Forskellige dyremodeller af medfødt membran brok og føtal tracheal okklusion udgør fordele og ulemper med hensyn til etiske spørgsmål, omkostninger, kirurgiske vanskeligheder, størrelse, overlevelsesrater og tilgængelighed af genetiske værktøjer. Denne model giver et nyt værktøj til at studere virkningen af både tracheal okklusion og øget luminal pres på lungeudvikling.
Føtal tracheal okklusion (TO), en etableret behandling modalitet, fremmer fosterets lungevækst og overlevelse i svær medfødt membran brok (CDH). Efter TO øger fastholdelsen af den udskillede epitelvæske det luminale tryk og fremkalder lungevækst. Forskellige dyremodeller er blevet defineret for at forstå patofysiologien af CDH og TO. Alle har deres egne fordele og ulemper såsom teknikkens sværhedsgrad, dyrets størrelse, omkostninger, høje dødelighed og tilgængeligheden af genetiske værktøjer. Heri beskrives en ny transuterin model af murine føtal TO. Gravide mus blev bedøvet, og livmoderen udsat via en midline laparotomi. Luftrøret af udvalgte fostre blev ligated med en enkelt transuterin sutur placeret bag luftrøret, en halspulsåre, og en halspulsåre. Dæmningen blev lukket og fik lov til at komme sig. Fostre blev indsamlet lige før fødsel. Forholdet mellem lunge og kropsvægt i TO fostre var højere end hos kontrolfostre. Denne model giver forskere et nyt værktøj til at studere virkningen af både TO og øget luminalt pres på lungeudvikling.
Medfødt membran brok (CDH) forekommer i 1:2500 graviditeter og resulterer i lungehyperplasi og neonatal pulmonal hypertension1,2,3,4,5,6. Føtal tracheal okklusion (TO) er en etableret prænatal behandling hos alvorlige CDH-patienter, der involverer fetoskopi i den 26-30th svangerskabsuge, hvor en ballon er placeret lige over carinaen og derefter fjernet i 32nd svangerskabsuge. Denne midlertidige TO fremkalder fostrets lungevækst og forbedrer overlevelsen. Medfødt High Airway Obstruktion Syndrom er en dødelig tilstand forbundet med lungehyperplasi, som inspirerede kirurger til at udføre kunstig okklusion af luftrøret for at fremme tilbageholdelsen af den udskillede epitelvæske. Denne okklusion øgede det luminale tryk og inducerede lungevækst7. Okklusionen bør dog vendes for at muliggøre epitelcellemodning.
Forskellige dyremodeller af CDH og TO – får, kanin, rotte og mus – er udviklet til at forstå patofysiologien af CDH og TO. Alle har deres egne fordele og ulemper såsom teknikkens sværhedsgrad, dyrets størrelse, omkostninger, høje dødelighed og tilgængeligheden af genetiske værktøjer. Selvom den kirurgiske teknik, der anvendes til fåremodellen, ligner meget den, der anvendes hos mennesker og kan vendes, er de største ulemper ved denne model bekostning af dyret, den lange svangerskabsperiode og det begrænsede antal mulige operationer. Kaninmodellen har en kortere svangerskabsperiode og er billigere end fåremodellen. Kaninmodellen er dog irreversibel8,9. Murinmodellen har de laveste omkostninger, det højeste antal fostre pr. graviditet, det bedst karakteriserede genom og bredt tilgængelige værktøjer til cellulære og molekylære analyser. En væsentlig ulempe er imidlertid den manglende reversibilitet af to-aftalen, hvilket forhindrer fuld forståelse af to-to-to’s virkninger. Heri præsenteres en metode, der kombinerer alle fordelene ved de tidligere nævnte modeller og skaber en let, potentielt reversibel og minimalt invasiv gnaver TO-model.
Denne metode beskriver en kirurgisk procedure for føtal tracheal okklusion hos mus og dens indvirkning på lungeudvikling. Der er nogle kritiske trin i protokollen, der skal udføres omhyggeligt for at få succes med to. Varmen fra den platform, hvor operationen finder sted, og saltvandet, der indføres i peritonealhulen, er afgørende for graviditetens progression. Derudover skal der påføres et lille tryk på hvalpenes hoved for at sikre eksponering af nakken.
En 6,0 polypropylen sutur er …
The authors have nothing to disclose.
Denne forskning modtog ikke noget specifikt tilskud fra finansieringsorganer i den offentlige, kommercielle eller almennyttige sektor. Alle forfattere har ydet betydelige bidrag til udformningen og udformningen af undersøgelsen, erhvervelsen, analysen og fortolkningen af data, udarbejdelsen af artiklen og revisionen af den for vigtigt intellektuelt indhold og endelig godkendelse af den version, der skal indsendes. Forfatterne takker Can Sabuncuoğlu for hans venlige indsats på produktionen af illustrationen af den kirurgiske teknik.
Buprenorphine | Par Pharmaceutical | NDC 42023-179-05 | For regional anesthesia |
Isoflurane | Halocarbon Life Sciences | NDC 66794-017-25 | For general anesthesia |
Magnification glasses | USA Medical-Surgical | SLR-250LBLK | At least 2.5x |
Nikon 90i microscope | Nikon | 3417 | Motorized Fluorescence |
Nucleospin Tissue Kit | Macherey-Nagel, Düren, Germany | 740952.5 | DNA isolation |
Pierce BCA Protein Assay Kit | Thermo Fisher, IL, USA | 23225 | Protein quantification |
Polyglactin suture | Ethicon | VCP451H | 4-0, 24 mm, cutting |
Polylysine slides | VWR | 48382-117 | Microscope adhesion slides |
Polypropylene suture | Ethicon | Y432H | 6-0, 13 mm 1/2c Taperpoint |
RIPA buffer | Sigma-Aldrich, Missouri, USA | R0278-50ml | Protein isolation |
Silk suture | Ethicon | VCP682G | 4-0, 24 mm, cutting |
Trizol | Invitrogen | 15596026 | RNA isolation |