Dang humması virüs kaynaklı akut viral Ensefalitis-benzeri hastalık bir Murine modeli
Summary
Burada, nöropati gelişimini görüntülemek için bir immünopetik ıCR (Kanser Araştırma Enstitüsü) merkezi sinir sistemi enfeksiyonu murine modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Akut viral ensefalitik bozuklukların aynı hastalık puanları ile izlenmesi, Dang virüse bağlı nöropati içinde vivo göstermek için gerçekleştirilebilir.
Abstract
Ritim virüsü (DENV), sivrisinekler tarafından iletilen bir artthropod kaynaklı virüs,, plazma kaçağı nedeniyle ölümcül komplikasyonlar ile karakterize Dang Hemorajik ateş olarak bilinen şiddetli hastalığa neden olabilir, asit, plevral efüzyon, solunum sıkıntısı, şiddetli kanama ve organ bozukluğu. DENV enfeksiyonu birkaç olgu nörolojik belirtiler mevcut; Ancak çalışmalar DENV kaynaklı neuropathogenesis ‘i daha fazla araştırmadı. Bu çalışmada, orta sinir sistemi (CNS) enfeksiyonu ile DENV indüksiyonu araştırılması için immünoteksel bir outbred ıCR (kanser araştırması Enstitüsü) fare kullanmak için bir protokol sunuyoruz, akut viral ensefalitis gibi progresyon takip Hastalığı.
Introduction
Flaviviridae ailesinin bir artthropod kaynaklı virüsü olan denv, üç viral yapısal proteini (capsid, premembran ve zarf) ve yedi viral yapısal olmayan PROTEINLERE (ns1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B) kodlayan pozıtıf anlamda RNA genomu içerir. ve NS5). Denv dört serotipleri (DENV1-4), hangi yaklaşık 390.000.000 kişi yıllık enfekte, hükümetler sivrisinek vektör ve hastalık kontrolü doğru önemli çabaları yönetmiş olsa bile küresel bir yük neden1. Şu anda, koruyucu aşılar ve terapötik antiviral ilaçlar geliştirilmesi altında ve daha uzun vadeli doğrulama gerektirir2. Klinik uygulamada, CNS enfeksiyonu olan bir Dang hastasıyla nadir olmasına rağmen, Dang hastalığı gelişiminin çeşitliliğini anlamak için daha fazla incelenmesi gerekir3. Daha fazla soruşturma ve doğrulama gereklidir; Özellikle, Dünya Sağlık Örgütü (WHO) ciddi Dang ‘ın sınıflandırılmasında, bilişsel bozukluk, konvülsiyonlar, ensefalopati ve ensefalit gibi CNS bozukluğu katılımı dahil etti3,4. Denv enfeksiyonunun hayvan modellerini inşa etmek, DENV enfeksiyonu neuropathogenesis keşfetmek için vazgeçilmez.
Denv tarafından cns enfeksiyonu oluşturmak için, çeşitli çalışmalar denv enfeksiyon farklı yollar idam, dahil olmak üzere (1) C57BL/6 fareler intraserebral aşı 4 x 103 plak şekillendirme birimleri (PFU) adapte olmayan DENV35, 6, (2) alınan Balb/c fareler intraperitoneal inokülasyon 7 x 104 PFU in vitro nörouyarlanmış DENV47, (3) alınan İsviçre fareler intraserebral aşı 1 x 105 PFU In vivo nörouyarlanmış DENV18, ve (4) 1 x 106 PFU ‘ya adapte olmayan DENV29‘ u alan ICR Suckling fareler intrakerebral ve intraperitoneal Co-inoculation. Bu çalışmaların bulgularınagöre5,6,7,8,9, farelerde denv enfeksiyonu beyin viral çoğaltma sonucu, akut viral yol ensefalit benzeri sendromlar, ekstremite felç ve postural istikrarsızlık, CNS nörotoksisite ve inflamasyon, genel ve lokalize plazma sızıntısı ile kan-beyin bariyeri (BBB), ve hırıllık eşliğinde davranışsal değişiklikler. Bu çalışmaların tüm sonuçları5,6,7,8,9 denv ‘in CNS ve akut viral ensefalitis gibi indüksiyon enfekte yeteneği göstermiştir enfeksiyon aşağıdaki hastalık.
Mevcut bulgularımıza dayanarak9,10,11,12,13,14,15, biz bir in vivo olarak denv enfeksiyon bir murine modeli oluşturduk Platform/faktörler viral çoğaltma karşı hedeflenen ajanlar terapötik etkinliğini incelemek için, yanı sıra nörotoksisite. Burada, CNS enfeksiyonunu incelemek ve DENV ‘in neden olduğu farklı önem dereceleri ile nöropatilerin gelişimini izlemek için immünoptikli bir outbred ıCR Mouse oluşturmak için kullanılan protokolü rapor ediyoruz. Sonuçları zaman bağımlı bir şekilde DENV-enfekte fareler ensefalit benzeri hastalığın önemli progresyonu gösterir.
Protocol
Representative Results
Discussion
Şiddetli Dang hastalığı hastalarının CNS ‘inde denv enfeksiyonu tespit edilmiştir3,17, Dang patogenezi sırasında akut viral ensefalitin tezahürü olasılığını düşündürmektedir. Burada, özellikle DENV kaynaklı akut viral ensefalitis benzeri hastalıklara odaklanarak, şiddetli Dang CNS disfonksiyonunun katılımı ile ilgili olarak DENV enfeksiyonunun bir in vivo murine modelini bildiriyoruz. Önceki modeller ile karşılaştırıldığında, ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışmada bilim ve Teknoloji Bakanlığı (MOST107-2321-B-038-001) ve Intramural finansman 106TMU-CIT-01-2, Taipei, Tayvan hibe tarafından desteklenmektedir.
Materials
| Roswell Park Memorial Institute 1640 medium (RPMI) | Gibco | 11875-085 | Diluting virus |
| 0.3-mL Insulin Syringe | BD Ultra-FineII | 328838 | Intracerebral and intraperitoneal injection |
| Microbalance | METTLER TOLEDO's LabX | AL104 | Weight mouse |
| Non-adapted DENV2 (strain PL046) | The Centers for Disease Control of Taiwan | – | Infect mouse |
| Institute of Cancer Research (ICR) suckling mouse | BioLASCO Taiwan Co., Ltd | – | Our murine model |
References
- Guzman, M. G., Gubler, D. J., Izquierdo, A., Martinez, E., Halstead, S. B. Dengue infection. Nature Reviews Disease Primers. 2, 16055 (2016).
- Katzelnick, L. C., Coloma, J., Harris, E. Dengue: knowledge gaps, unmet needs, and research priorities. Lancet Infectious Diseases. 17 (3), e88-e100 (2017).
- Carod-Artal, F. J., Wichmann, O., Farrar, J., Gascon, J. Neurological complications of dengue virus infection. Lancet Neurology. 12 (9), 906-919 (2013).
- Geneva: World Health Organization. . Dengue: Guidelines for Diagnosis, Treatment, Prevention and Control: New Edition. , (2009).
- Amaral, D. C., et al. Intracerebral infection with dengue-3 virus induces meningoencephalitis and behavioral changes that precede lethality in mice. Journal of Neuroinflammation. 8, 23 (2011).
- de Miranda, A. S., et al. Dengue-3 encephalitis promotes anxiety-like behavior in mice. Behavioural Brain Research. 230 (1), 237-242 (2012).
- Velandia-Romero, M. L., Acosta-Losada, O., Castellanos, J. E. In vivo infection by a neuroinvasive neurovirulent dengue virus. Journal of Neurovirology. 18 (5), 374-387 (2012).
- Despres, P., Frenkiel, M. P., Ceccaldi, P. E., Duarte Dos Santos, C., Deubel, V. Apoptosis in the mouse central nervous system in response to infection with mouse-neurovirulent dengue viruses. Journal of Virology. 72 (1), 823-829 (1998).
- Tsai, T. T., et al. Microglia retard dengue virus-induced acute viral encephalitis. Scientific Reports. 6, 27670 (2016).
- Cheng, Y. L., et al. Activation of Nrf2 by the dengue virus causes an increase in CLEC5A, which enhances TNF-alpha production by mononuclear phagocytes. Scientific Reports. 6, 32000 (2016).
- Ho, M. R., et al. Blockade of dengue virus infection and viral cytotoxicity in neuronal cells in vitro and in vivo by targeting endocytic pathways. Scientific Reports. 7 (1), 6910 (2017).
- Jhan, M. K., et al. Anti-TNF-alpha restricts dengue virus-induced neuropathy. Journal of Leukocyte Biology. 104 (5), 961-968 (2018).
- Kao, J. C., et al. The antiparasitic drug niclosamide inhibits dengue virus infection by interfering with endosomal acidification independent of mTOR. PLoS Neglected Tropical Diseases. 12 (8), e0006715 (2018).
- Tsai, T. T., Chen, C. L., Tsai, C. C., Lin, C. F. Targeting heat shock factor 1 as an antiviral strategy against dengue virus replication in vitro and in vivo. Antiviral Research. 145, 44-53 (2017).
- Jhan, M. K., et al. Dengue virus infection increases microglial cell migration. Scientific Reports. 7 (1), 91 (2017).
- Benskey, M. J., Manfredsson, F. P. Intraparenchymal Stereotaxic Delivery of rAAV and Special Considerations in Vector Handling. Methods in Molecular Biology. , 199-215 (2016).
- Fong, C. Y., et al. Mild encephalitis/encephalopathy with reversible splenial lesion (MERS) due to dengue virus. Journal of Clinical Neuroscience. 36, 73-75 (2017).
- Sarathy, V. V., et al. A lethal murine infection model for dengue virus 3 in AG129 mice deficient in type I and II interferon receptors leads to systemic disease. Journal of Virology. 89 (2), 1254-1266 (2015).
- Schul, W., Liu, W., Xu, H. Y., Flamand, M., Vasudevan, S. G. A dengue fever viremia model in mice shows reduction in viral replication and suppression of the inflammatory response after treatment with antiviral drugs. The Journal of Infectious Diseases. 195 (5), 665-674 (2007).
- Tyler, K. L. Acute Viral Encephalitis. New England Journal of Medicine. 379 (6), 557-566 (2018).
- Yauch, L. E., Shresta, S. Mouse models of dengue virus infection and disease. Antiviral Research. 80 (2), 87-93 (2008).
- Assir, M. Z., Jawa, A., Ahmed, H. I. Expanded dengue syndrome: subacute thyroiditis and intracerebral hemorrhage. BMC Infectious Diseases. 12, 240 (2012).
- Kumar, R., Prakash, O., Sharma, B. S. Intracranial hemorrhage in dengue fever: management and outcome: a series of 5 cases and review of literature. Surgical Neurology. 72 (4), 429-433 (2009).
- Simanjuntak, Y., Liang, J. J., Lee, Y. L., Lin, Y. L. Repurposing of prochlorperazine for use against dengue virus infection. Journal of Infectious Diseases. 211 (3), 394-404 (2015).
- Rocha, B. A. M., et al. Dengue-specific serotype related to clinical severity during the 2012/2013 epidemic in centre of Brazil. Infectious Disease Poverty. 6 (1), 116 (2017).
