Дю-прижигание на мышиной модели анкилозирующего спондилоартрита
Summary
В данной работе подробно описаны операционные процедуры и меры предосторожности, которые необходимо предпринять во время прижигания ду-оксисессора при лечении анкилозирующего спондилоартрита у подопытных мышей.
Abstract
Анкилозирующий спондилит (АС) – это прогрессирующая и инвалидизирующая форма артрита, которая в первую очередь поражает осевой скелет. Это заболевание в основном поражает позвоночник и крестцово-подвздошный сочленение. Сращение позвоночника и крестцово-подвздошного сочленения может произойти на поздней стадии заболевания, что приводит к тугоподвижности позвоночника и кифозу, а также затруднению ходьбы, что серьезно сказывается на качестве работы и повседневной деятельности и накладывает тяжелую нагрузку на пациента, семью и общество. Все большее внимание уделяется немедикаментозной терапии как альтернативной терапии АС. Прижигание – это древняя терапевтическая техника, используемая в традиционной китайской медицине (ТКМ). Дю-прижигательная терапия, уникальное и инновационное наружное лечение, разработанное на основе обычного прижигания, оказывает определенное терапевтическое воздействие на АС. Дю-прижигание умело сочетает в себе совместимые методы ТКМ для интеграции меридианов, акупунктурных точек, китайской фитотерапии и прижигания. В данной работе подробно описаны операционные процедуры и меры предосторожности, которые необходимо предпринять во время прижигания ду-коксесоса у подопытных мышей, чтобы обеспечить экспериментальную основу для изучения механизма прижигания ду-оксижига при лечении АС.
Introduction
Анкилозирующий спондилит (АС) – это прогрессирующая и инвалидизирующая форма артрита, которая в первую очередь поражает осевой скелет. Согласно последнему эпидемиологическому исследованию, ~0,01%-1,8% людей в мире страдаютэтим состоянием1, большинство из которых молодые мужчины (соотношение мужчин и женщин ~2-3:1)2. Заболеваемость АС в китайской популяции составляет 0,2%-0,4%. Это заболевание в основном поражает позвоночник и крестцово-подвздошный сочленение. Спондилодез позвоночника и крестцово-подвздошного сочленения может произойти на поздних стадиях заболевания, что приводит к тугоподвижности позвоночника и кифозу, а также затруднению ходьбы, что серьезно влияет на качество работы и повседневной деятельности и ложится тяжелым бременем на пациента, семью и общество1. В настоящее время не существует окончательного решения проблемы АС, и предлагаемые методы лечения, как фармакологические, так и нефармакологические, в первую очередь направлены на облегчение боли, замедление прогрессирования заболевания и улучшение качества жизни. В последние годы, в связи с тем, что фармакотерапевтические возможности былиочень ограничены, все большее внимание уделяется нефармакотерапии, которая стала альтернативной терапией АС. В Китае пациенты часто предпочитают наружное лечение, состоящее из традиционной китайской медицины (ТКМ), которое имеет незначительные побочные эффекты и большое удобство во время лечения.
Прижигание – это древняя терапевтическая техника, используемая в ТКМ. Дю-прижигание – это техника наружного лечения, состоящая из «лечебного прижигания с пеной» на сегменте позвоночника меридиана Дю. Он в основном используется при лечении АС и показал свою безопасность и эффективность. По сравнению с обычным прижиганием, Du-прижигание имеет характеристики широкой площади прижигания, большого конуса моксы, сильной огневой мощи и высокой температуры4. Систематический обзор и мета-анализ свидетельствуют о том, что прижигание является эффективным дополнительным лечением АС5. Недавнее исследование подтвердило, что клинические симптомы и некоторые воспалительные факторы у пациентов с синдромом Аспергера были улучшены с помощью прижигания6. Исследования показали, что Du-прижигание может увеличивать содержание в мозге β-эндорфина и оказывать центральное обезболивающее действие7, подавлять экспрессию гена HLA-B27 8 и задерживать частоту рецидивов АС. Дю-прижигание также оказывает улучшающее действие на прогрессирование АС, снижая воспалительный индекс СОЭ (СОЭ) и уровни С-реактивного белка (СРБ), С-концевого пептида коллагена I типа (CTX-I) и белка Dickkopf1 (DKK1)9,10.
Другое клиническое исследование показало, что Du-moxiburnion может дополнительно регулировать неупорядоченные субпопуляции Т-клеток, Ig и комплемент C3 для балансировки иммунногомеханизма. С точки зрения метаболизма костной ткани, прижигание может ингибировать повышение уровня щелочной фосфатазы (ЩФ) и фосфора в сыворотке крови (S-P), повышения уровня кальция в сыворотке крови (S-Ca), минеральной плотности костной ткани (МПК) и прочности костей12. Кроме того, Du-прижигание может восстанавливать функцию позвоночника в нескольких точках, чтобы облегчить симптомы усталости у пациентов с синдромом Аспергера13. Некоторые исследования на животных выявили потенциальный механизм прижигания при лечении АС. Исследование показало, что прижигание значительно улучшило общее состояние здоровья, уменьшило уровень толщины лапы и снизило уровни IL-1β, PGE2, IL-6 и TNF-α в образцах ткани связок позвоночника. Анализ метаболических путей связал идентифицированные метаболиты с циклом ТСА, а также с липидным, аминокислотным, кишечной флорой и пуриновым метаболизмом14. Другое исследование показало, что прижигание подавляет экспрессию провоспалительных цитокинов, IL-1β, TNF-α, IL-17 и IL-6; снижение уровней мРНК RANKL, RANK, ALP и OCN; и улучшили гистопатологические признаки у мышей с синдромом Аспергера15.
Хотя эти исследования показывают, что прижигание может быть эффективным при лечении АС, необходимы дополнительные исследования, чтобы подтвердить эти результаты и определить оптимальный протокол лечения прижигания у пациентов с АС. Наша команда создала и модифицировала прижигание, основанное на базовой теории и практическом действии традиционного китайского прижигания, которое широко проводится и применяется в китайской клинической практике уже более 35 лет. Несмотря на то, что существует мало высококачественных исследований по лечению АС с помощью Du-moxiburnion, его показания к лечению АС подтверждены доказательствами. Однако механизм лечения АС с помощью Du-прижигания заслуживает дальнейшего изучения. Исследование на животных является важным методом изучения механизма Du-прижигания при лечении АС. Клиническое действие Du-прижигания является относительно зрелым, но редко используется при изучении механизма в экспериментах на животных. В данной работе подробно описана операция и меры предосторожности, которые необходимо предпринять во время Du-прижигания при лечении экспериментальных мышей с АС.
Protocol
Representative Results
Discussion
Клинически АС проявляется в виде отека спины, поясницы и суставов, а в тяжелых случаях может возникать деформация позвоночника и ригидность суставов26. Ранняя диагностика и лечение могут улучшить качество жизни, снизить показатели инвалидности и улучшить прогнозы пациент?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана Общей программой Национального фонда естественных наук Китая (No 82174491) и Академической школой наследования Школы традиционной китайской медицины Цилу (No 82174491). Лу Вэйхань [2020]132). Спасибо Центру лабораторных животных Шаньдунского университета традиционной китайской медицины за предоставление нам экспериментальных условий.
Materials
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
References
- Sieper, J., Poddubnyy, D. Axial spondyloarthritis. Lancet. 390 (10089), 73-84 (2017).
- Lee, W., Reveille, J. D., Weisman, M. H. Women with ankylosing spondylitis: a review. Arthritis Rheum. 59 (3), 449-454 (2008).
- Sari, &. #. 3. 0. 4. ;., Öztürk, M. A., Akkoç, N. N. of ankylosing spondylitis. Turk J Med Sci. 45 (2), 416-430 (2015).
- Zhang, L., et al. Governor vessel moxibustion: Ancient Chinese medical technology with new vitality. Chin J Integr Med. 23 (5), 396-400 (2017).
- Hu, J., et al. Moxibustion for the treatment of ankylosing spondylitis: a systematic review and meta-analysis. Ann Palliat Med. 9 (3), 709-720 (2020).
- Liu, Y., Wang, P., Sun, Y. Y., Qu, J., Li, M. Efficacy of thunder-fire moxibustion in treating ankylosing spondylitis of kidney deficiency and governor meridian cold and its influence on TNF-α and RANKL: study protocol for a prospective, nonblinded, single-center, randomized controlled trial. Trials. 23 (1), 344 (2022).
- Chong, G. Q., Ma, Y., Sun, H. S., Zhang, T., Peng, W. Study on clinical and analgesic mechanism of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. J Clin Acupunct Moxib. (06), 48-49 (1999).
- Liu, W. Q., Lu, X. H. Clinical observation of Melilotus extract tablets combined with Dujiu for treating ankylosing spondylitis. Pharm Res. 35 (03), 182-184 (2016).
- Zhang, Y. L., Lin, J. H., Zhou, Y. Y., Zhao, G. Q., He, Y. T. Clinical observation of Bushen Qiangdu Zhilou decoction combined Du-moxibustion in treating ankylosing spondylitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 21 (10), 190-194 (2015).
- Guo, L. J., et al. Clinical effect of moxibustion at governor vessel combined with Bushen Quhan Huashi prescription for ankylosing spondylitis and its effect on levels of CTX-I and DKK1 in serum. New Chin Med. 53 (10), 117-121 (2021).
- Deng, Y. X. Governor moxibustion treatment of ankylosing spondylitis the adjustment of the T-cell subsets observed. J Practical Tradi Chin Inter Med. 26 (18), 77-78 (2012).
- Wang, Y. Q. Mechanism of exercise combined with moxibustion in the treatment of osteoporosis in castrated rats. Chin J Gerontol. 37 (04), 839-840 (2017).
- Ren, J. Y., Li, F., Yan, J., Wan, C., Cai, L. Clinical study of Du-moxibustion combined with needling Huatuo Jiaji acupoint in the treatment of AS of kidney-Yang deficiency. J Clin Acupunct Moxib. 35 (06), 41-44 (2019).
- Xu, X., et al. Metabolomic analysis of biochemical changes in the tissue and urine of proteoglycan-induced spondylitis in mice after treatment with moxibustion. Integr Med Res. 10 (1), 100428 (2021).
- Xu, X., et al. Moxibustion attenuates inflammation and alleviates axial spondyloarthritis in mice: Possible role of APOE in the inhibition of the Wnt pathway. J Tradit Complement Med. 12 (5), 518-528 (2022).
- Li, X., et al. Inflammation intensity-dependent expression of osteoinductive wnt proteins is critical for ectopic new bone formation in ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 70, 1056-1070 (2018).
- Cui, H., et al. CXCL12/CXCR4-Rac1-mediated migration of osteogenic precursor cells contributes to pathological new bone formation in ankylosing spondylitis. Sci Adv. 8 (14), eabl8054 (2022).
- Braem, K., Lories, R. J. Insights into the pathophysiology of ankylosing spondylitis: contributions from animal models. Joint Bone Spine. 79 (3), 243-248 (2012).
- Mikecz, K., Glant, T. T., Poole, A. R. Immunity to cartilage proteoglycans in BALB/c mice with progressive polyarthritis and ankylosing spondylitis induced by injection of human cartilage proteoglycan. Arthritis Rheum. 30, 306-318 (1987).
- Li, Z., et al. Tenascin-C-mediated suppression of extracellular matrix adhesion force promotes entheseal new bone formation through activation of Hippo signalling in ankylosing spondylitis. Ann Rheum Dis. 80 (7), 891-902 (2021).
- Glant, T. T., Cs-Szabo´, G., Nagase, H., Jacobs, J. J., Mikecz, K. Progressive polyarthritis induced in BALB/c mice by aggrecan from human osteoarthritis cartilage. Arthritis Rheum. 41, 1007-1018 (1998).
- Hu, B., Li, Y., Tan, J. Research progress of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. Rheum & Arthritis. 11 (05), 77-80 (2022).
- Yang, Y., Dong, Q., Li, R. Matrine induces the apoptosis of fibroblast-like synoviocytes derived from rats with collagen-induced arthritis by suppressing the activation of the JAK/STAT signaling pathway. Int J Mol Med. 39 (2), 307-316 (2017).
- Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J Neurosci Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
- Liu, P., et al. A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis. J Orthop Surg Res. 16 (1), 541 (2021).
- Taurog, J. D., Chhabra, A., Colbert, R. A. Ankylosing spondylitis and axial spondyloarthritis. N. Engl. J. Med. 374, 2563-2574 (2016).
- Schett, G., et al. Enthesitis: From pathophysiology to treatment. Nat. Rev. Rheumatol. 13, 731-741 (2017).
- Duan, W. X., et al. Effect of different concentrations of Moxa-smoke on lung function and TNF-α and IL-1 β levels in serum and lung tissues in normal rats. Zhen Ci Yan Jiu [Acupuncture Research]. 43 (2), 98-103 (2018).
- Callhoff, J., Sieper, J., Weiß, A., Zink, A., Listing, J. Efficacy of TNFα blockers in patients with ankylosing spondylitis and non-radiographic axial spondyloarthritis: a meta-analysis. Ann Rheum Dis. 74 (6), 1241-1248 (2015).
- Schinocca, C., et al. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview. Front Immunol. 12, 637829 (2021).
- Gravallese, E. M., Schett, G. Effects of the IL-23-IL-17 pathway on bone in spondyloarthritis. Nat Rev Rheumatol. 14 (11), 631-640 (2018).
- Kenna, T. J., et al. Enrichment of circulating interleukin-17-secreting interleukin-23 receptor-positive γ/δ T cells in patients with active ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 64 (5), 1420-1429 (2012).
- Poddubnyy, D., Sieper, J. Treatment of axial spondyloarthritis: what does the future hold. Curr Rheumatol Rep. 22 (9), 47 (2020).
- van der, H. D., et al. Ixekizumab, an interleukin-17A antagonist in the treatment of ankylosing spondylitis or radiographic axial spondyloarthritis in patients previously untreated with biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (COAST-V): 16 week results of a phase 3 randomised, double-blind, active-controlled and placebo-controlled. Lancet. 392 (10163), 2441-2451 (2018).
- Fu, Y. S., et al. Pharmacological properties and underlying mechanisms of curcumin and prospects in medicinal potential. Biomed Pharmacother. 141, 111888 (2021).
- Hassan, A. S., Hofni, A., Abourehab, M. A. S., Abdel-Rahman, I. A. M. Ginger extract-loaded transethosomes for effective transdermal permeation and anti-inflammation in rat model. Int J Nanomedicine. 18, 1259-1280 (2023).
