Appareil pour la récolte de tissus Microcolumns
Summary
Nous décrivons ici un protocole pour la production de la récolte du site aiguilles qui peuvent servir à recueillir des tissus de la peau pleine épaisseur sans causer de donateurs cicatrices. Les aiguilles peuvent être combinés avec un système de collecte simple pour atteindre de gros volumes de récolte.
Abstract
Ce manuscrit décrit le processus de production pour un appareil de laboratoire, fabriqué à partir de composants sur étagère, qui peuvent être utilisés pour recueillir des microcolumns du tissu cutané de pleine épaisseur. La petite taille de le microcolumns permet aux donateurs sites guérir rapidement sans provoquer de donneuse, cicatrices, alors que la récolte pleine épaisseur tissulaire permet l’incorporation de tous les composants cellulaires et extracellulaires du tissu cutané, y compris ceux liée avec les régions cutanées plus profondes et les structures cutanées annexielle, qui doivent encore être reproduit avec succès en utilisant des tissus classiques, techniques d’ingénierie. Le microcolumns peut être appliqué directement sur les plaies de la peau pour augmenter la guérison, ou ils utilisable comme source de cellules/tissus autologues pour autres approches d’ingénierie tissulaire. Les aiguilles de récolte sont faites en modifiant les aiguilles hypodermiques standards et ils peuvent être utilisés seuls pour la récolte de petites quantités de tissu ou couplés à un système de collection axée sur l’aspiration simple (également fait partir de fournitures de laboratoire couramment disponibles) pour grand volume de récolte pour faciliter les études sur des modèles animaux grands.
Introduction
Une greffe de peau autologue est le pilier de cicatrisation, mais il est limité par la rareté du site donneur et de la morbidité, conduisant à des efforts concertés au cours des dernières décennies pour développer de nouvelles options thérapeutiques pour remplacer une greffe de peau classique1,2 . Nous avons récemment mis au point une autre méthode de récolte de la peau afin de valoriser les avantages d’une greffe de peau pleine épaisseur tout en réduisant la morbidité du site donneur. En recueillant la pleine épaisseur peau sous la forme de petites (~0.5 mm de diamètre) « microcolumns », les sites donneurs sont en mesure de guérir rapidement et sans laisser de cicatrices dans des circonstances normales (pour les exceptions possibles, voir la section débat ci-dessous)3. Microcolumns peut être appliqué directement sur la plaie lits pour accélérer la fermeture de la plaie, réduire la contraction3et de restaurer une gamme variée de types de cellules épidermiques et dermiques et des structures fonctionnelles annexielle4, dont la plupart ne manquent pas dans une greffe de peau split-épaisseur classique ou actuelle bioengineered peau substituts5. La capacité de microcolumns pour augmenter la guérison et de leurs sites donneurs pour guérir sans laisser de cicatrices ont tous deux été indépendamment validés par d’autres groupes de recherche6,7.
Nous avons déjà développé un système de récolte de laboratoire pour permettre le regroupement des microcolumns à échelle8; Cependant, ce système est composé de nombreux composants personnalisés qui ne sont pas largement disponibles. Ici, nous décrivons en détail le processus car produisant récolte des aiguilles, ainsi que des systèmes de collecte simple, issus pour la plupart des composants sur étagère, qui peuvent être utilisés pour réaliser de grands volumes de récolte. L’appareil décrit dans ce manuscrit est adapté pour in vitro et travail animale, mais pas pour une utilisation chez l’homme. Un appareil clinique avec autorisation de la FDA pour l’application de cette technique chez l’homme est disponible dans le commerce mais n’est pas abordé en détail ici.
Protocol
Representative Results
Discussion
Les méthodes décrites ici sont destinées à permettre le regroupement des tissus microcolumns en quantité suffisante pour en vivo grandes études animales, utilisant des outils faits de fournitures de laboratoire disponibles dans le commerce. Cet appareil a été utilisé précédemment dans la récolte de tissus excisés de peau humaine4,9 , mais aussi de peau de porcs sur pied3. Les paramètres spécifiques décrits sont ceu…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu en partie par l’armée, marine, NIH, armée de l’Air, VA et Health Affairs pour soutenir l’effort de l’AFIRM II, sous le no Award. W81XWH-13-2-0054. L’activité médicale Acquisition de recherche de l’armée d’États-Unis, 820 Chandler Street, Fort Detrick, MD 21702-5014 est le Bureau d’acquisition attribution et l’administration. Opinions, les interprétations, les conclusions et les recommandations sont celles de l’auteur et ne sont pas nécessairement approuvées par le ministère de la défense.
Materials
| Diamond wheel | Dremel | 545 | |
| Hypodermic needle (19G) | Fisher Scientific | 14-840-98 | Other needle sizes could be used, depending on experimental needs |
| Stome wheel | Dremel | 540 | |
| Syringe (20mL with luer lock) | Fisher Scientific | 22-124-967 | |
| Suction adapter | Tulip Medical | PA20BD | Optional, for high volume harvesting |
| Suction canister | Fisher Scientific | 19-898-212 | Optional, for high volume harvesting. Sterilize before use. |
| Suction tubing | Medline | DYND50216H | Optional, for high volume harvesting |
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