Summary

강직성 척추염의 마우스 모델에서의 Du-moxibustion

Published: October 27, 2023
doi:

Summary

이 논문은 실험용 마우스의 강직성 척추염 치료에서 Du-moxibustion 동안 취해야 할 수술 절차와 예방 조치를 자세히 설명합니다.

Abstract

강직성 척추염(AS)은 주로 축 골격에 영향을 미치는 점진적으로 악화되고 무력화되는 형태의 관절염입니다. 이 질병은 주로 척추와 천장관절을 침범한다. 말기에는 척추와 천장관절의 유합이 일어나 척추 경직과 후만증, 보행의 어려움 등이 발생할 수 있으며, 이는 업무의 질과 일상생활에 심각한 영향을 미치고 환자와 가족, 사회에 큰 부담을 줍니다. AS의 대체 요법으로 비약물 요법에 대한 관심이 높아지고 있습니다. 뜸은 중국 전통 의학(TCM)에서 사용되는 고대 치료 기법입니다. 듀뜸 요법은 일반 뜸을 기반으로 개발된 독특하고 혁신적인 외부 치료법으로 AS에 확실한 치료 효과가 있습니다. Du-moxibustion은 TCM의 호환 기술을 능숙하게 결합하여 경락, 경혈, 한약 및 뜸을 통합합니다. 본 논문은 AS의 치료에서 Du-moxibustion의 메커니즘 연구를 위한 실험적 기초를 제공하기 위해 실험용 마우스에서 Du-moxibustion 동안 취해야 할 수술 절차 및 주의사항을 자세히 설명합니다.

Introduction

강직성 척추염(AS)은 주로 축 골격에 영향을 미치는 점진적으로 악화되고 무력화되는 형태의 관절염입니다. 최신 역학 조사에 따르면, 전 세계 인구의 ~0.01%-1.8%가이 질환을 앓고 있으며1, 그 중 대부분은 젊은 남성입니다(남녀 비율은 ~2-3:1)2. 중국 인구의 AS 발생률은 0.2%-0.4%입니다. 이 질병은 주로 척추와 천장관절을 침범한다. 말기에는 척추와 천장관절의 유합이 일어나 척추 경직과 후만증, 보행의 어려움 등이 발생할 수 있으며, 이는 업무의 질과 일상생활에 심각한 영향을 미치고 환자와 가족, 사회에 큰 부담을 준다1. 현재 AS에 대한 확실한 해결책은 없으며, 제공되는 약리학적 및 비약물적 치료법은 주로 통증 완화, 질병 진행 지연 및 삶의 질 향상에 중점을 둡니다. 최근 몇 년 동안 약물 요법 옵션이 매우 제한적이었기 때문에3 AS의 대체 요법이 된 비약물 요법에 대한 관심이 높아지고 있습니다. 중국에서는 환자들이 종종 중국 전통 의학(TCM)으로 구성된 외부 치료를 선호하는데, 이는 부작용이 적고 치료 중 편의성이 매우 높습니다.

뜸은 한의학에서 사용되는 고대 치료 기법입니다. Du-moxibustion은 Du meridian의 척추 분절에 “거품이 있는 약용 뜸”으로 구성된 외부 치료 기술입니다. 주로 AS 치료에 사용되며 안전성과 효과를 보여주었습니다. 일반 뜸에 비해 두뜸은 넓은 뜸 면적, 큰 뜸 원뿔, 강한 화력 및 고온4의 특성을 가지고 있습니다. 체계적 문헌고찰 및 메타 분석에 따르면 뜸은 AS5에 대한 효과적인 보완 치료법이다. 최근 연구에 따르면 AS 환자의 임상 증상과 일부 염증 요인이 뜸에 의해 개선되는 것으로 확인되었다6. 연구에 따르면 듀뜸은 뇌에서 β-엔돌핀의 함량을 증가시키고 중추 진통 효과를 발휘하며7 HLA-B27 유전자의 발현을 하향 조절하고8 AS의 재발률을 지연시킬 수 있다. Du-moxibustion은 또한 염증 지수 ESR(ESR)과 C-반응성 단백질(CRP), I형 콜라겐의 C-말단 펩타이드(CTX-I) 및 Dickkopf1 단백질(DKK1)9,10의 수준을 감소시켜 AS의 진행을 개선하는 효과가 있습니다.

또 다른 임상 연구에서는 Du-moxibustion이 무질서한 T 세포 하위 집합인 Ig를 추가로 조정하고 C3를 보완하여 면역 메커니즘의 균형을 맞출 수 있음을 보여주었습니다11. 뼈 대사 측면에서 뜸은 혈청 알칼리성 인산가수분해효소(ALP)와 혈청 인(S-P)의 증가를 억제하고 혈청 칼슘(S-Ca), 골밀도(BMD) 및 골강도를 증가시킬 수 있다12. 또한, 두뜸은 여러 지점에서 척추 기능을 회복시켜 AS 환자의 피로 증상을 완화할 수 있다13. 일부 동물 연구에서는 AS를 치료하는 데 있어 뜸의 잠재적 메커니즘이 밝혀졌습니다. 한 연구에 따르면 뜸은 척추의 인대 조직 샘플에서 전반적인 건강 상태를 크게 개선하고 발 두께를 줄이며 IL-1β, PGE2, IL-6 및 TNF-α 수치를 감소시키는 것으로 나타났습니다. 대사 경로 분석은 확인된 대사 산물을 TCA 회로뿐만 아니라 지질, 아미노산, 장내 세균총 및 퓨린 대사와 연결시켰다14. 또 다른 연구에 따르면 뜸은 전염증성 사이토카인, IL-1β, TNF-α, IL-17 및 IL-6의 발현을 억제했습니다. RANKL, RANK, ALP OCN의 mRNA 수준을 감소시켰습니다. AS 마우스15에서 조직병리학적 특징을 개선하였다.

이러한 연구는 뜸이 AS 치료에 효과적일 수 있음을 시사하지만, 이러한 결과를 확인하고 AS 환자의 뜸에 대한 최적의 치료 프로토콜을 결정하기 위해서는 더 많은 연구가 필요합니다. 우리 팀은 35년 이상 중국 임상 실습에서 널리 수행되고 적용되어 온 중국 전통 뜸의 기본 이론과 실제 작동을 기반으로 뜸 요법을 만들고 수정했습니다. 듀뜸에 의한 AS 치료에 대한 양질의 연구는 거의 없지만, AS의 치료에 대한 적응증은 증거에 의해 뒷받침되었습니다. 그러나 Du-moxibustion으로 AS를 치료하는 메커니즘은 추가 연구가 필요합니다. 동물 연구는 AS 치료에서 Du-moxibustion의 메커니즘을 탐구하는 중요한 방법입니다. Du-moxibustion의 임상 운영은 비교적 성숙하지만 동물 실험에서 메커니즘 연구에 거의 사용되지 않습니다. 이 논문은 AS 실험 마우스의 처리에서 Du-moxibustion 동안 취해야 할 작동 및 예방 조치에 대해 자세히 설명합니다.

Protocol

모든 동물실험은 산둥중의학대학 실험동물복지윤리심의위원회의 승인을 받았다(No. SDUTCM20230831301). 1. 동물 준비 실험군과 집단당 동물의 수를 미리 결정한다. 수컷 BALb/c 마우스를 선택하여 22 ± 1 °C의 일정한 온도, 60 ± 5%의 일정한 습도 및 12시간의 일주기 조명 환경에서 보관합니다. 2. AS 마우스 모델 구축 <p …

Representative Results

PG에 의해 유발된 모델 마우스는 사지와 발가락의 발적과 부종을 특징으로 하는 말초 관절염 증상을 보였고, AS의 발현과 매우 유사한 14주차에 점차적으로 축성 관절염이 발생했다. 따라서, AS 마우스 모델은 마지막 주사 후 14주에 관절염 지수(AI)가 3점 이상이면 성공한 것으로 간주되었다22. 쥐의 발이 부어오른 것처럼 보이면 일주일에 한 번 총 3회 두뜸 치료를 실시하였다. 치료 …

Discussion

AS는 임상적으로 등, 요추 및 관절 부종 통증으로 나타나며, 심한 경우 척추 기형 및 관절 경직이 발생할 수 있다26. 조기 진단과 치료는 삶의 질을 향상시키고, 장애율을 낮추며, AS 환자의 예후를 개선할 수 있습니다. 중국 전통 의학(TCM)에 따르면 AS는 신장과 두경락의 양(陽)이 결핍되어 내부에 냉악이 축적되어 발생하는 것으로 알려져 있습니다. TCM은 경락의 개념에 기초한 뜸이 …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (No.82174491)의 일반 프로그램 (No.82174491)과 Qilu School of Traditional Chinese Medicine Academic School Inheritance Project (No. Lu Weihan [2020]132). 실험 조건을 제공해 주신 Shandong University of Traditional Chinese Medicine의 Laboratory Animal Center에 감사드립니다.

Materials

10% EDTA Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China
alcohol pads HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China
anesthesia machine Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK
centrifuge tubes Axygen, Corning, NewYork, UAS
complete Frech's adjuvant (CFA) aladdin,Shanghai, China F393378
cotton ball Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cotton gauze Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cutting board self-preparation
decorin from bovine articular cartilage Sigma-Aldrich, MO, USA D8428
depilatory cream Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China
electronic scale Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China
Eppendorf tube Axygen, Corning, NewYork, UAS
eye lubricant Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China
ginger self-preparation
GraphPad Prism 7 software GraphPad Software,Boston, USA
hair clipper Super human Group CO LTD, Jinhua, China
heating pads Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China
incomplete Freund’s adjuvant (IFA) aladdin,Shanghai, China F393371
injection syringe Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China
isoflurane Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China R510-22-10
joss stick Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China
juicer Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China
knife self-preparation
lighter Zhejiang tiger-lighter Co. LTD
mortar Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China
Mouse IL-17 ELISA Kit absin, Shanghai, China abs520009-96T
Mouse TNF-α ELISA Kit Wuhan Sanying, Wuhan, China KE10002
mulberry paper Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China
OFT Xinruan,Shanghai, China XR-XZ301
paper cup self-preparation
pipettes OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK
refined moxa velvet self-preparation
rotarod Xinruan,Shanghai, China XR-6C
scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD
scissors Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China
semi-automatic paraffin sectioning machine Leica Camera AG, Watznach, Germany
SPSS 25.0 software International Business Machines Corporation, NewYork, UAS
TCM powder self-preparation
tips Biosharp, Labgic, Beijing, China
writing brush Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China

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Yu, W., Li, X., Jia, Z., Hou, Y., Dong, T., Wang, X., Liu, Y., Yang, J. Du-Moxibustion in a Mouse Model of Ankylosing Spondylitis. J. Vis. Exp. (200), e65586, doi:10.3791/65586 (2023).

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