Gravação de Intracavernosal pressão para avaliar a função erétil em roedores
Summary
Gravação de pressão Intracavernosal (ICP) é um método importante para avaliar a função erétil de animais experimentais. Aqui, um protocolo detalhado é demonstrado para o procedimento de gravação do ICP catheterizing o pênis crura e então eletricamente estimulando os nervos cavernosos em ratos.
Abstract
Disfunção erétil (ED) é definida como a incapacidade de alcançar ou manter uma ereção do pênis, e isso se tornou um distúrbio sexual masculino predominante. Roedores são empregados por muitos estudos de investigação a fisiologia/patologia da função erétil. A função erétil em roedores pode ser avaliada medindo-se a pressão de intracavernosal (ICP). Na prática, o ICP pode ser monitorado após a estimulação elétrica do nervo cavernoso (CNs). A pressão arterial da artéria carótida (a pressão arterial média) é usada como referência para ICP. Usando ICP protocolos de gravação, muitos parâmetros-chave de função erétil podem ser medidos a partir da curva de resposta do ICP. A medição de ICP fornece mais informações do que o teste de ereção peniana induzida por apomorfina e é mais barata que o monitoramento Telemétrico do pênis corpus spongiosum, tornando este método esse mais popular para avaliar a função erétil. No entanto, em comparação com o teste realizado facilmente induzida por APO a função erétil, gravações bem sucedidas do ICP requerem atenção aos detalhes, prática e aderência ao método de operação. Neste trabalho, uma introdução à gravação de ICP em ratos é fornecida para complementar o procedimento de forma eficiente.
Introduction
ED é definido como a incapacidade de alcançar ou manter uma erecção do pénis e tornou-se um distúrbio sexual masculino comum1. Animais experimentais são utilizados e fornecem modelos reprodutíveis para investigar a função erétil2. Por um longo tempo, vários modelos animais maiores têm sido empregados para investigar a função erétil3,4,5. Embora os roedores são relativamente pequenos em comparação com outros animais, eles também são usados para o estudo da disfunção erétil masculina devido exibindo várias vantagens6. Primeiro, as características sexuais morfológicas e funcionais dos seres humanos são recapituladas em roedores. Em segundo lugar, em comparação com animais maiores, utilizados nos estudos de ED, roedores são mais econômicos comprar, casa e manter. Modelos de roedores geneticamente modificados, terceiros fornecem vantagens em estudos comportamentais, bem como neurofisiológicos reprodutíveis e subsequentes. Portanto, roedores tornaram-se rapidamente os principais animais utilizados no estudo da disfunção erétil masculina.
Beneficiando de uma base genética pura e as condições de cultura consistente, modelos de roedores forneceram dados consistentemente reprodutível5,6,7,8. Entre os numerosos estudos disponíveis relacionados a muitos aspectos das funções erétil, a apomorfina (APO)-teste de resposta erétil induzida e o teste de resposta do ICP induzido por estimulação elétrica são os métodos mais utilizados que reflectem fielmente erétil função9,10,11,12. O teste de função erétil induzida por APO, desenvolvido por Heaton et al 13, é um bioensaio que utiliza o fenômeno que a administração da apomorfina para ratos provoca ereções e bocejos. Como um fácil, não invasivo e estável bioensaio para avaliar a função erétil, o teste de função erétil induzida por APO é amplamente utilizado em muitos estudos. No entanto, este ensaio não reflete adequadamente a qualidade das ereções ou as mudanças dinâmicas no fluxo sanguíneo associado com uma resposta erétil14. Medições de ICP foram inicialmente desenvolvidas pela Quinlan et al 15. neste método, um cateter é colocado na artéria carótida para medir a pressão arterial sistêmica, e outro cateter é inserido no corpo cavernoso crus para gravar o ICP. Antes ou durante o ICP de gravação, um agente vasoativas e/ou estimulação elétrica de campo do gânglio pélvica principal (MPG) ou NC muitas vezes foram dadas a ratos14. Este ensaio tem sido uma ferramenta confiável para avaliar as terapias e medicamentos para ED e provavelmente irá ser usado como um método de avaliação vital no futuro6.
Comparado com o teste realizado facilmente induzida por APO a função erétil, gravações de ICP sucesso requerem atenção aos detalhes, prática e aderência ao método de operação. Portanto, aqui, nós fornecemos uma descrição detalhada de como realizar a gravação do ICP.
Protocol
Representative Results
Discussion
Como uma medida direta da função erétil, o ICP é um método confiável de14. Isso permite a aquisição de dados na ICP basal, pico ICP, planalto ICP, tempo de ereção e detumescence tempo, duração da resposta, etc. Além destes direcionar parâmetros medidos, existem alguns outros parâmetros de índice: (1) “T80”, o tempo para chegar a 80% do pico ICP; (2) “D20”, a hora de diminuir para 20% do pico ICP; (3) “ΔT80”, a taxa de aumento da pressão (por segundo) em T80; e (4) “ΔD20…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pelos fundos de pesquisa Fundamental para as universidades Central (020814380018, 020814380077), The China Scholarship Council (CSC, n. º 201606195024), Fundação ciência Natural da província de Jiangsu (BK20160138) e chave projeto suportado pela ciência e pela Fundação de desenvolvimento da tecnologia, universidade médica de Nanjing (2014NJMUZD053).
Materials
| Animal | |||
| Rats | Strain: Sprague-Dawley Age: 2-3 month |
||
| Rats | Strain: Sprague-Dawley Age: 15-18 month |
||
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagents | formula | ||
| Saline | Sigma-Aldrich, S7653 | dissolve 8.5 gram sodium chloride in distilled water | |
| Pentobarbital sodium solution | Sigma-Aldrich, P3761 | dissolve 1 gram in 100 ml saline | |
| Povidone-iodine | BTP Pharmaceutical Co. Limited | 10% (V/V) | |
| Ethanol | China National Pharmaceutical Group Corporation (SINOPHARM) | 70% (V/V) | |
| Heparin | Sigma-Aldrich, H3149 | dissolve 20000U heparin in 100 ml saline | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Materials | |||
| Hypodermic needle | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd. | 23G | |
| Syringe | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd | 10 ml | |
| Three-way stopcock | Chengdu Instrument factory | TSK 01 | |
| Electrode | Chengdu Instrument factory | JST-1 | |
| Catheter tube | Chengdu Instrument factory | PE-10, PE-50 | |
| Operating scissors | Shanghai operation equipment factory | J22010, J22020 | |
| Ophthalmic operating scissors | Shanghai operation equipment factory | Y00010, Y00020 | |
| Ophthalmic forceps | Shanghai operation equipment factory | JD1010, JD1020 | |
| MicroScissors | World Precision Instruments | WAA260 | |
| silk suture | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co., Ltd. | 5-0 | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Stimulator | Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) | 15 Hz, 5 ms pulse, 5 V, 60 s duration and 5 minutes interval | |
| Multichannel signal collection processing system | Nanjing medease science and technology co. ltd (model 4C501H) | Blood pressure model | |
| Pressure transducer | Beijing Xin Hang Xing Ye Technology Trading Company Limited (model YP100) | 40KPa | |
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