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Bioengineering

संवहनी अनुसंधान में कार्यात्मक इमेजिंग के लिए मल्टीस्पेक्ट्रल ऑप्टोएकोस्टिक टोमोग्राफी

Published: June 8, 2022 doi: 10.3791/63883

Summary

वर्तमान प्रोटोकॉल विवो मानव त्वचा वाहिका में मल्टीस्पेक्ट्रल ऑप्टोएकोस्टिक छवियों के अधिग्रहण का वर्णन करता है। इनमें हीमोग्लोबिन और मेलेनिन की मात्रा का परिमाणीकरण शामिल है, जिसे कार्यात्मक विश्लेषण के लिए रुचि के क्रोमोफोर के रूप में माना जाता है।

Abstract

संवहनी अनुसंधान के भीतर इस बढ़ते विषय को अंतर्निहित करते हुए, विभिन्न रोग प्रक्रियाओं में सूक्ष्मपरिसंचरण हानि को मान्यता दी गई है। हाल के वर्षों में, लाइव इमेजिंग सिस्टम के विकास ने बुनियादी और नैदानिक अनुसंधान दोनों में (विश्लेषणात्मक) गति निर्धारित की है, जिसका उद्देश्य नैदानिक रुचि और अनुप्रयोग के साथ वास्तविक समय, मात्रात्मक समापन बिंदु प्रदान करने में सक्षम नए उपकरण बनाना है। नियर-इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (एनआईआरएस), पॉज़िट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी), कंप्यूटेड टोमोग्राफी (सीटी), और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) अन्य तकनीकों के बीच उपलब्ध हैं, लेकिन लागत, छवि संकल्प और कम कंट्रास्ट को आम चुनौतियों के रूप में पहचाना जाता है। ऑप्टोएकोस्टिक टोमोग्राफी (ओटी) संवहनी कार्यात्मक इमेजिंग पर एक नया परिप्रेक्ष्य प्रदान करता है, जो ऊतक गहराई के साथ अत्याधुनिक ऑप्टिकल अवशोषण और स्थानिक संकल्प क्षमताओं (माइक्रोमीटर ऑप्टिकल से मिलीमीटर ध्वनिक संकल्प तक) का संयोजन करता है। इस अध्ययन में, हमने कार्यात्मक इमेजिंग के लिए मल्टीस्पेक्ट्रल ऑप्टोएकोस्टिक टोमोग्राफी (एमएसओटी) की प्रयोज्यता का परीक्षण किया। यह प्रणाली एनडी: याग लेजर द्वारा पंप किए गए एक असमर्थ ऑप्टिकल पैरामीट्रिक ऑसिलेटर (ओपीओ) का उपयोग करती है, जो 680 एनएम से 980 एनएम तक तरंग दैर्ध्य पर 3 डी जांच द्वारा महसूस की गई उत्तेजना दालें प्रदान करती है। मानव अग्रभाग से प्राप्त छवियों को विशिष्ट क्रोमोफोर की प्रतिक्रिया के आधार पर एक विशिष्ट एल्गोरिथ्म (निर्माता के सॉफ्टवेयर के भीतर आपूर्ति) के माध्यम से पुनर्निर्माण किया गया था। इस प्रणाली का उपयोग करके अधिकतम ऑक्सीजन युक्त हीमोग्लोबिन (मैक्स एचबीओ2) और डीऑक्सीजनेटेड हीमोग्लोबिन (मैक्स एचबी), कुल हीमोग्लोबिन (एचबीटी), और औसत ऑक्सीजन संतृप्ति (एमएसओ2) से संवहनी घनत्व (μVu), अंतर-इकाई औसत दूरी (ζAd), और केशिका रक्त की मात्रा (mm3) को मापा जा सकता है। इस ओटी प्रणाली के साथ पाई जाने वाली प्रयोज्यता क्षमता प्रासंगिक है। चल रहे सॉफ्टवेयर विकास निश्चित रूप से इस इमेजिंग सिस्टम की उपयोगिता में सुधार करेंगे।

Introduction

कार्डियोवैस्कुलर बीमारियां दुनिया भर में मृत्यु के आवर्तक शीर्ष कारण हैं और किसी भीस्वास्थ्य प्रणाली के लिए एक बड़ा बोझ का प्रतिनिधित्व करते हैं। प्रौद्योगिकी मौलिक हृदय और संवहनी पैथोफिज़ियोलॉजी की हमारी समझ के विस्तार में एक प्रमुख योगदानकर्ता रहा है, जो अधिक सटीक नैदानिक उपकरण और प्रारंभिक रोग का पता लगाने और अधिक प्रभावी प्रबंधन की संभावना प्रदान करता है। इमेजिंग तकनीक न केवल हृदय और प्रमुख पोत प्रदर्शन को मापने की संभावना प्रदान करती है, बल्कि अन्य विशेषताओं के बीच केशिका घनत्व, स्थानीय छिड़काव और मात्रा और एंडोथेलियल डिसफंक्शन की गणना करने के लिए बहुत छोटे पैमाने पर भी। इन प्रौद्योगिकियों ने प्रत्यक्ष नैदानिक अनुप्रयोग के साथ संवहनी जीव विज्ञान में पहली मात्रात्मक अंतर्दृष्टि की पेशकश की है। केशिका घनत्व, स्थानीय छिड़काव में कमी, या रोड़ा में परिवर्तन संभवतः एक इस्केमिक स्थिति के अनुरूप है, जो इमेजिंग की बढ़ती भूमिका को समझाने में मदद करता है, कार्डियोवैस्कुलर अनुसंधान और अभ्यास 3,4,5 में एक अनिवार्य उपकरण बन जाता है।

हाल के वर्षों में, कार्यात्मक इमेजिंग ने लगातार तकनीकी नवाचार में गति निर्धारित की है, जिसमें अल्ट्रासाउंड (यूएस) नियर-इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (एनआईआरएस), पॉज़िट्रॉन उत्सर्जन टोमोग्राफी (पीईटी), कंप्यूटेड टोमोग्राफी (सीटी), और चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) कुछ प्रसिद्ध उदाहरण हैं। हालांकि, कई चिंताएं लागत और रोगी सुरक्षा (साथ ही आराम) से लेकर छवि कंट्रास्ट और रिज़ॉल्यूशन 6,7 तक उनके आवेदन को सीमित करती हैं। ऑप्टोएकोस्टिक टोमोग्राफी (ओटी) हाल ही में ऑप्टिकल-आधारित संवहनी अनुसंधान में एक नई दिशा के रूप में उभरा है। अल्ट्राशॉर्ट लेजर दालों से प्रभावित ऊतक के थर्मोइलास्टिक विस्तार द्वारा उत्पन्न अल्ट्रासोनिक तरंगों का पता लगाने पर केंद्रित यह तकनीक कुछ समय के लिए जानी जाती है गर्मी के विकास और ऊतक विस्तार की यह शारीरिक प्रतिक्रिया एक अल्ट्रासाउंड ट्रांसड्यूसर द्वारा पता लगाए गए ध्वनिक संकेत को जन्म देती है। दृश्य से निकट-अवरक्त तक प्रकाश की दालों का उपयोग और ध्वनिक पृष्ठभूमि संकेत की अनुपस्थिति संकल्प गहराई को लाभ पहुंचाती है। पता लगाया गया कंट्रास्ट मौजूद सबसे महत्वपूर्ण क्रोमोफोर (हीमोग्लोबिन या मेलेनिन) से उत्पन्न होता है। अन्य प्रौद्योगिकियों की तुलना में, ओटी के फायदे हैं (1) कोई कंट्रास्ट (लेबल-फ्री इमेजिंग) की आवश्यकता नहीं है, (2) अल्ट्रासोनोग्राफी की तुलना में कम कलाकृतियों के साथ बेहतर कंट्रास्ट और रिज़ॉल्यूशन, और (3) कम कीमत, और तेजी से अधिग्रहण और ऑपरेशन में आसानी 6,9,10,11।

मल्टीस्पेक्ट्रल ऑप्टोएकोस्टिक टोमोग्राफी (एमएसओटी) ओटी उपकरणों की सबसे हालिया पीढ़ी में से एक है। उत्तेजना पल्स प्रदान करने वाले एनडी: याग लेजर द्वारा पंप किए गए एक असमर्थ ऑप्टिकल पैरामीट्रिक ऑसिलेटर (ओपीओ) के साथ निर्मित, एक 3 डी छवि 50 हर्ट्ज12 तक की पुनरावृत्ति दर के साथ 680 एनएम से 980 एनएम तक तरंग दैर्ध्य पर उच्च आवृत्ति अल्ट्रासोनिक उत्तेजना दालों से पता लगाए गए समय-संकल्प संकेतों द्वारा प्राप्त की जाती है। ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग प्लेटफॉर्म गहराई में विभिन्न क्रोमोफोर की मात्रा का ठहराव प्रदान करता है (15 मिमी जितना कम)। एचबीओ2, एचबी और मेलेनिन जैसे चर आसानी से सुलभ हैं। रुचि के अन्य चर, जैसे कि अधिकतम ऑक्सीजन युक्त हीमोग्लोबिन (मैक्स एचबीओ2) और डीऑक्सीजनेटेड हीमोग्लोबिन (मैक्स एचबी), भी उपलब्ध हैं। निर्माता के सॉफ्टवेयर से पुनर्निर्माण एल्गोरिदम अन्य चर की गणना की अनुमति देता है जैसे संवहनी घनत्व (μVu), अंतर-इकाई औसत दूरी (aad), और केशिका मात्रा (mm3)।

वर्तमान अध्ययन कार्डियोवैस्कुलर प्रीक्लिनिकल अनुसंधान में इसकी व्यावहारिकता और संभावित अनुप्रयोगों को बेहतर ढंग से समझने के लिए इस नई प्रणाली के आवश्यक परिचालन पहलुओं की पड़ताल करता है।

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Protocol

प्रायोगिक प्रोटोकॉल को पहले विश्वविद्यालय के स्कूल ऑफ हेल्थ साइंसेज (ईसी) की आचार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। ECTS/ P10.21)। प्रक्रियाओं नेमानव अनुसंधान के लिए परिभाषित अच्छे नैदानिक अभ्यास के सिद्धांतों का पूरी तरह से सम्मान किया। विश्वविद्यालय समुदाय से 32.8 ± 11.9 वर्ष की औसत आयु के साथ दोनों लिंगों (एन = 3 प्रति लिंग) के छह स्वस्थ प्रतिभागियों का एक सुविधाजनक नमूना चुना गया था। चयनित प्रतिभागियों को नॉर्मोटेंसिव, गैर-धूम्रपान करने वालों और किसी भी दवा या खाद्य पूरक से मुक्त होना आवश्यक था। रक्तचाप, कार्डियक फ्रीक्वेंसी और बॉडी मास इंडेक्स भी दर्ज किया गया। सभी प्रतिभागियों को पहले अध्ययन के उद्देश्यों और अवधि के बारे में सूचित किया गया था और सूचित लिखित सहमति प्रदान की गई थी।

नोट: यह अध्ययन एमएसओटीएसिटी ( सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करके किया गया था, जिसे अब ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग प्लेटफॉर्म के रूप में संदर्भित किया गया है।

1. अधिग्रहण की तैयारी

नोट: निम्नलिखित प्रयोगात्मक विवरण में, स्क्रीन कमांड बोल्डफेस प्रकार में हैं।

  1. विषय जानकारी लोड करना: ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग उपकरण चालू करें। जबकि उपकरण गर्म हो रहा है, प्रतिभागी की जानकारी पेश करें। सॉफ्टवेयर की मुख्य स्वागत विंडो स्कैन अवलोकन के लिए खुलती है। रोगी आईडी पर क्लिक करने के बाद डेटा (नाम, अध्ययन संप्रदाय, व्यक्तिगत डेटा और किसी भी प्रासंगिक अवलोकन सहित) पेश करें, और चयन दबाकर आवेदन समाप्त करें
  2. पूर्व निर्धारित चयन: सुनिश्चित करें कि उपकरण स्क्रीन पर लेजर तैयार संदेश दिखाई देता है। वार्मअप समय के बाद, उपकरण स्क्रीन पर लेजर स्टेटस बार लेजर स्टैंडबाय से लेजर तैयार होने तक बदलना चाहिए। इस प्रोटोकॉल के लिए, प्रीसेट को क्रोमोफोरस एचबी, एचबीओ2 और मेलेनिन के लिए डिज़ाइन किया गया है। सही प्रीसेट का चयन करने के बाद, लेजर पावर का परीक्षण किया जाएगा।
  3. इस बिंदु पर, सुनिश्चित करें कि स्क्रीन पर एक संदेश है जो कमरे में प्रत्येक प्रतिभागी को लेजर सुरक्षा गूगल लागू करने के लिए याद दिलाता है। लेजर (पावर) स्विच फुट पेडल दबाएं और लेजर पावर सेल्फ-चेक की प्रतीक्षा करें। कुछ सेकंड के बाद, एक चेक-अप रिपोर्ट के साथ वर्तमान लेजर स्थिति के साथ एक विंडो दिखाई देती है। उपलब्ध OK बटन दबाकर इस विंडो को रिलीज़ करें
    नोट: ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग प्लेटफॉर्म एक एनडी: याग लेजर का उपयोग करता है, जिसे कक्षा 4 लेजर माना जाता है जो विशेष रूप से मानव आंखों के लिए खतरनाक है। इस प्रकार, इस लेजर को पर्याप्त देखभाल के साथ संभाला जाना चाहिए।
    चेतावनी: उचित आंखों की सुरक्षा सहित सभी सुरक्षा प्रक्रियाओं को सुनिश्चित किए बिना कोई अधिग्रहण नहीं होना चाहिए।

2. स्थिति और छवि अधिग्रहण

  1. प्रतिभागी को प्रयोगशाला के वातावरण (21 डिग्री सेल्सियस ± 1 डिग्री सेल्सियस; 40% -60% सापेक्ष आर्द्रता) के अनुकूल बनाएं, अनावश्यक आंदोलन को कम करने के लिए एक आरामदायक स्थिति चुनें। सुनिश्चित करें कि स्कैन किया जाने वाला क्षेत्र पहले साफ हो गया है।
    नोट: 70% इथेनॉल / पानी के समाधान के साथ छवि वाले क्षेत्र को साफ करने के लिए निर्माता की सिफारिश की जाती है। इसके अतिरिक्त, सर्वोत्तम छवि अधिग्रहण के लिए, बालों को हटाने (जब लागू हो) का सुझाव दिया जाता है।
  2. जांच धारक और छवि स्थिरीकरण
    1. 3 डी कप में अल्ट्रासाउंड जेल की एक पतली परत लागू करें। छवि स्थिरीकरण के लिए वांछित इमेजिंग स्थिति में 3 डी कप रखने की आवश्यकता होती है। ब्याज के क्षेत्र के लिए एक लॉक करने योग्य हाथ को स्थिति और स्थिर करें। इस अध्ययन में उपयोग की जाने वाली बांह को इन-हाउस डिज़ाइन किया गया था और एल्यूमीनियम प्रोफाइल घटकों (चित्रा 1) के साथ बनाया गया था।
    2. रुचि के क्षेत्र पर 3 डी कप रखने के बाद, छवि अधिग्रहण के लिए स्थिर हाथ लॉक को आंशिक रूप से लॉक करें।
      नोट: अल्ट्रासाउंड जेल की गुणवत्ता और यहां तक कि आवेदन महत्वपूर्ण है; हवा के बुलबुले की उपस्थिति छवि परिभाषा से समझौता कर सकती है।
  3. परीक्षा मेनू टैब में पोस्ट-ऑक्लुसिव रिएक्टिव हाइपरमिया (पीओआरएच) पैंतरेबाज़ी का उपयोग करके गतिशील स्थितियों के लिए छवि अधिग्रहण।
    1. बेसलाइन नियंत्रण स्कैन प्राप्त करें। इमेजिंग के लिए दृश्य का एक क्षेत्र खोजने के बाद, रक्तचाप कफ को कम करने के साथ, सुरक्षित रूप से 3 डी कप पोजिशनिंग आर्म को लॉक करें।
    2. इमेजिंग साइट पर न्यूनतम दबाव लागू करें, क्योंकि उच्च दबाव रीडआउट से समझौता कर सकते हैं। निर्माता के डिफ़ॉल्ट प्रीसेट एचबी, एचबीओ2 और मेलेनिन को पुश करें जो एक साथ एचबी, एचबीओ 2 और मेलेनिन के लिए क्रोमोफोरको मापता है।
      सावधानी: ऑपरेशन के दौरान उचित सुरक्षा चश्मे के साथ आंखों की रक्षा करना अनिवार्य है।
      नोट: त्वचा फोटोटाइप IV से VI (डार्क स्किन) गलत पढ़ने के लिए प्रवण होते हैं, आगे की प्रक्रिया के लिए बेसलाइन नियंत्रण छवि की आवश्यकता होती है। छवि अधिग्रहण के दौरान सुरक्षा चश्मे का उपयोग (जब लेजर सक्रिय होता है) केवल मानव आंखों को पीले और नीले रंगों को पहचानने की अनुमति देता है। छवि प्रसंस्करण के दौरान रंगों को संपादित किया जा सकता है।
    3. आधारभूत छवि अधिग्रहण के लिए शारीरिक क्षेत्र का चयन करें। खोजपूर्ण उद्देश्यों के लिए, उदर अग्रभाग की सिफारिश की जाती है। लेजर फुटस्विच पेडल दबाकर आगे बढ़ें।
      नोट: टच स्क्रीन बटन लेबल दृश्य (रंगीन पीला), जो दबाए जाने पर स्क्रीन पर लाइव छवि दिखाता है। छवि स्थिरता की स्थिति को टच स्क्रीन के बीच में एक ग्रे बार के रूप में दिखाया गया है, जो 3 डी जांच की स्थिरता का संकेत देता है।
      1. जब छवि स्थिरता अधिकतम हो जाती है, तो टचस्क्रीन पर स्नैपशॉट बटन दबाकर क्षेत्र का स्नैपशॉट लें (या कैप्चर करें)। प्रत्येक स्कैन 2 सेकंड के अधिग्रहण समय में प्रीसेट के भीतर परिभाषित प्रत्येक तरंग दैर्ध्य के लिए 150 मिमी की ध्वनिक गहराई पर 10-12 फ्रेम प्राप्त करेगा। इस बेसलाइन अधिग्रहण स्कैन में कुल 30-36 फ्रेम शामिल होंगे।
        नोट: प्रत्येक क्रोमोफोर (एचबी, एचबीओ2, और मेलेनिन) के लिए 10 फ्रेम 15 मिमी की अधिकतम गहराई के साथ एकत्र किए जाते हैं।
      2. निरंतर वीडियो अधिग्रहण के लिए लेजर फुटस्विच पेडल दबाना जारी रखें और टच स्क्रीन पर व्यू बटन (रंगीन पीला) पर ध्यान दें। स्थिर छवि दिखाई देगी। लाइव छवि रिकॉर्डिंग शुरू करने के लिए रिकॉर्ड (रंगीन नीला) दबाएं।
      3. स्टॉप बटन (काले रंग) दबाकर रिकॉर्डिंग बंद करें। ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग प्लेटफॉर्म रिकॉर्डिंग बंद कर देगा और स्वचालित रूप से वीडियो को पूर्वावलोकन मोड में प्रस्तुत करेगा।
    4. गतिशील माप (PORH चित्रण): इस पैंतरेबाज़ी को चित्रित करने के लिए कोहनी के ऊपर रोगी की बांह में दबाव कफ समायोजित करें। कफ को सुप्रा सिस्टोलिक दबाव (~ 200 मिमीएचजी) के साथ फुलाएं और दबाव में छवि वाले वाहिका को प्राप्त करने के लिए चरण 2.3.1 से 2.3.3.1 के अनुसार आगे बढ़ें।
    5. छवि वाले वाहिका पर दबाव रिलीज के प्रभाव का आकलन करने के लिए एक वीडियो प्राप्त करने के लिए, 2.3.3.2 में वीडियो प्राप्त करते समय दबाव वाल्व खोलें। पहले की तरह, स्क्रीन पर लाइव छवि का पालन करें।
      नोट: इस पैंतरेबाज़ी को निष्पादित करने के लिए, सुप्रा सिस्टोलिक दबाव को 1-5 मिनट के लिए बनाए रखा जाना चाहिए; यह जानना महत्वपूर्ण है कि यह दबाव रोगी में सहिष्णुता और असुविधा के विभिन्न डिग्री को प्रेरित कर सकता है। प्रयोगों के दौरान इस पहलू को सावधानीपूर्वक प्रबंधित किया जाना चाहिए।

3. छवि विश्लेषण प्रोटोकॉल

  1. निर्माता के समर्पित विश्लेषणात्मक सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके एक अलग कंप्यूटर वर्कस्टेशन पर बैकअप और आगे के विश्लेषण के लिए रिकॉर्ड किए गए स्कैन को एक चयनित / समर्पित फ़ोल्डर में कॉपी करें। प्रत्येक स्कैन अधिग्रहण समय द्वारा संग्रहीत किया जाता है और प्रोग्राम द्वारा एक चल रहे कोड के साथ एक अध्ययन फ़ोल्डर में आदेश दिया जाता है।
    नोट: एक बैकअप प्रतिलिपि दृढ़ता से अनुशंसित है। रिकॉर्ड किए गए कच्चे डेटा के साथ सीधे काम करना संभव है लेकिन दृढ़ता से हतोत्साहित किया गया है, क्योंकि कोई भी संभावित हार्ड ड्राइव क्रैश कच्चे डेटा को नुकसान पहुंचा सकता है।
  2. कार्यस्थान कंप्यूटर पर विश्लेषण प्रोग्राम खोलें। फ़ाइलों को आयात करने और बैकअप स्कैन तक पहुँचने के लिए प्रोग्राम मेनू > ओपन स्टडी चुनें. अध्ययन खोलें और फ़ोल्डर के निचले भाग (रिकॉर्ड किए गए स्कैन के साथ) तक स्क्रॉल करें ताकि फ़ाइलों को खोजा जा सके। NOD एक्सटेंशन. यह एक अध्ययन खोलने के लिए सॉफ्टवेयर द्वारा मान्यता प्राप्त एकमात्र फ़ाइल प्रकार है।
    नोट:। NOD फ़ाइलों को स्वचालित रूप से प्रत्येक अध्ययन को दिए गए रनिंग नंबर के साथ नामित किया जाता है और फ़ाइल नाम में कोई रोगी जानकारी नहीं होती है।
  3. छवि पुनर्निर्माण के लिए, उन्नत प्रसंस्करण के > सॉफ्टवेयर मेनू तक पहुंचकर छवि विश्लेषण मॉड्यूल खोलें।
    1. सुनिश्चित करें कि प्रोग्राम वर्कफ़्लो टैब शीर्ष मेनू पट्टी (पूरक चित्रा 1): मेनू पर दृश्यमान (रंगीन काला) हैं; स्कैन अवलोकन; पुनर्निर्माण; फ्लुएंस सुधार; स्पेक्ट्रल अनमिक्सिंग; विज़ुअलाइज़ेशन और विश्लेषण। विश्लेषण के दौरान, किसी भी सक्रिय वर्कफ़्लो टैब नीले रंग का होता है।
      नोट: यदि अग्रिम प्रसंस्करण नहीं खोला गया है, तो सॉफ्टवेयर केवल स्कैन अवलोकन और विज़ुअलाइज़ेशन और विश्लेषण दिखाता है
  4. सॉफ्टवेयर के पुनर्निर्माण टैब के माध्यम से छवि का पुनर्निर्माण करें। मुख्य प्रोग्राम मेनू के बाईं ओर से पुनर्निर्माण के लिए स्कैन का चयन करें। लोड किए गए स्कैन स्क्रीन के दाईं ओर दिखाई देते हैं। डिफ़ॉल्ट छह ऑप्टोएकोस्टिक उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य (700, 730, 760, 800, 850 और 900 एनएम) छोड़ दें, क्योंकि उनमें एचबीओ2 के लिए 900 एनएम, एचबी के लिए 760 एनएम और मेलेनिन 700 एनएम पर अधिकतम ऑप्टोएकोस्टिक सिग्नल शामिल हैं।
    1. दाईं ओर आइकन का उपयोग करके स्कैन पुनर्निर्माण करें। स्कैन प्रीसेट और दृश्य फ़ील्ड (रिज़ॉल्यूशन) का चयन करके प्रोग्राम वर्कफ़्लो का पालन करें। जानकारी मुख्य स्क्रीन के शीर्ष बाएं कोने पर प्रस्तुत की जाती है। स्कैन फ़ोकस को समायोजित करने के लिए ध्वनि की गति समायोजित करें (पूरक चित्र 2)। पुनर्निर्माण पैनल प्रत्येक अधिग्रहित स्कैन के फ्रेम की संख्या भी दिखाता है और पुनरावृत्ति के चयन का विश्लेषण करने की अनुमति देता है (यदि आवश्यक हो)।
      नोट: प्रत्येक स्कैन -90 की ध्वनि की डिफ़ॉल्ट गति के साथ लोड किया गया है, जिसे उपयोगकर्ता द्वारा समायोजित किया जाना चाहिए। ध्वनि की गति को ऑटो-फोकस फ़ंक्शन (एएफ) के साथ स्वचालित रूप से समायोजित किया जा सकता है।
  5. स्कैन पुनर्निर्माण के लिए आगे बढ़ने के लिए स्क्रीन के शीर्ष पर बटन पुनर्निर्माण स्कैन दबाएं। संदेश जॉब प्रोसेसिंग के साथ एक अस्थायी डैशबोर्ड दिखाई देगा। इस पैनल को मेनू > प्रोसेसिंग स्टेटस से भी एक्सेस किया जा सकता है। पुनर्निर्माण पूरा करने के बाद, छवि पोस्ट-प्रोसेसिंग विश्लेषण को फ्लुएंस करेक्शन में आगे बढ़ना चाहिए।
  6. डैशबोर्ड मेनू में पुनर्निर्मित छवियों के फ्लुएंस सुधार को सक्रिय करें। फ्लुएंस सुधार के लिए पुनर्निर्मित छवियों को लोड किया जाना चाहिए। ये प्रत्येक स्कैन नंबर के बगल में एक ध्वज के साथ दिखाई देते हैं। लोड की गई फ़ाइलें तुरंत चयनित पुनर्निर्माण के रूप में स्क्रीन के दाईं ओर प्रदर्शित की जाएंगी। स्क्रीन के दाईं ओर आइकन के साथ बातचीत करके फ्लुएंस सुधार सक्रिय करें (पूरक चित्र 3)। सेव फ्लुएंस करेक्शन (ओं) को प्रगति के लिए प्रेरित करें।
  7. फ्लुएंस सुधार को बचाने के बाद, अधिग्रहित प्रीसेट (एचबी, एचबीओ2, और मेलेनिन) का वर्णक्रमीय अनमिक्सिंग करें। वर्णक्रमीय अनमिक्सिंग के लिए चयनित पुनर्निर्माण की सूची खोलने के लिए वर्णक्रमीय अनमिक्सिंग टैब का चयन करें। चयनित अध्ययन के प्रत्येक स्कैन के साथ एक सूची पिछले छवि प्रसंस्करण चरणों के इतिहास के साथ प्रदर्शित की जाएगी।
  8. पहले सहेजी गई फ्लुएंस सुधार फ़ाइलों को लोड करें। लोड किए गए स्कैन तुरंत चयनित पुनर्निर्माण (पूरक चित्रा 4) के रूप में स्क्रीन के दाईं ओर प्रदर्शित किए जाएंगे। स्क्रीन के दाईं ओर आइकन को धक्का देकर वर्णक्रमीय अनमिक्सिंग को सक्रिय करें।
    1. तरंगदैर्ध्य को अमिश्रित होने के लिए देखें। पुनर्निर्माण चरण (चरण 3.4) में लिए गए सभी छह ऑप्टोएकोस्टिक उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य (700, 730, 760, 800, 850 और 900 एनएम) स्वचालित रूप से वर्णक्रमीय अनमिक्सिंग के लिए चुने जाते हैं। यदि आवश्यक हो, तो एक्सवाईजेड आइकन का उपयोग करके संसाधित किए जाने वाले वांछित स्पेक्ट्रा को संपादित करें (जैसे, स्पेक्ट्रा: एचबी, एचबीओ2, और मेलेनिन)।
    2. समायोजित मापदंडों की पुष्टि करने के बाद, प्रगति के लिए वर्णक्रमीय अनमिक्सिंग प्रारंभ करें पर क्लिक करें। एक प्रसंस्करण मेनू पट्टी प्रकट होती है, जो कार्रवाई प्रगति प्रदर्शित करती है.
      नोट: वर्णक्रमीय अनमिक्सिंग के दौरान विभिन्न पैरामीटर समायोजन संभव हैं, और कई अनमिक्सिंग विधियां उपलब्ध हैं। इस प्रोटोकॉल में, रैखिक प्रतिगमन विधि का उपयोग एचबी, एचबीओ2 और मेलेनिन को अनमिक्स करने के लिए एक मानक के रूप में किया जाता है।
  9. विज़ुअलाइज़ेशन और विश्लेषण टैब तक पहुँचें। चरण 1.1 (पूरक चित्र 5) में पेश की गई सभी विषय जानकारी और टिप्पणियों को प्रदर्शित करने के लिए एक सक्रिय स्कैन पर क्लिक करें।
    नोट: समानांतर में कई स्कैन की कल्पना की जा सकती है।
    1. एकाधिक स्कैन विश्लेषण बनाने के लिए + बटन दबाएं। इस विंडो में, एकाधिक स्कैन दृश्य पेश करें और सहेजें बटन दबाएँ . दृश्य नाम सहेजने के बाद, एक नया डैशबोर्ड प्रदर्शित किया जाता है, जिसमें अध्ययन के सभी स्कैन का विश्लेषण किया जा रहा है।
    2. सहेजे गए विश्लेषण दृश्य में जोड़ने (प्रत्येक) के लिए प्रत्येक वांछित स्कैन का चयन करें. शीर्ष बाएं कोने आइकन पर अतिरिक्त स्कैन जोड़ें, और वे स्वचालित रूप से विश्लेषण दृश्य में प्रदर्शित होंगे
  10. विश्लेषण दृश्य के भीतर, विश्लेषण के लिए छवि तैयार करने के लिए उचित रंग लुकअप टेबल सेट करें। शीर्ष मेनू पट्टी पर अधिक छवि नियंत्रण विकल्प क्लिक करें और अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण चिह्न सक्रिय करें। 2 डी + छवि डिस्प्ले से सटे छवि डिस्प्ले के निचले दाएं कोने में उपलब्ध आइकन को दबाकर परतों को रंगों की विशेषता दें।
  11. एक साथ सभी चैनलों के रंगों को संपादित करने के लिए अधिक का चयन करें। यह मेनू सभी क्रोमोफोर को अमिश्रित दिखाता है और प्रदर्शन के लिए कई परतों के चयन की अनुमति देता है।
    नोट: सॉफ़्टवेयर आइकन पर माउस को स्थानांतरित करना प्रोटोकॉल में प्रदर्शित ग्रे में उनका नाम दिखाता है।
  12. स्क्रीन के निचले बाईं ओर उपलब्ध उपकरणों के साथ प्रत्येक परत की रंग तीव्रता समायोजित करें।
    नोट: प्रत्येक चैनल के लिए न्यूनतम / अधिकतम प्रक्षेप के साथ समायोजन आम तौर पर अच्छे परिणाम देता है।

4. रुचि के क्षेत्र (आरओआई) विश्लेषण

नोट: डेटा विश्लेषण के लिए रुचि के क्षेत्र (आरओआई) का चयन अनिवार्य है।

  1. विश्लेषण किए जाने वाले ROI की पहचान करें। एक्सजेड और वाईजेड अक्ष (पूरक चित्रा 6) में उपलब्ध ऑर्थोगोनल दृश्यों के भीतर एक ही आरओआई का पता लगाते हुए एक्सवाई छवि में उपलब्ध आकृतियों (मेनू बार के भीतर) के साथ आरओआई को घेर लें।
    नोट: वर्तमान आरओआई विश्लेषण के लिए एक बहुभुज आकार का उपयोग किया गया था।
    1. इंटरपोल जोड़ें और उप-क्षेत्रों को हटाएं फ़ंक्शन के साथ कई बहुभुज परतों को रखते हुए शेष एक्सजेड और वाईजेड अक्ष (चित्रा 2 में उदाहरण) में आरओआई आकार का पालन करें। वांछित आरओआई को परिभाषित / चुनने के बाद डेटा को प्लॉट किया जा सकता है।
    2. परिमाणीकरण के लिए आइकन आयात क्षेत्र को दबाएं और चयनित आरओआई के ग्राफिकल विवरण के रूप में स्क्रीन के दाईं ओर दिखाए गए मल्टी स्पेक्ट्रा घटक का निरीक्षण करें।
    3. ROI डेटा के ग्राफ़िकल दृश्य के निचले भाग में Excel चिह्न दबाकर ROI डेटा निर्यात करें. सभी क्षेत्रों से संपूर्ण डेटा पैकेज को बाद के विश्लेषण के लिए एक स्प्रेडशीट में एक बंडल के रूप में निर्यात किया जाता है। चित्रा 3 एक प्रतिभागी के डेटा को दर्शाता है जिसने 200 मिमीएचजी तक बढ़े हुए दबाव कफ को प्रस्तुत किया और 0 मिमीएचजी पर वास्कुलचर आराम की स्थिति की तुलना में वास्कुलचर का विश्लेषण किया गया।
  2. चरण 4.1-4.1.3 का पालन करके एक साथ कई ROI ऑब्जेक्ट्स की मात्रा निर्धारित करें।
  3. सभी एम्बेडेड डेटा और अंतर्निहित आरओआई रूपरेखा (चित्रा 2) के साथ टीआईएफएफ फ़ाइलों के समान मेनू से छवियों को निर्यात करें।

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Representative Results

ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग द्वारा प्रदान किए गए डेटा का विश्लेषण पोस्ट-प्रोसेस्ड निर्यात छवियों (चित्रा 2) और प्लॉट किए गए डेटा (चित्रा 3) में किया जा सकता है। यहां उद्देश्य ऑप्टोएकोस्टिक कार्यात्मक इमेजिंग के संचालन को पेश करना और अधिक सामान्य रूप से ज्ञात संवहनी अनुसंधान में इसके आवेदन का पता लगाना था। इसके लिए, हमने आराम के दौरान और एक प्रमुख आपूर्ति धमनी के 200 मिमीएचजी रोड़ा के बाद प्राप्त छवियों की तुलना की (चित्रा 2)। आरओआई विश्लेषण और निर्यात के बाद इन टिप्पणियों को निर्धारित किया जा सकता है। एक्सवाई विमान में, विमान वाईजेड और एक्सजेड की तुलना में मेलेनिन का उच्च संकेत देखा जा सकता है, जो एपिडर्मिस सीमा को इंगित करता है। ब्रैकियल धमनी (बांह) का रोड़ा ओटी जांच प्लेसमेंट (उदर अग्रभाग) से पहले वाहिकाओं में कुछ ठहराव को उकसाता है। नतीजतन, हमने एक्सवाई, वाईजेड और एक्सजेड अक्षों पर नीले (एचबी) और लाल (एचबीओ2) की वृद्धि के रूप में दिखाए गए समग्र संकेतों में वृद्धि का पता लगाया। कफ के भीतर 200 मिमीएचजी दबाव को पकड़ते हुए एक्सवाई विमान में ठहराव का पालन किया जा सकता है। YZ और XZ अक्ष सामान्य छिड़काव स्थितियों (कोई रोड़ा नहीं) की तुलना में ऊपर रोड़ा के कारण रक्त की मात्रा में वृद्धि को दर्शाते हैं, जिसे मैजेंटा नकाबपोश क्षेत्रों द्वारा हाइलाइट किया गया है।

एक ही माइक्रोवास्कुलचर क्षेत्र का निर्यात किया गया आरओआई विश्लेषण 8.6 सेकंड से अधिक एकत्रित स्थिर छवियों से क्रोमोफोर एचबीओ2 (लाल), एचबी (नीला) और एचबीटी (गुलाबी), एमएसओ2 (गहरा लाल), और मेलेनिन (पीला) को निर्धारित करता है। दबाव रिलीज का तुरंत पता लगाया जाता है; चित्रा 3 एचबी, एचबीओ2 और एचबीटी रिकवरी के पोस्ट-रोड़ा विकास को दर्शाता है, जबकि ऑप्टोएकोस्टिक डेटा आउटपुट चित्रा 1 में टिप्पणियों का अनुसरण करता है। सॉफ्टवेयर एचबी औरएचबीओ 2 मनमाने संकेतों के अलावा रक्त ऑक्सीजन संतृप्ति (एमएसओ2) और एचबीटी मूल्यों की गणना करता है। मेलेनिन एकाग्रता 200 मिमीएचजी रोड़ा के भीतर और छवि अधिग्रहण के समय अंतराल के भीतर आराम की स्थिति में स्थिर रहती है।

Figure 1
चित्र 1: प्रतिभागी की त्वचा के स्थिर संपर्क में मापने की जांच को पकड़ने के लिए डिज़ाइन किए गए लचीले हाथ का प्रतिनिधित्व करने वाला योजनाबद्ध आरेख। कृपया इस आंकड़े के बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 2
चित्रा 2: प्रतिनिधि ऑप्टोएकोस्टिक छवियां आराम पर या 200 मिमीएचजी के दबाव में वाहिका के परिवर्तनों को उजागर करती हैं। दिखाई गई छवि में तीन रंग शामिल हैं, जो एचबी (नीला), एचबीओ2 (लाल), और मेलेनिन (पीला) का प्रतिनिधित्व करते हैं, जैसा कि अनुभाग 4 में छवि विश्लेषण के भीतर वर्णित है। प्रत्येक ऑप्टोएकोस्टिक छवि प्रत्येक स्कैन किए गए क्रोमोफोर से जुड़े सभी विमानों के अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण का प्रतिनिधित्व करती है। () ऑप्टोएकोस्टिक अधिग्रहण का एक्सवाई विमान। (बी) एक ही ऑप्टोएकोस्टिक इमेज्ड साइट का वाईजेड ऑर्थोगोनल दृश्य। (सी) स्कैन किए गए क्षेत्र का एक्सजेड दृश्य। मैजेंटा तीर बढ़े हुए ठहराव वाले क्षेत्रों को इंगित करते हैं; मैजेंटा मास्क्ड क्षेत्र सामान्य छिड़काव स्थितियों (कोई रोड़ा नहीं) की तुलना में ब्रैकियल धमनी के रोड़ा के कारण वाहिकाओं के अंदर फंसे रक्त की बढ़ती मात्रा को चिह्नित करता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 3
चित्रा 3: एक मात्रात्मक आरओआई का प्रतिनिधि डेटा निर्यात। एचबीओ2 (लाल), एचबी (नीला) और एचबीटी (गुलाबी), एमएसओ2 (गहरे लाल), और मेलेनिन (पीले) के प्राकृतिक क्रोमोफोर को 8.6 सेकंड से अधिक एकत्र किए गए स्थिर छवियों से निकाले गए डेटा से दर्शाया गया है। एचबी, एचबीओ2, और एचबीटी के ग्राफ गैर-अवरुद्ध आराम करने की स्थिति की ओर रोड़ा से वसूली ढलान दिखाते हैं। गणना की गई रक्त ऑक्सीकरण एमएसओ2 और मेलेनिन एकाग्रता 200 मिमीएचजी रोड़ा के भीतर और छवि अधिग्रहण के समय अंतराल के भीतर आराम की स्थिति में स्थिर रहती है। निकाली गई छवियां डेटा बिंदु हैं जिन्हें एन = 10 छवियों प्रति फ्रेम के औसत ± एसडी के रूप में दर्शाया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

पूरक चित्रा 1: स्कैन अवलोकन पैनल और विश्लेषण सॉफ्टवेयर का मुख्य मेनू। मेनू बटन (काले रंग में) को धक्का देते हुए, मुख्य मेनू चयनित अध्ययन का चयन करने के लिए विकल्प छोड़ देगा। यह क्रिया सॉफ़्टवेयर द्वारा मान्यता प्राप्त ".nod" फ़ाइल का चयन और लोड करेगी. स्कैन अवलोकन (नीले रंग में) सभी अध्ययन के स्कैन दिखाता है। विवरण (काला) दाईं ओर दिखाई देता है। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

पूरक चित्रा 2: पुनर्निर्माण विश्लेषण वर्कफ़्लो। पैनल 1 - पुनर्निर्मित किए जाने वाले स्कैन का चयन करें और आगे बढ़ने के लिए डिस्प्ले (बैंगनी तीर) के दाईं ओर दाएं-सामने वाले तीर को दबाएं। पैनल 2 - ध्वनि की गति का निरीक्षण करें और स्लाइडर को सबसे अच्छा फोकस (नीला तीर) में समायोजित करें; ए) खिड़की के दाहिने हाथ की तरफ प्रदर्शित समायोजित फोकस; बी) विश्लेषण किए जाने वाले दोहराव का चयन करें (पीला तीर); सी) आगे बढ़ने के लिए पुनर्निर्माण स्कैन बटन दबाएं (हरा तीर)। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

पूरक चित्रा 3: फ्लुएंस सुधार पैनल वर्कफ़्लो। पैनल 1 - सही किए जाने वाले स्कैन का चयन करें और स्क्रीन के दाईं ओर दाईं ओर दाएं-सामने वाले तीर को दबाएं। पैनल 2 - आगे बढ़ने के लिए सेव फ्लुएंस करेक्शन (एस) दबाएं (हरा तीर)। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

पूरक चित्रा 4: स्पेक्ट्रा अनमिक्सिंग पैनल वर्कफ़्लो। पैनल 1 - अनमिक्स करने के लिए स्कैन का चयन करें और दाएं-सामने तीर (बैंगनी तीर) दबाएं। पैनल 2 ए) अनमिक्स (नीले तीर) के लिए स्कैन का चयन करें और समायोजित छवि का पूर्वावलोकन दाईं ओर प्रदर्शित किया जाएगा; बी) अनमिक्स (पीला तीर) के लिए पुनरावृत्ति का चयन करें; सी) आगे बढ़ने के लिए स्पेक्ट्रल अनमिक्सिंग शुरू करें (हरा तीर)। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

पूरक चित्रा 5: विज़ुअलाइज़ेशन पैनल और क्रोमोफोर रंगों का चयन। पैनल 1) डबल क्लिक (बैंगनी तीर) के साथ प्रदर्शित करने के लिए स्कैन का चयन करें; पैनल 2) अक्ष एक्सवाई (नीला वर्ग), एक्सजेड (पीला वर्ग), और वाईजेड (हरा वर्ग) में अधिग्रहित छवि; 2 ए) अधिग्रहित तरंग दैर्ध्य दिखाने वाले छवि विश्लेषण बटन; 2 बी) शीर्ष मेनू बार में अधिक छवि नियंत्रण विकल्प चुनें और मैक्स तीव्रता प्रक्षेपण आइकन को सक्रिय करें; चैनलों के रंग संपादित करने के लिए अधिक का चयन करें. कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

पूरक चित्र 6: रुचि के क्षेत्र (आरओआई) का चयन। लासो उपकरण (पीला तीर) का चयन करें और एक्सवाई अक्ष (मैजेंटा तीर) के भीतर आरओआई की सीमाओं को परिभाषित करें। विभिन्न आकार क्षेत्रों (बहुभुज, आयत, वर्ग, वृत्त, या एलिप्स) को परिभाषित करना संभव है। XZ और YZ अक्ष में ROI का पालन करें और प्रारंभिक चयन में उप-क्षेत्र (हरा तीर) जोड़ें। कई उपक्षेत्र प्रदर्शित होते हैं (सियान तीर)। चयनित ROI से डेटा निकालने के लिए, परिमाणीकरण के लिए रुचि का चिह्न आयात क्षेत्र दबाएँ और आगे बढ़ें. कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

यह प्रोटोकॉल इस नए ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग उपकरण को संचालित करने के लिए व्यावहारिक आवश्यकताओं के रूप में माने जाने वाले कामकाजी चरणों पर जोर देता है, 3 डी कप जांच स्थिरीकरण के लिए आवश्यक पर्याप्त स्थिति (प्रतिभागी, जांच) से लेकर छवि अधिग्रहण, आरओआई चयन और छवि पुनर्निर्माण और विश्लेषण तक।

प्रस्तावित प्रयोगात्मक दृष्टिकोण, गतिशील परिस्थितियों के तहत प्राप्त छवियों के साथ "तात्कालिक" अधिग्रहण का उपयोग करके, विवो मानव संवहनी शरीर विज्ञान में पहुंचने में इस उपकरण की रुचि और उपयोगिता को दर्शाता है। जैसा कि दिखाया गया है, 15 मिमी3 तक की मात्रा में एकत्र किया गया 150 μm ध्वनिक छवि रिज़ॉल्यूशन अन्य टोमोग्राफी तकनीकों द्वारा बेजोड़ है।

(i) छवि अधिग्रहण के लिए जांच स्थिरीकरण के महत्व के बारे में विशेष ध्यान देना आवश्यक है; एक लचीले, सुरक्षित जांच धारक का उपयोग स्पष्ट रूप से छवि अधिग्रहण में सुधार करता है; (ii) संवहनी संरचनाओं की सही पहचान; एपिडर्मल-त्वचीय संक्रमण में मेलेनिन जैसे सोनोग्राफिक संदर्भों का उपयोग त्वचा में ऊपरी जाल वाहिकाओं की पहचान करने के लिए मार्कर के रूप में किया जा सकता है; और (iii) निर्माता के पुनर्निर्माण सॉफ्टवेयर के माध्यम से किए गए कार्यात्मक छवि विश्लेषण।

ROI डेटा और छवि निर्यात के उन्नत विश्लेषण के लिए समर्पित सॉफ्टवेयर और विकसित एल्गोरिदम की गहरी समझ की आवश्यकता होती है। वर्तमान ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग उपकरण 150 μm के संकल्प के साथ ऊतक के 15 मिमी3 की 3 डी मात्रा का पुनर्निर्माण करने में सक्षम है। माइक्रोवैस्कुलर फ़ंक्शन (ओं) को गहराई से बेहतर ढंग से मापने के लिए इस क्षमता को शक्तिशाली बनाया जाना चाहिए। फिर भी, मूल ऑपरेशन संदर्भ क्रोमोफोर के प्रत्यक्ष अवलोकन और एक ही क्षेत्र से कई प्रीसेट के अधिग्रहण की अनुमति देता है, जो तेजी से स्कैनिंग और लाइव वीडियो रिकॉर्डिंग प्रदान करता है।

ऑप्टोएकोस्टिक इमेजिंग सिस्टम के साथ पाई जाने वाली प्रयोज्यता क्षमता प्रासंगिक है। चल रहे सॉफ्टवेयर विकास निश्चित रूप से इस इमेजिंग सिस्टम की उपयोगिता में सुधार करेंगे।

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Disclosures

लेखकों ने हितों के टकराव की कोई रिपोर्ट नहीं की है।

Acknowledgments

इस शोध को अध्ययन के तहत प्रौद्योगिकी के ALIES और COFAC प्रमुख प्रदाताओं द्वारा वित्त पोषित किया जाता है, और CBIOS को अनुदान UIDB / 04567/2020 के माध्यम से Fundaço para a Cincia e a Tecnologia (FCT) द्वारा वित्त पोषित किया जाता है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cuff PIC 107001
Drapes Pajunk 021151-1501
Ethanol 70% Sigma Aldrich EX0281
Gogless Univet 559G.00.00.201
Kimwipes Amoos 5601856202331.00
MSOT iThera MSOTAcuity
Stabilizing arm ITEM Self designed and assemble
Ultrasound gel Parker Laboratories 308
Waxing cream Veet kkdg08hagd

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बायोइंजीनियरिंग अंक 184
संवहनी अनुसंधान में कार्यात्मक इमेजिंग के लिए मल्टीस्पेक्ट्रल ऑप्टोएकोस्टिक टोमोग्राफी
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Granja, T., Faloni de Andrade, S.,More

Granja, T., Faloni de Andrade, S., Rodrigues, L. M. Multispectral Optoacoustic Tomography for Functional Imaging in Vascular Research. J. Vis. Exp. (184), e63883, doi:10.3791/63883 (2022).

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