Du-moxibustione in un modello murino di spondilite anchilosante
Summary
Questo documento descrive in dettaglio le procedure operative e le precauzioni da prendere durante la Du-moxibustione nel trattamento della spondilite anchilosante nei topi da esperimento.
Abstract
La spondilite anchilosante (AS) è una forma di artrite progressivamente peggiorante e invalidante che colpisce principalmente lo scheletro assiale. Questa malattia coinvolge principalmente la colonna vertebrale e l’articolazione sacroiliaca. La fusione della colonna vertebrale e dell’articolazione sacroiliaca può verificarsi nella fase successiva della malattia, con conseguente rigidità spinale e cifosi, nonché difficoltà a camminare, che influisce seriamente sulla qualità del lavoro e delle attività quotidiane e impone un pesante fardello al paziente, alla famiglia e alla società. Una crescente attenzione è stata rivolta alla non-farmacoterapia come terapia alternativa per la SA. La moxibustione è un’antica tecnica terapeutica utilizzata nella Medicina Tradizionale Cinese (MTC). La terapia della du-moxibustione, un trattamento esterno unico e innovativo sviluppato sulla base della moxibustione ordinaria, ha un effetto terapeutico definito sulla SA. La du-moxibustione combina abilmente le tecniche compatibili della MTC per integrare meridiani, agopunti, fitoterapia cinese e moxibustione. Questo articolo descrive in dettaglio le procedure operative e le precauzioni da prendere durante la Du-moxibustione nei topi sperimentali per fornire una base sperimentale per lo studio del meccanismo della Du-moxibustione nel trattamento della SA.
Introduction
La spondilite anchilosante (AS) è una forma di artrite progressivamente peggiorante e invalidante che colpisce principalmente lo scheletro assiale. Secondo l’ultima indagine epidemiologica, ~0,01%-1,8% delle persone nel mondo soffre di questa condizione1, la maggior parte dei quali sono giovani maschi (il rapporto maschi/femmine è ~2-3:1)2. L’incidenza della SA nella popolazione cinese è dello 0,2%-0,4%. Questa malattia coinvolge principalmente la colonna vertebrale e l’articolazione sacroiliaca. La fusione della colonna vertebrale e dell’articolazione sacroiliaca può verificarsi nelle fasi successive della malattia, con conseguente rigidità spinale e cifosi, nonché difficoltà a camminare, che influisce seriamente sulla qualità del lavoro e delle attività della vita quotidiana e impone un pesante onere al paziente, alla famiglia e alla società1. Attualmente, non esiste una soluzione definitiva per la SA e i trattamenti forniti, sia farmacologici che non farmacologici, si concentrano principalmente sull’alleviare il dolore, rallentare la progressione della malattia e migliorare la qualità della vita. Negli ultimi anni, poiché le opzioni farmacoterapeutiche sono state molto limitate3, è stata prestata una crescente attenzione alla non farmacoterapia, che è diventata una terapia alternativa per la SA. In Cina, i pazienti spesso preferiscono un trattamento esterno costituito dalla Medicina Tradizionale Cinese (MTC), che ha effetti collaterali minori e una grande comodità durante il trattamento.
La moxibustione è un’antica tecnica terapeutica utilizzata nella MTC. La du-moxibustione è una tecnica di trattamento esterno che consiste in una “moxibustione medicata con schiuma” sul segmento della colonna vertebrale del meridiano Du. Viene utilizzato principalmente nel trattamento della SA e ha dimostrato sicurezza ed efficacia. Rispetto alla moxibustione ordinaria, la Du-moxibustione ha le caratteristiche di un’ampia area di moxibustione, un grande cono di moxa, una forte potenza di fuoco e un’alta temperatura4. Una revisione sistematica e una meta-analisi suggeriscono che la moxibustione è un trattamento complementare efficace per l’AS5. Uno studio recente ha confermato che i sintomi clinici e alcuni fattori infiammatori dei pazienti con SA sono stati migliorati dalla moxibustione6. Gli studi hanno rivelato che la du-moxibustione può aumentare il contenuto cerebrale di β-endorfine ed esercitare un effetto analgesico centrale7, sottoregolare l’espressione del gene HLA-B27 8 e ritardare il tasso di recidiva di AS. La du-moxibustione ha anche un effetto migliorativo sulla progressione della SA diminuendo l’indice infiammatorio VES (VES) e i livelli di proteina C-reattiva (CRP), peptide C-terminale del collagene di tipo I (CTX-I) e proteina Dickkopf1 (DKK1)9,10.
Un altro studio clinico ha dimostrato che la du-moxibustione può regolare ulteriormente i sottoinsiemi di cellule T disordinate, Ig e C3 del complemento per bilanciare il meccanismo immunitario11. In termini di metabolismo osseo, la moxibustione può inibire l’aumento della fosfatasi alcalina sierica (ALP) e del fosforo sierico (S-P), aumentare il calcio sierico (S-Ca), la densità minerale ossea (BMD) e la resistenza ossea12. Inoltre, la du-moxibustione può riparare la funzione spinale in più punti per alleviare i sintomi di affaticamento nei pazienti con SA13. Alcuni studi sugli animali hanno rivelato il potenziale meccanismo della moxibustione nel trattamento della SA. Uno studio ha indicato che la moxibustione ha migliorato significativamente lo stato di salute generale, ha ridotto i livelli di spessore della zampa e ha diminuito i livelli di IL-1β, PGE2, IL-6 e TNF-α nei campioni di tessuto legamentoso della colonna vertebrale. L’analisi della via metabolica ha collegato i metaboliti identificati al ciclo del TCA, nonché al metabolismo dei lipidi, degli aminoacidi, della flora intestinale e delle purine14. Un altro studio ha dimostrato che la moxibustione sopprime l’espressione di citochine pro-infiammatorie, IL-1β, TNF-α, IL-17 e IL-6; riduzione dei livelli di mRNA di RANKL, RANK, ALP e OCN; e migliorato le caratteristiche istopatologiche nei topi AS15.
Sebbene questi studi suggeriscano che la moxibustione possa essere efficace nel trattamento della SA, sono necessarie ulteriori ricerche per confermare questi risultati e determinare il protocollo di trattamento ottimale per la moxibustione nei pazienti con AS. Il nostro team ha creato e modificato la terapia di moxibustione basata sulla teoria di base e sul funzionamento pratico della moxibustione tradizionale cinese, che è stata ampiamente eseguita e applicata nella pratica clinica cinese per oltre 35 anni. Sebbene esistano pochi studi di alta qualità sul trattamento della SA mediante Du-moxibustione, la sua indicazione nel trattamento della SA è stata supportata da prove. Tuttavia, il meccanismo di trattamento della SA con Du-moxibustione merita ulteriori studi. Lo studio sugli animali è un metodo importante per esplorare il meccanismo della Du-moxibustione nel trattamento della SA. Il funzionamento clinico della Du-moxibustione è relativamente maturo, ma raramente utilizzato nello studio del meccanismo negli esperimenti sugli animali. Questo articolo descrive in dettaglio il funzionamento e le precauzioni da prendere durante la du-moxibustione nel trattamento di topi sperimentali con SA.
Protocol
Representative Results
Discussion
La SA si manifesta clinicamente con dolore alla schiena, lombare e articolare e nei casi più gravi possono verificarsi deformità della colonna vertebrale e rigidità articolare26. La diagnosi e il trattamento precoci possono migliorare la qualità della vita, ridurre i tassi di disabilità e migliorare la prognosi dei pazienti con AS. Secondo la medicina tradizionale cinese (MTC), si ritiene che la SA sia causata da una carenza di Yang nel rene e nel meridiano Du, nonché da un accumulo di male …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato sostenuto dal Programma Generale della Fondazione Nazionale di Scienze Naturali della Cina (No.82174491) e dalla Qilu School of Traditional Chinese Medicine Academic School Inheritance Project (No. Lu Weihan [2020]132). Grazie al Laboratory Animal Center dell’Università di Medicina Tradizionale Cinese dello Shandong per averci fornito le condizioni sperimentali.
Materials
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
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