Summary

Строительство Улучшенный мульти тетрод Hyperdrive для крупномасштабных нейронных записи в себя крысы

Published: May 09, 2018
doi:

Summary

Мы представляем строительство 3D-печати hyperdrive восемнадцать независимо регулируемый tetrodes. Hyperdrive предназначен для записи активности мозга в свободно себя крыс в течение нескольких недель.

Abstract

Мониторинг активности модели большое количество нейронов в течение многих дней в спать животных весьма полезен в области нейробиологии систем. Одним из ключевых компонентов этой техники состоит из точного размещения нескольких электродов в желаемой мозга и поддержания их стабильности. Здесь мы описываем протокол для строительства 3D-печати hyperdrive, которая включает в себя восемнадцать независимо регулируемый tetrodes и разработан специально для в vivo внеклеточного нейронных записи в свободно себя крыс. Tetrodes, придает диски Microdrive либо индивидуально расширенный на несколько областей мозга, вдоль дорожки, или может использоваться для размещения массива электродов в меньшей площади. Несколько tetrodes позволяют одновременное рассмотрение action potentials из десятков отдельных нейронов, а также местных потенциалов поля из популяций нейронов в мозгу во время активного поведения. Кроме того конструкция предусматривает простой 3D разработки программного обеспечения, которые могут быть легко изменены для различных экспериментальных потребностей.

Introduction

В области систем нейробиологии ученые изучают нейронные корреляты, лежащие в основе когнитивных процессов, таких как пространственной навигации, память и принятия решений. Для этих типов исследований важно отслеживать деятельность многих отдельных нейронов во время поведение животных. За последние десятилетия два важных достигнуты для нужд экспериментальной внеклеточного нейронных записи в мелких животных1,2,3. Сначала было развитие тетрод, пучок четыре микропроводов, используемый для записи нейронной активности нейронов одновременно1,2,4. Дифференциальный сигнал амплитуд деятельности по четырем каналам тетрод позволяет для изоляции отдельных нейрон активности от многих одновременно зарегистрированных клетки5. Кроме того гибкий характер микропроводов позволяет большей стабильности тетрод, минимизации относительное смещение между тетрод и целевой популяции клеток. Tetrodes в настоящее время широко используются вместо одного электрода для многих исследования мозга в различных видов, включая грызунов1,2,6, приматы7и8насекомых. Во-вторых развития hyperdrive перевозил несколько независимо движимого tetrodes, который позволяет одновременный мониторинг нейронной активности от больших популяций нейронов из нескольких записи расположения3, 910,,,1112.

Наличие надежных и доступных мульти тетрод записывающее устройство для мелких животных ограничен. Классический hyperdrive, первоначально разработанный Брюс McNaughton13, успешно используется для нейронных записей в свободно себя крыс в многих лабораториях в последние два десятилетия9,10,14, 15. Однако, по техническим причинам, оригинальные компоненты, необходимые для построения МакНотон диск в настоящее время очень трудно получить и не совместимы с интерфейсами приобретение недавно улучшенных данных. Другой хорошо признанных дизайн hyperdrive требует диски Microdrive, чтобы быть индивидуально ручной работы, которая может выдать противоречивые результаты и потребляют значительное время12. Для записи нейронной активности из различных регионов мозга в поведения крыс, мы разработали новый hyperdrive с использованием stereolithographic технологии. Мы стремились удовлетворять следующим требованиям: (1) новый hyperdrive должны позволяют точное перемещение tetrodes в мозге и стабильная запись из нескольких целевых регионов; (2 новый hyperdrive должны быть совместимы с системой магнитного quickclip, недавно разработанных позволяют легко подключения; и (3) новые hyperdrive могут быть точно воспроизведены с материалами легко доступны. Здесь мы предоставляем технику для создания 3D-печати hyperdrive, содержащие восемнадцать самостоятельно движимого tetrodes, основанный на МакНотон дизайн. В протоколе, мы описываем подробности процесса изготовления новых hyperdrive, который мы использовали успешно записывать потенциалы действия одного нейрона и местных потенциалов поля от postrhinal и медиальный entorhinal коре недель в свободно поведение крыс во время естественных нагула задач.

Protocol

1. Лазерная стереолитография 3D моделей Используйте методы stereolithographic для печати hyperdrive частей и аксессуаров. Каждый hyperdrive состоит из восемнадцати челноков, восемнадцать трансфер, болты и по одному из всех других пластиковых частей (рис. 1).Примечание: Аксессуары не …

Representative Results

Мы использовали недавно построенный hyperdrive для получения результатов испытаний. Привод был оборудован tetrodes, построенный от ø 17 мкм (0.0007″), провод полиимидно покрытием платины Иридиум (90% – 10%). Советы tetrodes были покрытием платины черный решения для уменьшения сопротивлени?…

Discussion

Здесь мы описываем процесс построения недавно разработанных hyperdrive состоит из восемнадцати самостоятельно движимого tetrodes. Привода могут быть построены из доступных частей, приобрести во многих магазинах доступны оборудования, в сочетании с компонентами, созданные stereolithographic печати. Hyp…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Мы благодарим Moser лаборатории в институте Кавли систем неврологии и центр для нейронных вычислений, Норвежский университет науки и техники, для хронической нейронных записи процедуры в крыс. Эта работа была поддержана гранта NIH R21 NS098146 и человека пограничной науки программы долгосрочных стипендий LT000211/2016-L для L. Lu.

Materials

Welding rod Blue Demon ER308L-035-01T Stainless steel, 0.035" in diameter
Screw McMaster 91771A060 Stainless steel, flat head, 0-80 thread, 5/8" in length
Screw McMaster 91772A051 Stainless steel, pan head, 0-80 thread, 5/32" in length
Screw McMaster 92196A056 Stainless steel, socket head, 0-80 thread, 5/16" in length
Screw McMaster 92196A055 Stainless steel, socket head, 0-80 thread, 1/4" in length
Screw McMaster 95868A131 Nylon,  socket head, 2-56 thread, 3/16" in length, black
Screw nut McMaster 90730A001 Stainless steel, narrow hex,  0-80 thread
Shoulder screw McMaster 90298A213 Stainless steel, 8-32 thread, 3/16" in diameter, 1/4" in length
Cup screw McMaster 92313A105 Stainless steel, 4-40 thread, 3/16" in length
Thumb screw McMaster 94323A592 Nylon, 8-32 thread, 3/8" in length, black
Magnet Apex M3X1MMDI Neodymium, 3 mm X 1 mm disc
Metal tubing Small Parts B00137QHNS Stainless steel, 23 gauge, 0.0253" OD, 0.013" ID, 0.006" wall
Metal tubing New England Small Tube Custom-made Stainless steel, 30 gauge, 0.012/0.0125" OD, 0.007/0.008" ID, full hard
Heat-shrink tubing McMaster 7856K72 0.09" ID before shrinking, blue
Silicone tubing A-M Systems 807300 0.040" ID, 0.085" OD
Polyimide tubing A-M Systems 823400 0.0045" ID, 0.0005" wall
Ground wire A-M Systems 791500 0.005" bare, 0.008" coated, half hard
Tetrode wire California Fine Wire Custom-made 0.0007" in diameter, platinum-iridium (90%-10%), HML and VG coating
EIB Neuralynx EIB-72-QC-Large
Gold pins Neuralynx large EIB pins
Tap Balax 01302-000 M1.2 thread size
Tap McMaster 2522A811 0-80 thread size, bottoming
Tap McMaster 2522A771 0-80 thread size, plug
Tap McMaster 26955A94 3/8"-24 thread size, bottoming
Tap McMaster 2522A713 2-56 thread size
Tap McMaster 2522A715 4-40 thread size
Tap McMaster 2522A718 8-32 thread size
Die McMaster 2576A457 3/8"-24 thread size, 1" OD
Drill bit McMaster 30585A82 Wire gauge 65, 0.035" in diameter
Drill bit McMaster 30585A83 Wire gauge 66, 0.033" in diameter
Drill bit McMaster 30585A87 Wire gauge 70, 0.028" in diameter
Drill bit McMaster 30585A88 Wire gauge 71, 0.026" in diameter
Drill bit McMaster 30585A91 Wire gauge 73, 0.024" in diameter
Drill bit McMaster 8870A23 3/16" in diameter
Dremel disc Wagner 31M Diamond coated, 22 mm in diameter, 0.17 mm in thickness
Steel wire Precision Brand 21212 0.012" in diameter, full hard
Steel wire Precision Brand 21007 0.007" in diameter, full hard
Steel wire A-M Systems 792700 0.003" in diameter, half hard
Super glue Loctite LT-40640 # 406
Super glue Loctite LT-41550 # 415
Dental acrylic powder  Teets 223-3773 Coral
Dental acrylic liquid Teets 223-4003

References

  1. O’Keefe, J., Recce, M. L. Phase relationship between hippocampal place units and the EEG theta rhythm. Hippocampus. 3 (3), 317-330 (1993).
  2. Wilson, M. A., McNaughton, B. L. Dynamics of the hippocampal ensemble code for space. Science. 261 (5124), 1055-1058 (1993).
  3. Gothard, K. M., Skaggs, W. E., Moore, K. M., McNaughton, B. L. Binding of hippocampal CA1 neural activity to multiple reference frames in a landmark-based navigation task. J Neurosci. 16 (2), 823-835 (1996).
  4. Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J Neurosci Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).
  5. Buzsaki, G. Large-scale recording of neuronal ensembles. Nat Neurosci. 7 (5), 446-451 (2004).
  6. Fyhn, M., Hafting, T., Witter, M. P., Moser, E. I., Moser, M. B. Grid cells in mice. Hippocampus. 18 (12), 1230-1238 (2008).
  7. Skaggs, W. E., et al. EEG sharp waves and sparse ensemble unit activity in the macaque hippocampus. J Neurophysiol. 98 (2), 898-910 (2007).
  8. Guo, P., Pollack, A. J., Varga, A. G., Martin, J. P., Ritzmann, R. E. Extracellular wire tetrode recording in brain of freely walking insects. J Vis Exp. (86), (2014).
  9. Knierim, J. J., McNaughton, B. L., Poe, G. R. Three-dimensional spatial selectivity of hippocampal neurons during space flight. Nat Neurosci. 3 (3), 209-210 (2000).
  10. Leutgeb, S., et al. Independent codes for spatial and episodic memory in hippocampal neuronal ensembles. Science. 309 (5734), 619-623 (2005).
  11. Lansink, C. S., et al. A split microdrive for simultaneous multi-electrode recordings from two brain areas in awake small animals. J Neurosci Methods. 162 (1-2), 129-138 (2007).
  12. Kloosterman, F., et al. Micro-drive array for chronic in vivo recording: drive fabrication. J Vis Exp. (26), (2009).
  13. . Google Patents Available from: https://www.google.com/patents/US5928143 (1999)
  14. Redish, A. D., et al. Independence of firing correlates of anatomically proximate hippocampal pyramidal cells. J Neurosci. 21 (5), RC134 (2001).
  15. Schmitzer-Torbert, N., Redish, A. D. Neuronal activity in the rodent dorsal striatum in sequential navigation: separation of spatial and reward responses on the multiple T task. J Neurophysiol. 91 (5), 2259-2272 (2004).
  16. Nguyen, D. P., et al. Micro-drive array for chronic in vivo recording: tetrode assembly. J Vis Exp. (26), (2009).
  17. Chang, E. H., Frattini, S. A., Robbiati, S., Huerta, P. T. Construction of microdrive arrays for chronic neural recordings in awake behaving mice. J Vis Exp. (77), e50470 (2013).
  18. Vandecasteele, M., et al. Large-scale recording of neurons by movable silicon probes in behaving rodents. J Vis Exp. (61), e3568 (2012).
  19. Siegle, J. H., et al. Chronically implanted hyperdrive for cortical recording and optogenetic control in behaving mice. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 2011, 7529-7532 (2011).
  20. Brunetti, P. M., et al. Design and fabrication of ultralight weight, adjustable multi-electrode probes for electrophysiological recordings in mice. J Vis Exp. (91), e51675 (2014).
  21. . Google Patents Available from: https://www.google.com/patents/US4575330 (1986)
  22. Ludvig, N., Potter, P. E., Fox, S. E. Simultaneous single-cell recording and microdialysis within the same brain site in freely behaving rats: a novel neurobiological method. J Neurosci Methods. 55 (1), 31-40 (1994).

Play Video

Cite This Article
Lu, L., Popeney, B., Dickman, J. D., Angelaki, D. E. Construction of an Improved Multi-Tetrode Hyperdrive for Large-Scale Neural Recording in Behaving Rats. J. Vis. Exp. (135), e57388, doi:10.3791/57388 (2018).

View Video