독 소 루비의 Retrobulbar 주입 및 예방의 지속적인된 출시 Aprotinin 여 볼륨 유지에 의해 쥐에서 신 증후군의 유도
Summary
여기, 우리는 독 소 루비의 신속한 retrobulbar 주입 하 여 129S1/SvImJ 마우스에 있는 실험적인 신 증후군의 유도 설명합니다. 우리는 또한 aprotinin 요도 떠들고 효소 활동을 억제 하 고 나트륨 보존 방지를 포함 하는 지속적인된 출시 펠 릿을 가진 신 쥐를 취급 합니다.
Abstract
신 증후군 proteinuric 신장 질환의 가장 극단적인 징후 이며 무거운 proteinuria, 저, 및 나트륨 보존 및 혈 종에 의해 특징. 이 증후군의 병 태 생리학 연구, 설치류 모델 개발 되었습니다 독 소 루비 podocyte 손상을 일으키는 독성 물질의 주입에 따라. 마우스에서 단지 몇 가지 변종이이 모델을 따르게 됩니다. Wildtype 129S1/SvImJ 마우스에서 retrobulbar 부 비 동에 급속 한 정 맥 주사 하 여 독 소 루비의 실험적인 신 증후군 기능 나트륨 보유, 부 종 등 인간의 질병의 모든 증상을 유도 한다. Proteinuria의 발병 후 쥐 전시 상피 나트륨 채널 (ENaC)과 나트륨 보존의 활성화를 이끌어 요 떠들고 효소 활동을 증가 했다. 약리학 지속적인된 출시 aprotinin와 치료에 의해 요도 떠들고 프로 테아 제 억제 ENaC 활성화 되어있는 나트륨 보유를 방지 한다. 이 모델은 proteasuria, 즉이상 공부 하기 적합., 그것의 γ 소 단위의 베이스에 의해 ENaC 활성화 시키는 활성 떠들고 프로 테아의 배설. 이 ENaC 활성화 및 proteinuric 장병에 나트륨 유지의 기본 메커니즘으로 간주 될 수 있다.
Introduction
신 증후군은 무거운 proteinuria, 저, 부 종 및 혈, 특징 그리고 proteinuric 신장 질환의 가장 극단적인 표현으로 간주 될 수 있다. 설치류에 실험적인 신 증후군 anthracyclines 또는 podocyte 피해를 연결 하 고 인간의 최소한의 변화 질병 및 초점 단편 glomerulosclerosis (FSGS)1유사한 puromycin의 단일 주사로 유도 수 있다. 후 Frenk 외에 의해 1955 년에 그것의 첫 번째 설명입니다. 2, 쥐에 puromycin nucleoside nephrosis (팬) 수많은 연구3,4,,56신 증후군의 병 태 생리학을 조사 하기 위해 표준 모델 되고있다. 마우스에 해당 모델 안트라사이클린 독 소 루비7에 의해 유도 될 수 있다. 그러나, 거기에 강한 유전자 두 개 이상 유전 loci8에 의해 결정 되는 스트레인-종속성입니다. 또한, proteinuric 응답 및 신 증후군9,10의 과정에서 차이가 있다. Retrobulbar 공동 통해 129S1/SvImJ 마우스 및 독 소 루비의 신속한 정 맥 주입을 사용 하 여, proteinuria 응답 증 증후군, 특히 볼륨 보존 특징의 일반적인 기능을 유도 하기에 충분 한 값에 도달 ascites 고 소변 거의 나트륨 무료7. 나트륨 보존 실험 증 증후군에는 plasmin의 γ 소 단위4의 베이스를 일으키는 등 프로 테아 aberrantly 필터링된 떠들고 원심 관에 상피 나트륨 채널 (ENaC)의 활성화의 결과로 추정 되었습니다. ,,1112. 최근,이 개념은 분해 ENaC 활성화 및 나트륨 보존에서 떠들고 protease 억제제 aprotinin ENaC 차단기 amiloride13으로 동등 하 게 효과적 이었던 치료에 의해 보호 되었다 신 생쥐에서 입증 되었다. 원심 관에 지속적인 배달 되도록 aprotinin 피하 이식된 지속적인된 출시 펠 릿을 통해 관리 되었다. 미래 연구는 병렬 인간의 상황을 생각 하는 신 증후군에서 분해 ENaC 활성화에 대 한 책임은 떠들고 프로 테아 제를 식별 해야 합니다. 이 위해 유도 하는 독 소 루비 신 증후군 야생-타입 마우스에 사용 하거나 유전자 조작된 생쥐를 확대 수 있는 귀중 한 모델입니다. 약의 낮은 비용, 낮은 복잡성 관리 및 좋은 재현성14는 그것의 장점이 있습니다.
이 문서에서는 retrobulbar 부 비 동을 독 소 루비의 급속 한 주사 및 주입 지속 출시 펠 릿 aprotinin 요도 떠들고 효소를 억제 하는 것을 포함 하 여 실험적인 신 증후군의 유도 시연 발 분석 결과와 측정 된 활동입니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
여기, retrobulbar 공동 주입을 통해 독 소 루비 주입 실험 증 증후군 혈, hypoalbumenia, 나트륨 보유, proteinuria와 129S1/SvImJ 쥐 유도 설명 합니다. 그러나,이 모델을 사용할 때 고려 되어야 하는 두 가지 중요 한 문제가 있다. 첫째, 모델 유도 복용량 의존은 엄격 하 게 하 고 독 소 루비 복용량 작은 0.3 µ g/g의 편차 쥐15의 응답에 영향을. 14 µ g/g 처럼 낮은 복용량과 함께 주입 하면 bw 또는 아…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 독일 연구 재단 (DFG, 아칸소 1092/2-1)에서 교부 금에 의해 지원 되었다.
Materials
| supplies | |||
| BD Micro FINE + U-40 (0.30 mm x 8 mm) | BD Deutschland GmbH, Heidelberg, Germany | PZN: 07468060 | syring |
| ETHILON*II (5/0, 16 mm, 3/8c, 45 cm) | Johnson&Johnson Medical GmbH, Ethicon Deutschland, Norderstedt, Germany) | EH7823H | suture |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| reagents | |||
| aprotinin (6000 KIU/mg) | LOXO, Heidelberg, Germany | CAS 9087-70-1 | |
| Bepanthen, Augen- und Nasensalbe | Bayer Vital GmbH, Leverkusen, Germany | PZN: 1578681 | ointment |
| Chromogenix S-2251 | HAEMOCHROM DIAGNOSTICA GmbH, Essen, Germany | 82 0332 39 | chromogenic substrate |
| doxorubicin (2.0 µg/µL) | Cell Pharm, Bad Vilbel, Germany | CAS 25316-40-9 | doxorubicin |
| isofluran CP (1 mL/mL) | CP-Pharma, Burgdorf, Germany | CAS 26675-46-7 | isofluran |
| pellets with matrix-driven sustained release (custom-made) | Innovative Research of America, Sarasota, FL | X-999 | pellet |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| equipment | |||
| ELx808 Absorbance Mikroplate Reader | BioTek, Bad Friedrichshall, Germany | ELx808 | microplate reader |
| MICROSTERIL – 436 | B.M.S., Trescore Balneario, Italy | GAL/436 | sterilizer |
| Hybridization oven/shaker | GE Healthcare UK Limited, Amersham LIFE SCIENCE, Little Chalfont, UK | RPN 2511 | heat chamber |
| Thermo MAT Pro 10 W, 15×25 cm, Lucky Reptile | Import Export Peter Hoch GmbH, Waldkirch, Germany | 61201 | mouse warming device |
References
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