Isolating Myofibrils from Skeletal Muscle Biopsies and Determining Contractile Function with a Nano-Newton Resolution Force Transducer

Martijn van de Locht; Josine  M. de Winter; Dilson E. Rassier; Michiel H.B. Helmes; Coen  A.C. Ottenheijm

doi:10.3791/61002

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Isoler les myofibrils des biopsies des muscles squelettiques et déterminer la fonction contractile avec un transducteur de force de résolution nano-newton

JoVE 신문
생물학

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JoVE 신문 생물학

Isolating Myofibrils from Skeletal Muscle Biopsies and Determining Contractile Function with a Nano-Newton Resolution Force Transducer

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Isoler les myofibrils des biopsies des muscles squelettiques et déterminer la fonction contractile avec un transducteur de force de résolution nano-newton

DOI:

10.3791/61002-v

•

07:55 min

•

May 07, 2020

•

Martijn van de Locht, Josine M. de Winter, Dilson E. Rassier, Michiel H.B. Helmes³, Coen A.C. Ottenheijm

¹Department of Physiology,Amsterdam UMC, ²Department of Kinesiology and Physical Education, Faculty of Education,McGill University, ³IONOptix BV

Chapters

00:04Introduction
00:50Myofibril and Mounting Needle Preparation
02:08Experiment Initialization
04:03Tension Redevelopment Rate Measurement
05:04Stepwise Stretch
05:33Results: Representative Active and Passive Tension Analyses
07:03Conclusion

Summary

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Présenté ici est un protocole pour évaluer les propriétés contractiles des myofibrils musculaires striés avec la résolution nano-Newton. Le protocole utilise une configuration avec une sonde de force optique basée sur l’interférométrie. Cette configuration génère des données avec un rapport signal/bruit élevé et permet d’évaluer la cinétique contractile des myofibrils.

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L'identification des cibles de microARN humaine avec le système LightSwitch Luciferase Assay utilisant 3'UTR-reporter Construit et un microARN dans les cellules adhérentes Mimic

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