Gravação simultânea de eletrocardiografia e sangue invasiva pressão medida em ratos
Summary
Aqui, descrevemos uma configuração para gravação simultânea do eletrocardiograma e pressão intra-arterial (BP) em ratos experimentais, que podem ser feitos com equipamento padrão em instalações de animais e podem ser aplicados a fisiológicos ou farmacológicos estudos para investigar os mecanismos de patogenicidade ou terapêuticos em medicina cardiovascular.
Abstract
Para estudos relacionados à fisiologia cardiovascular ou fisiopatologia, pressão arterial (PA) e eletrocardiograma são parâmetros básicos observacionais. Pesquisa com foco em modelos de doenças cardiovasculares, alvos terapêuticos cardiovasculares ou agentes farmacêuticos requer a avaliação de mudanças de ritmo arteriais sistêmicas da pressão e coração. Em situações onde os sistemas de telemetria de rádio não são disponíveis ou acessíveis, a técnica de cateterização da artéria femoral é uma maneira alternativa para obter medições de BP sistêmicas e gravações de forma de onda de pressão intra-arterial. Esta técnica é econômica e pode ser realizada com equipamento padrão em instalações de animais. No entanto, gravação de pressão arterial invasiva requer canulação de pequenas artérias, que pode ser uma habilidade cirúrgica desafiador. Aqui, apresentamos protocolos passo a passo para a artéria femoral, procedimentos de cateterização. Procedimentos mais importantes incluem a calibração do sistema de aquisição de dados, canulação de dissecção e artéria femoral de tecido e configuração do sistema para gravação de pressão arterial canulação. Procedimentos de gravação de eletrocardiograma de superfície também estão incluídos. Também apresentamos exemplos de gravações de BP de ratos normotensos e hipertensos. Este protocolo permite gravações diretas confiáveis de BP sistêmica com eletrocardiografia simultânea.
Introduction
Pressão arterial (PA) e eletrocardiograma (ECG) são parâmetros básicos de medicina e fisiologia cardiovascular. Modelos animais experimentais foram aplicados extensamente na pesquisa biomédica para várias doenças cardiovasculares, tais como de insuficiência cardíaca hipertensiva1 e procedimentos para a gravação do ECG e medição de BP pode ser realizada em ratos experimentais.
Existem três métodos para a medição de BP em ratos: canulação intra-arterial (invasiva)2, cauda manguito pletismografia (não invasiva)3e radio telemetria (invasiva). A confiabilidade da medição de BP por pletismografia de braçadeira de cauda pode ser afetada por animal manipulação durante a gravação. Por exemplo, a braçadeira de cauda subestima as alterações de BP de núcleo que ocorrem simultaneamente durante a fases de contenção e medição4. Radiotelemetria é considerada a melhor técnica de “padrão ouro” para monitorização BP e da frequência cardíaca em acordado e movimentando-se livremente animais5. No entanto, desde que o software e hardware de rádio telemetria são caros, canulação intra-arterial é também amplamente utilizada como uma alternativa econômica.
Intra-arterial canulação requer considerável habilidade microcirúrgica mas produz as formas de onda reais da pressão arterial. BP pode ser gravado através de um cateter de solução salina-cheia, inserido na artéria braquial ou radial, femoral. Este método de medição direta de BP invasora requer preparação pré-cirúrgica de animais, anestesia, imobilização dos animais de laboratório, experiência cirúrgica no tecido dissecção e canulação arterial e calibração adequada antes de adquirir a medição .
ECG de superfície roedor é semelhante ao ECG humano. Um rato ECG tem sequências de ondas P e complexos QRS, ondas T, QT intervalos6. A onda P, intervalo PR, complexo QRS e ondas T refletem despolarização atrial, condução do impulso da atrial para o nó AV, ventricular despolarização e repolarização, respectivamente. O intervalo QT é definido como o período compreendido entre o início da onda Q o ponto final da onda T onde ele retorna para o iso-elétrica de base1.
O ECG indica a sístole cardíaca e a diástole fases; Portanto, a gravação simultânea do ECG superfície correlaciona-se com a medição invasiva da BP. Usando uma combinação de metodologias, é possível elucidar alterações fisiopatológicas em um modelo de doença ou os efeitos farmacológicos de uma droga ou terapia em medicina cardiovascular.
Uma cepa de rato (SHR) hipertensos espontâneos tinha sido obtida por endogamia de ratos Wistar com BP alta no Japão. A BP sobe de 5 para 10 semanas de idade e se torna estacionária de 30 a 35 semanas de idade7. Ratos Wistar-Kyoto (WKY) tem cerca de 130 mmHg7 pressão sistólica e são comumente usados como normo-tensive controle. Nós costumávamos SHR e WKY para demonstrar o resultado da gravação de cateterização intra-arterial BP e ECG.
Protocol
Representative Results
Discussion
Canulação arterial invasiva permite uma medição altamente precisa de BP. Isso pode ser feito com um tubo de PE, sem a necessidade de um cateter de caro. Medição invasiva BP também pode ser executada simultaneamente com uma gravação do ECG de superfície.
A grande curva de aprendizado para este método é a habilidade experimental necessária para Canule pequenos vasos sanguíneos. Em mãos experientes, a taxa de sucesso para cateterização da artéria femoral pode aproximar de 100%. …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este estudo foi suportado por Taiwan Ministério da ciência e tecnologia concede mais 104-2314-B-037-080-MY3 e mais 107-2314-B-037-110 para HCL e institutos de pesquisa de saúde nacional Taiwan conceder INDH-EX107-10724SC.
Materials
| Polyethylene tube | BECTON DICKINSON | 427401 | internal diameter of 0.5 mm, outer diameter of 0.9 mm |
| 26G x 1/2"" needle | TERUMO | 160426D | |
| Adson Forceps | TOP Line | 12-540 | 12 cm (4.75") Long, Straight, 1 x 2 Teeth |
| Bulldog vascular clamp | Teleflex | 357581 | 8 mm |
| Computer | AUSUS | X453M | |
| Exernal analog signal recording device | iWorx | T5141538 | This allows the recording of up to three channels of ECG, EMG or EEG as well as GSR (skin conductance) from a single iWire input on the recording Module. |
| Graefe Forceps | AESCULAP Surgical Instruments | BD312R | MICRO DRESSING FORCEPS, CURVED, SERRATED, 105 mm, 4 1/8 |
| Mecury sphygmomanometer | Spirit | CK-101 | |
| Pressure transducer | iWorx | IworxBP100 | |
| Semken Forceps | MEDE TECHNIK | 10-104 | 100 mm |
| Software | LabScribe3 | ||
| Surgical scissors | HEBU | 1714 | 14.5 cm long |
| Syringe (1 mL) | TERUMO | 160426D | |
| Three-way stopcocks | Cole-Parmer | EW-30600-23 | |
| Tipped forceps | World Precision Instruments | 504506 | 11 cm long, 0.1×0.06 mm Tips |
| Vannas Scissors | World Precision Instruments | 500086 | 8.5 cm long, Straight, 0.025 x 0.015 mm Tips, 7mm super fine Blades |
References
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