Isolering av mesenkymala stamceller från mänskliga alveolära periostet och effekter av D-Vitamin på osteogent aktivitet av periostet-derived celler
Summary
Vi presenterar ett protokoll för att undersöka de mRNA uttryck biomarkörer för periostet-derived celler (PDC) induceras av C-vitamin (vitamin C) och 1,25-dihydroxivitamin D-vitamin [1,25-(OH)2D3]. Dessutom utvärderar vi PDC: er förmåga att differentieras till osteocyter, kondrocyter och adipocyter.
Abstract
Mesenkymala stamceller (MSC) finns i en mängd olika vävnader och kan göras åtskillnad mellan in i många celltyper, däribland osteoblaster. Bland dental källorna av MSCs är periostet en lättillgänglig vävnad, som har identifierats för att innehålla MSCs i cambium lagret. Men har denna källa ännu inte allmänt studerats.
Vitamin D3 och 1,25-(OH)2D3 har visat sig stimulera i vitro differentiering av MSCs till osteoblaster. C-vitamin underlättar dessutom kollagen bildning och ben celltillväxt. Dock har ingen studie ännu undersökt effekterna av Vitamin D3 och C-Vitamin på näringsidkaravgifterna.
Här presenterar vi en metod för att isolera MSCs från human alveolär periostet och undersöka hypotesen att 1,25-(OH)2D3 kan utöva en osteoinduktiv effekt på dessa celler. Vi också undersöka förekomsten av MSCs i human alveolär periostet och bedöma stem celladhesion och spridning. För att bedöma nyckel förmågan hos vitamin C (som en kontroll) och olika koncentrationer av 1,25-(OH)2D3 (10−10, 10−9, 10−8och 10−7 M) för att ändra mRNA biomarkörer i isolerade MSCs mRNA uttryck av alkaliskt fosfatas (ALP), ben sialoprotein (BSP), core bindande faktor alfa-1 (CBFA1), kollagen-1 och osteocalcin (OCN) mäts med hjälp realtid polymeras-kedjereaktion (RT-PCR).
Introduction
Även om många relevanta tekniker har utvecklats under de senaste åren, ben återuppbyggnad fortfarande begränsad av flera begränsningar, och uppskatta omfattningen av nödvändiga återuppbyggnaden är ofta omöjligt. Hårdvävnad bröstförstoring krävs för att uppnå både estetiska och funktionella mål utöver en god långsiktig framgång. Metoder som vanligen används för sådana förfaranden inkluderar autogen och prövningar bentransplantation, xenografting och alloplastic bentransplantation. Bland de olika typerna av bentransplantat betraktas autogen bone Transplanterad läderhud de mest effektiva. Givare webbplats sjuklighet, nedsatt vaskularitet och begränsad vävnad tillgänglighet1 har dock stora nackdelar för autogena bengraft. Dessutom har prövningar bone Transplanterad läderhud och xenograft förknippats med sjukdomsspridning. För närvarande används syntetiska bone grafts allmänt för att lösa dessa problem. Dock med deras brist osteogent potential, har kliniska resultat varierat mycket. Material såsom cellulosa är associerade med volym fluktuation, infektion och en brist på styrka.
Ben augmentation med vävnadsteknik har genererat betydande intresse. Den här tekniken används mesenkymala stamceller (MSC) ursprungligen för att främja osteoblast differentiering, som transplanteras sedan till platsen för att uppnå ben reparation förlust av benmassa. Detta förfarande används för närvarande i cellterapi. Att uppnå benrekonstruktion genom att extrahera en begränsad mängd vävnad är enklare och mindre invasiva jämfört med andra metoder.
MSCs potentiella roll som ett verktyg för cellbaserade terapier syftar till dental regenerering är ett framväxande intresse bland olika forskargrupper. Studier har bekräftat att MSCs kan skiljas från följande typer av vävnad: benmärg, fett, synovial membran, pericyt, trabekulärt ben, mänskliga navelsträngen och dental vävnader2,3. Vanliga källor av MSCs omfattar benmärg, fettvävnad och dental vävnader. Fördelarna med dental stamceller jämfört med MSCs härrör från fettvävnad och benmärg, och är lätt tillgänglighet och mindre sjuklighet efter skörd. Jämfört med embryonala stamceller, MSCs härrör från dentala vävnad visas nonimmunogenic och är inte associerade med komplexa etiska betänkligheter3.
I 2006, International Society for cellulära terapi rekommenderas använda följande standarder för att identifiera MSCs: först MSCs måste kunna fästa till plast. MSCs måste andra vara positiv för ytantigener CD105, CD73 och CD90 och negativa på markörer för monocyter, makrofager och B-celler förutom hematopoetiska antigener CD45 och CD344. Som ett sista kriterium, MSCs måste kunna differentieras till följande tre typer av celler under standart villkorar av in vitro- differentiering: osteoblaster, adipocyter och kondrocyter4. Hittills har sex typer av mänskliga dental stamceller isoleras och karakteriseras. Den första typen isolerades från mänskliga massa vävnad och kallas postnatal tandpulpan stamceller5. Därefter tre ytterligare typer av dentala MSCs har varit isolerade och kännetecknas: stamceller från exfolierad mjölktänder6, den parodontala ligament7och den apikala papilla8. Mer nyligen, dentala follikeln-derived9, gingival vävnad-derived10, dental knopp stam cells(DBSCs)11och Periapikal cysta MSCs (hPCy-MSCs)12 har också identifierats.
Friedenstein var först att definiera MSCs13. MSCs uppvisar en hög spridning potentiella och kan manipuleras för att skilja innan att transplanterade, vilket tyder på att de är perfekta kandidater för regenerativ förfaranden10.
Även om de flesta studier har använt benmärg som en källa för stamceller, periostet-derived celler (PDC) har också nyligen använt14. Periostet är mer lättillgängligt än är benmärgen. Därför, den här tekniken använder vi alveolära periostet att eliminera behovet av ytterligare snitt under operation och minska postsurgical morbiditet hos patienter. Periostet är den bindväv som bildar den yttre beklädnaden av långa ben och består av två distinkta lager: yttre fibrösa lagret består av fibroblaster, kollagen och elastiska fibrer15, och det inre cell-rika cambium lagret i direkt kontakt med benytan. Cambium lagret innehåller en blandad cell befolkningen, framför allt fibroblaster16, osteoblaster17, pericyter18och en kritisk subpopulation som identifierats som MSCs19,20,21. De flesta studier har rapporterat att PDC är jämförbara, om inte överlägsen, benmärg-derived stamceller (bMSCs) i ben läkning och förnyelse22,23,24. Periostet är lättillgängligt och uppvisar utmärkta regenerativ effektivitet. Några studier har dock fokuserat på periostet25,26,27.
Angående ben reparation innebär nuvarande klinisk praxis transplantation av periost stamceller förstärks inom stödjande ställningar. Nyligen genomförda studier har fokuserat på förvärva stamceller i defekta regioner och sysselsätter stamceller för vävnad förnyelse20. Tandläkare också förutse framtida tillämpning av parodontala ben förnyelse i parodontala behandlingar och tandimplantat. Angående webbplatsen givare, periostet kan enkelt skördas av allmän tandläkare. Detta jämför positivt mot märgen stromaceller, eftersom periostet kan nås under rutinmässiga oral kirurgi. Syftet med denna studie är således att upprätta ett protokoll för skörd PDC och bedöma de morfologi, fastsättning, livskraft och spridning av mänskliga periostet stamceller.
Vitamin D metaboliter påverka i vivo bentäthet dynamiska equilibriumen. En studie rapporterade att den 24R,25-(OH)2D3 aktiva formen av D-Vitamin är nödvändigt för osteoblastiska differentiering av mänskliga MSCs (hMSCs)28. Ben homeostas och reparation regleras av ett nätverk av Vitamin D3 metaboliter, som 1,25-(OH)2D3 (kalcitriol) är den mest biologiskt aktiva och relevanta i regleringen av benhälsa. Vitamin D3 är viktigt för förkalkning29. I en studie med 2-d gamla Kunming vita möss, visade de embryoid organen i möss att C-Vitamin och D-vitamin effektivt främjas differentiering av ESC-derived osteoblaster30. Bland dess andra biologiska aktiviteter stimulerar 1,25-(OH)2D3 i vitro differentiering av hMSCs till osteoblaster, som kan övervakas baserad på ökningen i alkaliskt fosfatas (ALP) enzymaktivitet eller OCN gen uttryck.
Få studier har upptäckt ett dos-responsförhållande kombinerade behandlingar med C-Vitamin och 1,25-(OH)2D3 i mänskliga PDC med särskilt fokus på ben vävnadsteknik. Därför i denna studie undersöker vi de optimala koncentrationerna för enkel eller kombinerad behandling av 1,25-(OH)2D3 och Vitamin C för att inducera osteogent differentiering av mänskliga PDC. Målet med detta protokoll är att bestämma om en cell befolkningen isolerade från dental alveolära periostet innehåller celler med en MSC fenotyp och huruvida dessa celler kan utvidgas i kultur (in vitro-) och differentierade för att bilda den önska vävnaden . Dessutom utvärderar vi PDC: er förmåga att differentieras till osteocyter, kondrocyter och adipocyter. Den andra delen av studien utvärderar effekterna av Vitamin C och 10−10, 10−9, 10−8och 10−7 M 1,25-(OH)2D3 på osteogent aktiviteten av PDC. Huvudsyftet med denna studie är att bedöma funktioner C-Vitamin och 1,25-(OH)2D3 under osteoblastiska differentiering av PDC: er av ALP aktivitet och pro-osteogent gener, t ex ALP, kollagen-1, OCN, BSP och CBFA1. Dessutom avgör denna studie optimal osteoinduktiv för mänskliga PDC: er baserat på dessa fynd.
Protocol
Representative Results
Discussion
En nyligen utvecklad terapeutisk modalitet, nämligen Vävnadsrekonstruktion medför MSCs har många fördelar. MSCs, som är närvarande i flera vävnadstyper, är multipotenta celler som kan differentieras till en mängd funktionella mesodermala vävnad celler37 och andra celler som osteoblaster.
Periostet fungerar som en nisch för stamceller och som en rik vaskulatur leverans för benet den omsluter38. I vår studie, av de 34 undersökta prov…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Studieprotokollet godkändes av den institutionella Review Board för klinisk forskning av Chang Gung Memorial Hospital (IRB99-1828B, 100-3019C, 99-3814B, 102-1619C, 101-4728B och 103-4223C). Denna studie stöddes av Chang Gung Memorial Hospital (CMRPG392071, CMRPG3A1141, CMRPG3A1142 och NMRPG3C0151). Detta manuskript redigerades av Wallace akademiska redigering.
Materials
| 0.25% trypsin-EDTA | Gibco | 25200-056 | |
| 2-phospho-L-ascorbic acidtrisodium salt | Sigma | 49752 | |
| 35-mm culture dishes | Corning | 430165 | |
| 3-isobutyl-1-methylxanthine | Sigma | I5879 | |
| 6 well plate | Corning | 3516 | |
| Alkaline phosphatase | ABI | Hs01029144_m1 | |
| Alkaline Phosphatase Activity Colorimetric Assay Kit | BioVision | K412-500 | |
| avian myeloblastosis virus reverse transcriptase | Roche | 10109118001 | |
| CD146 | BD | 561013 | |
| CD19 | BD | 560994 | |
| CD34 | BD | 560942 | |
| CD44 | BD | 561858 | |
| CD45 | BD | 561088 | |
| CD73 | BD | 561014 | |
| CD90 | BD | 561974 | |
| Cell banker1 | ZEAOAQ | 11888 | |
| core binding factor alpha-1 | ABI | Hs00231692_m1 | |
| dexamethasone | Sigma | D4902 | |
| DPBS | Gibco | 14190250 | |
| FBS | Gibco | 26140-079 | |
| GAPDH | ABI | Hs99999905_m1 | |
| HLA-DR | BD | 562008 | |
| indomethacin | Sigma | I7378 | |
| insulin | sigma | 91077C | |
| insulin–transferrin–selenium-A | Sigma | I1884 | |
| MicroAmp Fast 96 well reaction plate(0.1ml) | Life | 4346907 | |
| MicroAmp optical adhesive film | Life | 4311971 | |
| Minimum Essential Medium 1X Alpha Modification | HyClone | SH30265.02 | |
| Penicillin/Streptomycin | Gibco | 15140-122 | |
| Permeabilization buffer | eBioscience | 00-8333-56 | |
| Sodium pyruvate | Gibco | 11360070 | |
| STRO-1 | BioLegend | 340103 | |
| SYBER Green PCR Master Mix | AppliedBiosystems | 4309155 | |
| TaqMan Master Mix | Life | 4304437 | |
| transforming growth factor-β | Sigma | T7039 | |
| Trizol reagent (for RNA isolation) | Life | 15596018 | |
| β-glycerophosphate | Sigma | G9422 | |
| collagen-1 | Invitrogen | forward primer 5' CCTCAAGGGCTCCAACGAG-3 | |
| reverse primer 5'-TCAATCACTGTCTTGCCCCA-3' | |||
| OCN | Invitrogen | forward primer 5'-GTGCAGCCTTTGTGTCCAAG-3' | |
| reverse primer 5'-GTCAGCCAACTCGTCACAGT-3' | |||
| BSP | Invitrogen | forward primer 5' AAAGTGAGAACGGGGAACCT-3' | |
| reverse primer 5'-GATGCAAAGCCAGAATGGAT-3' | |||
| Commercial ALP primers | |||
| Commercial CBFA1 primers |
References
- Kao, R. T., Murakami, S., Beirne, O. R. The Use of Biologic Mediators and Tissue Engineering in Dentistry. Periodontol. 50, 127-153 (2000).
- Rosenbaum, A. J., Grande, D. A., Dines, J. S. The Use of Mesenchymal Stem Cells in Tissue Engineering: A Global Assessment. Organogenesis. 4, 23-27 (2008).
- Yen, T. H., Wright, N. A., Poulsom, R., Franklyn, J. Bone Marrow Stem Cells: From Development to Therapy. Horizons in Medicine. 16, 249-257 (2004).
- Dominici, M., et al. Minimal Criteria for Defining Multipotent Mesenchymal Stromal Cells. The International Society for Cellular Therapy Position Statement. Cytotherapy. 8, 315-317 (2006).
- Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. Postnatal Human Dental Pulp Stem Cells (DPSCs). In Vitro and In Vivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 97, 13625-13630 (2000).
- Miura, M., et al. Stem Cells from Human Exfoliated Deciduous Teeth. Proc Natl Acad Sci U S A. 100, 5807-5812 (2003).
- Seo, B. M., et al. Investigation of Multipotent Postnatal Stem Cells from Human Periodontal Ligament. Lancet. 364, 149-155 (2004).
- Sonoyama, W., et al. Mesenchymal Stem Cell-Mediated Functional Tooth Regeneration in Swine. PLOS ONE. 1, e79 (2006).
- Morsczeck, C., et al. Isolation of Precursor Cells (PCs) from Human Dental Follicle of Wisdom Teeth. Matrix Biol. 24, 155-165 (2005).
- Mitrano, T. I., et al. Culture and Characterization of Mesenchymal Stem Cells from Human Gingival Tissue. J Periodontol. 81, 917-925 (2010).
- Di Benedetto, A., Brunetti, G., Posa, F., Ballini, A., et al. Osteogenic Differentiation of Mesenchymal Stem Cells from Dental Bud: Role of Integrins and Cadherins. Stem Cell Res. 15, 618-628 (2015).
- Marrelli, M., Paduano, F., Tatullo, M. Cells Isolated from Human Periapical Cysts Express Mesenchymal Stem Cell-like Properties. Int J Biol Sci. 9 (10), 1070-1078 (2013).
- Friedenstein, A. J., Piatetzky-Shapiro, I. I., Petrakova, K. V. Osteogenesis in Transplants of Bone Marrow Cells. J Embryol Exp Morphol. 16, 381-390 (1966).
- Perka, C., Schultz, O., Spitzer, R. S., Lindenhayn, K., Burmester, G. R., Sittinger, M. Segmental Bone Repair by Tissue-Engineered Periosteal Cell Transplants with Bioresorbable Fleece and Fabrin Scaffolds in Rabbits. Biomaterials. 21, 1145-1153 (2000).
- Taylor, J. F., Hall, B. K. . The Periosteum and Bone Growth. , (1992).
- Squier, C., Ghoneim, S., Kremenak, C. Ultrastructure of the Periosteum from Membrane Bone. J Anat. 171, 233-239 (1990).
- Aubin, J., Triffitt, J., Bilezikian, J., Raisz, L. G., Rodan, G. A. Mesenchymal Stem Cells and Osteoblast Differentiation. Principles of Bone Biology. , 59-81 (2002).
- Diaz-Flores, L., Gutierrez, R., Lopez-Alonso, A., Gonzalez, R., Varela, H. Pericytes as a Supplementary Source of Osteoblasts in Periosteal Osteogenesis. Clin Orthop Relat Res. 275, 280-286 (1992).
- Lim, S. M., Choi, Y. S., Shin, H. C., Lee, C. W., Kim, S. L., Kim, D. I. Isolation of Human Periosteum-Derived Progenitor Cells Using Immunophenotypes for Chondrogenesis. Biotechnol Lett. 27, 607-611 (2005).
- Stich, S., et al. Human Periosteum-Derived Progenitor Cells Express Distinct Chemokine Receptors and Migrate Upon Stimulation with CCL2, CCL25, CXCL8, CXCL12, and CXCL13. Eur J Cell Biol. 87, 365-376 (2008).
- Choi, Y. S., et al. Multipotency and Growth Characteristic of Periosteum-Derived Progenitor Cells for Chondrogenic, Osteogenic, And Adipogenic Differentiation. Biotechnol Lett. 30, 593-601 (2008).
- Agata, H., et al. Effective Bone Engineering with Periosteum-Derived Cells. J Dent Res. 86, 79-83 (2007).
- Ribeiro, F. V., et al. Periosteum-Derived Cells as an Alternative to Bone Marrow Cells for Bone Tissue Engineering Around Dental Implants. A Histomorphometric Study in Beagle Dogs. J Periodontol. 81, 907-916 (2010).
- Hayashi, O., et al. Comparison of Osteogenic Ability of Rat Mesenchymal Stem Cells from Bone Marrow, Periosteum and Adipose Tissue. Calcif Tissue Int. 82, 238-247 (2008).
- Hong, H. H., Hong, A., Yen, T. H., Wang, Y. L. Potential Osteoinductive Effects of Calcitriol onthe m-RNA of Mesenchymal Stem Cells Derived from Human Alveolar Periosteum. BioMed Res Int. , (2016).
- Knothe, U. R., Dolejs, S., Miller, R. M., Knothe Tate, M. L. Effects of Mechanical Loading Patterns, Bone Graft, and Proximity to Periosteum on Bone Defect Healing. J Biomech. 43, 2728-2737 (2010).
- McBride, S. H., Dolejs, S., Brianza, S., Knothe, U. R., Knothe Tate, M. L. Net Change in Periosteal Strain During Stance Shift Loading After Surgery Correlates to Rapid de novo Bone Generation in Critically Sized Defects. Ann Biomed Eng. 39, 1570-1581 (2011).
- Curtis, K. M., Aenlle, K. K., Roos, B. A., Howard, G. A. 24R,25-Dihydroxyvitamin D3 Promotes the Osteoblastic Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells. Mol Endocrinol. 28 (5), 644-658 (2014).
- Mostafa, N. Z., et al. Osteogenic Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells Cultured with Dexamethasone, Vitamin D3, Basic Fibroblast Growth Factor, and Bone Morphogenetic Protein-2. Connect Tissue Res. 53 (2), 117-131 (2012).
- Sun, Y., Yang, X., Li, F., Dou, Z. Study on Differentiation of Embryonic Stem Cells into Osteoblast in vitro Inducing by 1,25(OH)2VD3. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22 (9), 1117-1120 (2008).
- Ishii, M., Koike, C., Igarashi, A., et al. Molecular Markers Distinguish Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells from Fibroblasts. Biochem Biophys Res Commun. 332, 297-303 (2005).
- Maund, S. L., Barclay, W. W., Hover, L. D., et al. Interleukin-1α Mediates the Antiproliferative Effects of 1,25-Dihydroxyvitamin D3 in Prostate Progenitor/Stem Cells. Cancer Res. 71, 5276-5286 (2011).
- Mitrano, T. I., Grob, M. S., Carrión, F., Nova-Lamperti, E., Luz, P. A., Fierro, F. S., Quintero, A., Chaparro, A., Sanz, A. Culture and Characterization of Mesenchymal Stem Cells From Human Gingival Tissue. J Periodontol. 81 (6), 917-925 (2010).
- Curtis, K. M., Aenlle, K. K., Roos, B. A., Howard, G. A. 24R,25-Dihydroxyvitamin D3 Promotes the Osteoblastic Differentiation of Human Mesenchymal Stem Cells. Mol Endocrinol. 28, 644-658 (2014).
- Ippolito, G., Schiller, P. C., Ricordi, C., Roos, B. A., Howard, G. A. Age Related Osteogenic Potential of Mesenchymal Stromal Stem Cells from Human Vertebral Bone Marrow. J Bone Miner Res. 14, 1115-1122 (1999).
- D’Stucki, U., et al. Temporal and Local Appearance of Alkaline Phosphatase Activity in Early Stages of Guided Bone Regeneration. A Descriptive Histochemical Study in Humans. Clin Oral Implants Res. 12, 121-127 (2001).
- Caplan, A. I., Bruder, S. P. Mesenchymal stem cells: building blocks for molecular medicine in the 21st century. Trends Mol Med. 7, 259-264 (2001).
- Knothe Tate, M. L., Falls, T., McBride, S. H., Atit, R., Knothe, U. R. Mechanical Modulation of Osteochondroprogenitor Cell Fate. Int J Biochem Cell Biol. 40, 2720-2738 (2008).
- Yoshimura, H., Muneta, T., Nimura, A., Yokoyama, A., Koga, H., Sekiya, I. Comparison of Rat Mesenchymal Stem Cells Derived from Bone Marrow, Synovium, Periosteum, Adipose Tissue, and Muscle. Cell Tissue Res. 327, 449-462 (2007).
- Tanaka, H., Ogasa, H., Barnes, J., Liang, C. T. Actions of bFGF on Mitogenic Activity and Lineage Expression in Rat Osteoprogenitor Cells: Effect of Age. Mol Cell Endocrinol. 150, 1-10 (1999).
- Zhou, S., et al. Clinical characteristics influence in vitro action of 1,25-dihydroxyvitamin D(3) in human marrow stromal cells. J Bone Miner Res. 27 (9), 1992-2000 (1992).
- Pittenger, M. F., et al. Multilineage Potential of Adult Human Mesenchymal Stem Cells. Science. 284, 143-147 (1999).
- Jørgensen, N. R., Henriksen, Z., Sorensen, O. H., Civitelli, R. Dexamethasone, BMP-2, and 1,25-dihydroxyvitamin D enhance a more differentiated osteoblast phenotype: validation of an in vitro model for human bone marrow-derived primary osteoblasts. Steroids. 69, 219-226 (2004).
- Khanna-Jain, R., et al. Vitamin D(3) Metabolites Induce Osteogenic Differentiation in Human Dental Pulp and Human Dental Follicle Cells. J Steroid BiochemMol Biol. 122 (3), 133-141 (2010).
- Lee, J. H., O’Keefe, J. H., Bell, D., Hensrud, D. D., Holick, M. F. Vitamin D Deficiency an Important, Common, and Easily Treatable Cardiovascular Risk Factor?. J Am Coll Cardiol. 52, 1949-1956 (2008).
- Liu, P., Oyajobi, B. O., Russell, R. G., Scutt, A. Regulation of osteogenic differentiation of human bone marrow stromal cells: interaction between transforming growth factor-beta and 1,25(OH)(2) vitamin D(3) In vitro. Calcif Tissue Int. 65 (2), 173-180 (1999).
- Beresford, J. N., Gallagher, J. A., Russell, R. G. G. 1,25-Dihydroxyvitamin D3 and Human Bone-Derived Cells In Vitro: Effects on Alkaline Phosphatase, Type I Collagen and Proliferation. Endocrinology. 119, 1776-1785 (1986).
- Price, P. A., Baukol, S. A. 1,25-Dihydroxyvitamin D3 Increases Synthesis of the Vitamin K-Dependent Bone Protein by Osteosarcoma Cells. J Biol Chem. 255, 11660-11663 (1986).
- Kawase, T., Oguro, A. Granulocyte Colony-Stimulating Factor Synergistically Augments 1, 25-Dihydroxyvitamin D3-Induced Monocytic Differentiation in Murine Bone Marrow Cell Cultures. Horm Metab Res. 36, 445-452 (2004).
- Fujisawa, R., Tamura, M. Acidic Bone Matrix Proteins and Their Roles in Calcification. Front Biosci. (Landmark Ed). 17, 1891-1903 (2012).
- van Driel, M., et al. Evidence that Both 1α,25 Dihydroxyvitamin D3 and 24-Hydroxylated D3 Enhance HuMan Osteoblast Differentiation and Mineralization. J Cell Biochem. 99, 922-935 (2006).
- Atkins, G. J., et al. Metabolism of Vitamin D3 in Human Osteoblasts: Evidence for Autocrine and Paracrine Activities of 1 α ,25-Dihydroxyvitamin D3. Bone. 40, 1517-1528 (2007).
- Kerner, S. A., Scott, R. A., Pike, J. W. Sequence Elements in the Human Osteocalcin Gene Confer Basal Activation and Inducible Response to Hormonal Vitamin D3. Proc Natl Acad Sci U S A. 86, 4455-4459 (1989).
- Viereck, V., et al. Differential Regulation of Cbfa1/Runx2 and Osteocalcin Gene Expression by Vitamin-D3, Dexamethasone, and Local Growth Factors in Primary Human Osteoblasts. J Cell Biochem. 86, 348-356 (2002).
- Shi, X., et al. In-vitro osteogenesis of synovium stem cells induced by controlled release of bisphosphate additives from microspherical mesoporous silica composite. Biomaterials. 30, 3996-4005 (2009).
- Sakaguchi, Y., Sekiya, I., Yagishita, K., Muneta, T. Comparison of Human Stem Cells Derived from Various Mesenchymal Tissues: Superiority of Synovium as a Cell Source. Arthritis Rheum. 52, 2521-2529 (2005).
