우리는 쥐에 있는 과잉 훈련 그리고 공포 잠양을 생성하는 확장된 공포 조정 프로토콜을 기술합니다. 이 프로토콜은 25톤 쇼크 페어링(즉, 과잉 교육)과 조건부 동결 응답의 비교와 함께 단일 교육 세션을 수반하며, 문맥 및 큐 테스트 중 48h(단기) 및 6주(장기)를 훈련후 수반합니다.
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이 논문에서
요약
초록
정서적 기억은 주로 공포 조절 패러다임으로 연구되었습니다. 공포 컨디셔닝은 개인이 역경 사건과 그렇지 않으면 중립적 인 자극 사이의 관계를 배울 수있는 학습의 한 형태입니다. 정서적 기억을 공부하기 위한 가장 널리 이용된 절차는 쥐에 있는 공포 조정을 수반합니다. 이러한 작업에서, 무조건 자극 (미국)은 단일 또는 여러 세션에서 한 번 또는 여러 번 제시 된 풋 쇼크이며, 조건부 응답 (CR)은 동결된다. 이러한 절차의 버전에서, 라는 cued 공포 컨디셔닝, 톤 (조건된 자극, CS) 풋 쇼크와 쌍 (미국) 훈련 단계 동안. 첫 번째 테스트 중에 동물은 훈련이 일어난 것과 동일한 컨텍스트에 노출되며, 발충격과 톤이 없는 경우 동결 응답이 테스트됩니다(예: 컨텍스트 테스트). 두 번째 시험 동안, 동결은 문맥이 변경될 때 측정되며(예를 들어, 실험 챔버의 냄새와 벽을 조작하여) 발충격(즉, 큐 테스트)이 없는 상태에서 톤이 제시된다. 대부분의 공포 컨디셔닝 절차는 몇 가지 톤 쇼크 페어링을 수반한다 (예를 들어, 단일 세션에서 1-3 시험). 공포 인큐베이션 (즉, 공포 응답은 역경 이벤트 또는 조건된 자극에 추가 노출없이 시간이 지남에 따라 증가)라는 오래 지속되는 효과와 관련된 광범위한 수의 페어링 (즉, 과잉 교육)과 관련된 덜 일반적인 버전에 대한 관심이 증가하고 있습니다. 확장된 공포 컨디셔닝 작업은 다른 심리적 현상(예: 외상 후 스트레스 장애)과의 관계를 포함하여 두려움 잠복기의 행동 및 신경 생물학적 측면의 이해에 핵심이 되었습니다. 여기에서, 우리는 쥐에 있는 과잉 훈련 그리고 공포 잠양을 생성하는 확장한 공포 조정 프로토콜을 기술합니다. 이 프로토콜은 25톤 쇼크 페어링(즉, 과잉 교육)과 조건부 동결 응답의 비교와 함께 단일 교육 세션을 수반하며, 문맥 및 큐 테스트 중 48h(단기) 및 6주(장기)를 훈련후 수반합니다.
서론
메모리는 정보 수집, 통합(획득된 정보의 안정성 허용) 및 검색(통합 프로세스에 대한 증거) 등 다양한 단계를 포괄하는 심리과정입니다. 통합 단계에서는 새로운 시냅스 연결의 구축과 기존 연결 수정이 발생합니다. 이것은 이러한 변화에 대한 책임이있는 분자 및 생리적 사건이1,2에서발생하는 기간 동안의필요성을시사한다. 이러한 생리적 또는 분자 변화는 검색된 이벤트가 감정적으로 충전되는지 여부에 따라 달라집니다(즉, 정서적 기억). 예를 들어, 연구에 따르면 측면 핵 및 바소포측 편도체 복합체는 정서적 기억3,,4,5와5특히 관련이 있는 것으로 나타났다.
정서적 기억 현상은 주로 공포 컨디셔닝 패러다임5,,6로연구되었습니다. 공포 컨디셔닝은 개인이 역경 사건과 그렇지 않으면 중립적 인 자극7....
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프로토콜
다음 프로토콜은 Fundación Universitaria 콘라드 로렌츠 (IACUC-KL)의 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었다. 국제동물권연맹(1989년)이 발행한 동물권 의 보편적 선언과 ICLAS가 발행한 동물 실험의 윤리적 원칙이 존중되었다.
1. 주제 준비
- 남성 성인 위스타 쥐(n = 12)를 선택합니다. 교육 및 테스트 프로토콜이 시작되기 전에 3 일간의 적응을 위해 케이지 당 4 명으로 구성된 그룹으로 보관하십시오. 실험 기간 내내 쥐에게 물을 무료로 이용할 수 있도록 하십시오. 12h 의 밝은 어두운 주기 (07:00 h에서 켜진 조명)에서 20 °C에서 25 °C 사이의 실온을 제어하십시오.
참고 : 쥐 균주는 공포 컨디셔닝 중에 차등 성능을 보였다. 예를 들어, Schaap et al. (2013)는 Wistar와 루이스 균주가 폰 후드와 브라운 노르웨이 쥐12에비해 동결 행동의 더 긴 기간을 보였다고보고했다. 따라서 통증과 열 임계값의 차이는 충격의 강도와 지속 시간을 조정하기 위해 평가되어야합니다. - 매일 같은 시간에 제한된 음식 접근을 제공함으로써 쥐를 무상 급식 무게 (350-400g 사이의 정상 체중)에서 85 %로 유지....
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결과
트레이닝 세션의 상이한 단계에서 동결 시간의 백분율의 변화는 부양t 테스트(표1)를사용하여 모든 과목(n=12)에 대해 분석하였다. 동물은 훈련 세션의 첫 3 분 동안 실험 챔버를 탐색하고 (프로토콜의 첫 날), 어떤 톤이나 충격이 전달되지 않는 시간 (즉, 기준선-BL). 도 2A에도시된 바와 같이, 후속 25톤 쇼크페어링(M = 48.88) 동안 동결 시간의 백분율; SE = 4.37)은BL(M = 14.65) 동안보다 현저히 높았다. SE = 4.05), 이는 공포 획득의 표시로 가정된다.
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토론
현재 확장된 공포 조절 프로토콜은 짧고(48시간) 및 장기 기간(6주)에 걸쳐 정서적 기억을 평가하는 효율적이고 타당한 방법입니다. 따라서, 프로토콜은 쥐에 있는 과잉 훈련 및 공포 잠복기 현상을 공부할 수 있습니다. 이 프로토콜의 다른 장점 중 에는 다음과 같습니다. 컨텍스트 및 큐 조작에 걸쳐 두 지연(48시간 및 6주)의 차등 효과를 식별할 수 있는 두 가지 유형의 메모리 테스트(즉 컨텍스트 및 큐)를 제공합니다. 둘째, 이 작업은 28분 간의 교육 세션을 수반하며, 이는 몇 주 연장되는 장기적인 효과를 생성합니다. 이 장점은 확장 된 공포 컨디셔닝의 일부 버전이 훈련11의10 세션에서 적어도 100 충격이 필요하다는 점을 고려하면 놀랍습니다. 셋째, 프로토콜은 자동으로 계산되는 몇 가지 측정 대안을 제공합니다. 또한, 정서적 기억 현상을 평가하기 위한 이 패러다임의 타당성을 뒷받침하는 약리학, 생리학적 및 해부학적 증거가 탑재되어 있다15,
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공개 사항
저자는 공개 할 것이 없습니다.
감사의 글
이 연구에 대한 재정 지원은 Fundación Universitaria 콘라드 로렌츠에 의해 제공되었다 - 보조금 번호 9IN15151. 저자는 콘라드 로렌츠 대학의 커뮤니케이션 부서에 비디오, 특히 나탈리아 리베라와 안드레스 세라노 (프로듀서)를 녹화하고 편집하는 데 도움을 주셔서 감사합니다. 또한, 니콜 프폴러-사도프스키와 루시아 메디나는 원고에 대한 자신의 의견에 대한, 요한나 바레로, 코포라시온 대학 이베로 아메리카나에서 딘, 제도적 협력을 위해. 저자는 이해상충이 없습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 아세트산(에탄산) | https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/acetic_acid | ||
| 혐오자극 전류 패키지 | MED Associates Inc | ENV-420 | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| Contextual test protocol.pro | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| Cue test protocol.pro | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| 곡선형 벽 삽입 | MED Associates Inc | VFC-008-CWI | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| 데이터 processing.zip | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| NIR/백색광 제어 박스 | MED Associates Inc | NIR-100 | |
| 퀵 체인지 MED | Associates Inc | ENV-005FPU-M | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| 소형 테이블탑 캐비닛 및 전원 공급 장치 | MED Associates Inc | SG-6080D | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| 독립형 혐오 자극기/스크램블러 (115 V / 60 Hz) | MED Associates Inc | ENV-414S | https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ |
| 표준 공포 조절 챔버 | MED Associates Inc | VFC-008 | |
| https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/ | http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ | ||
| Rat | MED Associates Inc | 교육 프로토콜MED-VFC-SCT-R |
참고문헌
- Frankland, P. W., Bontempi, B. The organization of recent and remote memories. Nature Reviews Neuroscience. 6 (2), 119-130 (2005).
- Suzuki, A., Mukawa, T., Tsukagoshi, A., Frankland, P. W., Kida, S. Activation of LVGCCs and CB1 receptors requi....
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재인쇄 및 허가
