SAI Infusion Technologies | QCH-23CW | Harness |
| Shrinking tubes | ChiliTec | 17894 | Electrode soldering |
| Soldering wire Pb60 Sn40 | Stannol | LD0029 | Electrode soldering |
| Fluxing agent 157 | Castolin Eutectin | 157 0150 | Electrode soldering |
| Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 801-87-050-10-001101 | Electrode soldering |
| Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 890-18-003-10-001101 | Electrode soldering |
| Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) | Catamount Research and Development Inc. | CAT-CYT-R | |
| Differential amplifier with active headstage | AD instruments | DP-311 | EMG amplifier |
| Restrainer Medium size for rats 200-300 g | emka Technologies | HLD-RM | |
| Uro Dyn Software | Zürich of University | MTA-based | |
| Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age | Charles River, Sulzfeld, Germany | animals |
References
- Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. Rodent models for urodynamic investigation. Neurourol Urodyn. 30, 636-646 (2011).
- Schneider, M. P., et al. A novel urodynamic model for lower urinary tract assessment in awake rats. BJU Int. 115, 8-15 (2015).
- Cruz, C. D., Cruz, F. Spinal cord injury and bladder dysfunction: new ideas about an old problem. Scientific World Journal. 11, 214-234 (2011).
- de Groat, W. C., Yoshimura, N. Plasticity in reflex pathways to the lower urinary tract following spinal cord injury. Exp Neurol. 235, 123-132 (2012).
- Matsuura, S., Downie, J. W. Effect of anesthetics on reflex micturition in the chronic cannula-implanted rat. Neurourol Urodyn. 19, 87-99 (2000).
- Cannon, T. W., Damaser, M. S. Effects of anesthesia on cystometry and leak point pressure of the female rat. Life Sci. 69, 1193-1202 (2001).
- Patra, P. B., Thorneloe, K. S. Enhanced sensitivity to afferent stimulation and impact of overactive bladder therapies in the conscious, spontaneously hypertensive rat. J Pharmacol Exp Ther. 338, 392-399 (2011).
- Herrera, G. M., Meredith, A. L. Diurnal variation in urodynamics of rat. PloS One. 5, e12298 (2010).
- Chang, H. Y., Havton, L. A. Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats. Am J Physiol Renal Physiol. 295, F1248-F1253 (2008).
- Yaksh, T. L., Durant, P. A., Brent, C. R. Micturition in rats: a chronic model for study of bladder function and effect of anesthetics. Am J Physiol. 251, R1177-R1185 (1986).
