Establecimiento del Infarto Pontino Agudo en Ratas por Estimulación Eléctrica
Summary
Aquí se presenta un protocolo para establecer infarto agudo de pontina en un modelo de rata a través de la estimulación eléctrica con un solo pulso.
Abstract
El infarto de pontina es el subtipo de trazo más común en la circulación posterior, mientras que carece de un modelo de roedores que imita el infarto pontino. Aquí se proporciona un protocolo para establecer con éxito un modelo de rata de infarto pontino agudo. Se utilizan ratas que pesan alrededor de 250 g, y se inyecta una sonda con una vaina aislada en los pons utilizando un aparato estereotaxico. Una lesión es producida por la estimulación eléctrica con un solo pulso. La puntuación de Longa, la puntuación de Berderson y la prueba de balance de haz se utilizan para evaluar los déficits neurológicos. Además, la prueba somatosensorial de eliminación de adhesivo se utiliza para determinar la función sensorimotor, y la prueba de colocación de las extremidades se utiliza para evaluar la propriocepción. Las resonancias magnéticas se utilizan para evaluar el infarto in vivo, y la tinción TTC se utiliza para confirmar el infarto in vitro. Aquí, se identifica un infarto exitoso que se encuentra en la base anterolateral de los pons rostrales. En conclusión, se describe un nuevo método para establecer un modelo agudo de rata de infarto pontino.
Introduction
Desde la década de 1980, el modelo de oclusión de la arteria cerebral media (MCAO) inducido por filamentos de silicona ha sido ampliamente utilizado en la investigación básica del accidente cerebrovascular1. También se han utilizado otros métodos (es decir, la sutura de una rama del MCA2 y el infarto focal inducido fotoquímicamente). Estos modelos han sido llamados modelos de accidente cerebrovascular basados en MCA y han contribuido en gran medida a las investigaciones de los mecanismos fisiopatológicos subyacentes al accidente cerebrovascular y las posibles terapias. Aunque hay limitaciones de estos modelos experimentales3,,4, estos métodos se han utilizado muchos laboratorios5,6. Los modelos de trazo basados en MCA representan un trazo en la circulación anterior; sin embargo, pocos informes han investigado modelos que imitan el trazo en la circulación posterior7.
Hay diferencias significativas entre la etiología, los mecanismos, la manifestación clínica y el pronóstico entre los accidentes cerebrovasculares de circulación anterior y posterior8. Por lo tanto, los resultados derivados de los modelos de carrera de circulación anterior no se pueden aplicar a la carrera de circulación posterior. Por ejemplo, la ventana de tiempo de reperfusión para la circulación anterior se ha ampliado a 6 h, con una pequeña porción de estudios que se extiende a 24 h sobre la base de los hallazgos de imágenes9. Sin embargo, el plazo para la circulación posterior puede ser superior a 24 h, según informes anteriores10 y nuestras propias experiencias clínicas. Esta ventana de tiempo de reperfusión alargada debe estudiarse y confirmarse en modelos experimentales.
En cuanto a los trazos de circulación posterior, el infarto pontino es el subtipo más común, representando el 7% de todos los casos de accidente cerebrovascular isquémico11,,12. Según la topografía del infarto, los infartos pontinos se dividen en infartos pontinos aislados y no aislados13. Los infartos pontinos aislados se clasifican en tres tipos basados en los mecanismos subyacentes: enfermedad arterial grande (LAD), enfermedad de la rama de la arteria basilar (BABD) y enfermedad de las arterias pequeñas (SAD). El conocimiento de los mecanismos, manifestación y pronóstico del infarto pontino se ha derivado de investigaciones clínicas de los casos14. Sin embargo, un modelo de roedores que imita el infarto pontino ha sido menos investigado.
En estudios anteriores, se ha explorado la lesión difusa del tronco cerebral tegmentum que afecta a los pons7. Un grupo intentó crear un modelo de infarto pontino a través de la ligadura de la arteria basilar (BA)15. Otro grupo utilizó una sutura monofilamento de nylon 10-0 para ligar selectivamente cuatro puntos de la BA proximal selectivamente16. Este modelo imita LAD, pero la mayoría de las infartos pontinas son el resultado de BABD y SAD. Además, la ligadura selectiva de la BA es una cirugía complicada y tiene una alta tasa de mortalidad.
Aquí se proporciona un protocolo detallado para un modelo de rata fácil de realizar, fácil de reproducir y exitoso de infarto pontino agudo por estimulación eléctrica.
Protocol
Representative Results
Discussion
El presente estudio proporciona un protocolo para generar un modelo agudo de rata de infarto pontino. Este modelo se puede utilizar para la investigación sobre el pronóstico y la rehabilitación (incluyendo dolor crónico post-accidente cerebrovascular) en pacientes con accidente cerebrovascular pontino.
Hay varios puntos fuertes de este método. En primer lugar, proporciona un modelo de rata de infarto pontino agudo para futuros estudios. Como se mencionó anteriormente, el infarto de ponti…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este estudio fue apoyado financieramente por la National Science Foundation of China (81471181 y 81870933) a Y. Jiang y la National Science Foundation of China (No 81601011), Natural Science Foundation of Jiangsu Province (No. BK20160345) a J. Zhu y por el Programa Científico de la Comisión Municipal de Salud de Guangzhou (20191A011083) a Z. Qiu.
Materials
| 4-0 sucture | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Adhesive tape | Shanghai Jinzhong | Surgical instruments | |
| Animal anesthesia system | RWD | Wear mask when using the system | |
| Bone cement | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Cured clamp | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| General tissue scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| IndoPhors | Guoyao of China | Sterilization | |
| Isoflurane | RWD | 217181101 | |
| Lesion Making Device | Shanghai Yuyan | Making a lesion | |
| MRI system | Bruker Biospin | Confirmation of infarction in vivo | |
| Needle holder | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Penicilin | Guoyao of China | Infection Prevention | |
| Probe | Anke | Need some modification | |
| Q-tips | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Shearing scissors | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Stereotaxic apparatus | RWD | ||
| Suture needle | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| Tissue holding forcepts | Shanghai Jinzhong | Surgical instrument | |
| TTC | Sigma-Aldrich | BCBW5177 | For infarction confirmation in vitro |
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