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Un protocollo personalizzabile per String Assembly gRNA clonazione (STAgR)
JoVE 신문
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A Customizable Protocol for String Assembly gRNA Cloning (STAgR)
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Un protocollo personalizzabile per String Assembly gRNA clonazione (STAgR)

DOI:
10.3791/58556-v

•

10:00 min

•

December 26, 2018

•

, , , , ,
1MCN Junior Research Group, Munich Center for Neurosciences,Ludwig Maximilian Universitat, BioMedical Center, 2Institute of Stem Cell Research, Helmholtz Zentrum,German Research Center for Environmental Health, 3Institute of Developmental Genetics, Helmholtz Zentrum,German Research Center for Environmental Health, 4Physiological Genomics,Ludwig Maximilian Universitat, BioMedical Center

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Design of STAgR Cloning Primers with Overhangs
  • 01:22Generation of STAgR Cloning Fragments
  • 03:56Gibson Assembly Reaction and Bacterial Transformation
  • 05:50Selecting STAgR Clones by Bacterial Colony PCR
  • 08:08Results: Analysis of String Assembly gRNA Cloning
  • 09:27Conclusion

Summary

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Qui, presentiamo la stringa Assemblea gRNA clonazione (STAgR), un metodo per multiplex facilmente gRNA vettori per CRISPR/Cas9 si avvicina. STAgR rende gRNA multiplexing semplice, efficiente e personalizzabile.

Tags

CRISPR-Cas9GRNA CloningSTAgRMultiplex GRNAGibson AssemblyDNA TemplatePCRMagnetic BeadsDNA Purification

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