전기 자극에 의한 쥐에 급성 폰틴 경색 의 설립
Summary
여기에 제시된 것은 단일 펄스로 전기 자극을 통해 쥐 모델에서 급성 pontine 경색을 확립하기 위한 프로토콜이다.
Abstract
Pontine 경색은 후방 순환에서 가장 흔한 뇌졸중 하위 형이며, 퐁틴 경색을 모방한 설치류 모델이 부족합니다. 여기에 급성 pontine 경색의 쥐 모델을 성공적으로 확립하기위한 프로토콜이 제공됩니다. 약 250g의 쥐가 사용되고, 절연 칼집이 있는 프로브는 스테레오탁스 장치를 사용하여 폰에 주입된다. 병변은 단일 펄스로 전기 자극에 의해 생성됩니다. Longa 점수, 베르더슨 점수 및 빔 밸런스 테스트는 신경 학적 적자를 평가하는 데 사용됩니다. 또한, 접착제 제거 소종 감각 시험은 감각 운동 기능을 결정하는 데 사용되며, 사지 배치 테스트는 프로리오셉션을 평가하는 데 사용된다. MRI 검사는 생체 내경을 평가하는 데 사용되며, TTC 염색은 시험관내 경색을 확인하는 데 사용된다. 여기서, 성공적인 경색은 로스트랄 폰의 전방 기초에 있는 것을 확인한다. 결론적으로, 급성 폰틴 경색 쥐 모델을 확립하는 새로운 방법이 설명된다.
Introduction
1980년대 부터 실리콘 필라멘트에 의해 유도된 중대뇌 동맥 폐색(MCAO) 모델은 기본 뇌졸중 연구1에서널리 사용되고 있다. 다른 방법(즉, MCA2 및 광화학적으로 유도된 초점 경색의 한 가지의 봉합)도 사용되어 왔다. 이 모형은 MCA 기지를 둔 치기 모형이라고 불려지고 크게 근본적인 치기 및 잠재적인 치료치료의 병리학 적인 기계장치의 조사에 기여했습니다. 이러한 실험모델3,,4의한계가 있지만, 이러한 방법은 많은 실험실5,,6을사용하였다. MCA 기반 스트로크 모델은 전방 순환에서 스트로크를 나타냅니다. 그러나, 몇몇 보고는 후방 순환7에서치기를 모방하는 모형을 조사했습니다.
병인학, 메커니즘, 임상 증상 및 전방 및 후방 순환 뇌졸중 사이의 예후8사이에는 유의한 차이가 있다. 따라서 전방 순환 스트로크 모델에서 파생된 결과는 후방 순환 스트로크에 적용할 수 없습니다. 예를 들어, 전방 순환을 위한 재관류 시간 창이 6h로 연장되었으며, 영상 연구 결과에 기초하여 24h로 확장되는 연구의 작은 부분이9. 그러나, 후방 순환을 위한 시간 창은 이전 보고10 및 우리 자신의 임상 경험에 따르면, 24 시간 이상일 지도 모릅니다. 이 긴 재관류 시간 창은 실험 모델에서 더 연구되고 확인되어야합니다.
후방 순환 스트로크에 관해서는, pontine 경색은 가장 일반적인 하위 형이며, 모든 허혈성 뇌졸중 사례11,,12의7 %를 차지합니다. 경색 지형에 따르면, pontine 경색은 고립되고 비 격리된 퐁틴경색(13)으로나뉩니다. 고립 된 pontine 경색은 근본적인 기계장치에 근거를 둔 3개의 모형으로 분류됩니다: 큰 동맥 질병 (LAD), 바실라 동맥 분기 질병 (BABD), 및 작은 동맥 질병 (SAD). 폰틴 경색의 메커니즘, 표현 및 예후에 대한 지식은14건의임상 조사에서 파생되었다. 그러나, pontine 경색을 모방 설치류 모델은 덜 조사되었습니다.
이전 연구에서는 폰과 관련된 확산 뇌간 테그멘텀 손상이7을탐구했습니다. 한 그룹은 바실라 동맥(BA)15의결찰을 통해 퐁틴 경색 모델을 만들려고 시도했다. 또 다른 그룹은 10-0 나일론 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 근위 BA의 4점을 선택적으로16으로선택적으로 리게이트하였다. 이 모델은 LAD를 모방하지만 대부분의 pontine 경색은 BABD와 SAD에서 발생합니다. 또한, BA의 선택적 결찰은 복잡한 수술이며 사망률이 높다.
여기에 제공 전기 자극에 의해 급성 pontine 경색의 수행하기 쉽고, 쉽게 재현하고, 성공적인 쥐 모델에 대한 자세한 프로토콜이 제공됩니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
본 연구는 급성 폰틴 경색 쥐 모델을 생성하기 위한 프로토콜을 제공한다. 이 모델은 폰틴 뇌졸중 환자의 예후 및 재활 (뇌졸중 후 만성 통증 포함)에 대한 연구에 사용할 수 있습니다.
이 방법에는 몇 가지 강점이 있습니다. 첫째, 향후 연구를 위한 급성 폰틴 경색의 쥐 모델을 제공한다. 위에서 언급했듯이, pontine 경색은 덜 주의를 받은 일반적인 뇌졸중 하위 형입니다. 뇌졸중…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 중국 국립 과학 재단(81471181 및 81870933)이 Y. Jiang과 중국 국립 과학 재단(81601011호), 장쑤성 자연과학 재단(No. BK20160345) J. 주와 광저우 시보건위원회(20191A011083)의 과학 프로그램을 Z. Qiu에 제출합니다.
Materials
| 4-0 sucture | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Animal anesthesia system | RWD | Wear mask when using the system | |
| Bone cement | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Cured clamp | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| General tissue scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
| Isoflurane | RWD | 217181101 | |
| Lesion Making Device | Shanghai Yuyan | Making a lesion | |
| MRI system | Bruker Biospin | Confirmation of infarction in vivo | |
| Needle holder | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
| Probe | Anke | Need some modification | |
| Q-tips | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Stereotaxic apparatus | RWD | ||
| Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| TTC | Sigma-Aldrich | BCBW5177 | For infarction confirmation in vitro |
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