Du-Moxabustão em Modelo de Espondilite Anquilosante em Camundongos
Summary
Este trabalho descreve em detalhes os procedimentos operacionais e precauções a serem tomadas durante a Dumoxabustão no tratamento da espondilite anquilosante em camundongos experimentais.
Abstract
A espondilite anquilosante (EA) é uma forma de artrite que piora e incapacita progressivamente e afeta principalmente o esqueleto axial. Esta doença envolve principalmente a coluna vertebral e a articulação sacroilíaca. A fusão da coluna vertebral e da articulação sacroilíaca pode ocorrer no estágio mais avançado da doença, resultando em rigidez e cifose da coluna vertebral, bem como dificuldade para deambular, o que afeta seriamente a qualidade do trabalho e das atividades de vida diária e impõe uma pesada sobrecarga ao paciente, à família e à sociedade. Cada vez mais atenção tem sido dada à não-farmacoterapia como terapia alternativa para EA. A moxabustão é uma técnica terapêutica milenar utilizada na Medicina Tradicional Chinesa (MTC). A terapia de dumoxabustão, um tratamento externo único e inovador desenvolvido com base na moxabustão comum, tem um efeito terapêutico definitivo na EA. Du-moxabustão combina habilmente as técnicas compatíveis da MTC para integrar meridianos, acupontos, fitoterapia chinesa e moxabustão. Este trabalho descreve detalhadamente os procedimentos operacionais e precauções a serem tomadas durante a Du-moxabustão em camundongos experimentais para fornecer uma base experimental para o estudo do mecanismo da Du-moxabustão no tratamento da EA.
Introduction
A espondilite anquilosante (EA) é uma forma de artrite que piora e incapacita progressivamente e afeta principalmente o esqueleto axial. De acordo com o último levantamento epidemiológico, ~0,01%-1,8% das pessoas no mundo sofrem dessa condição1, a maioria dos quais são homens jovens (a proporção homem:mulher é ~2-3:1)2. A incidência de EA na população chinesa é de 0,2%-0,4%. Esta doença envolve principalmente a coluna vertebral e a articulação sacroilíaca. A fusão da coluna vertebral e da articulação sacroilíaca pode ocorrer nos estágios mais avançados da doença, resultando em rigidez e cifose da coluna vertebral, além de dificuldade de deambulação, o que afeta seriamente a qualidade do trabalho e das atividades de vida diária e impõe sobrecarga ao paciente, à família e àsociedade1. Atualmente, não há uma solução definitiva para a EA, e os tratamentos oferecidos, tanto farmacológicos quanto não farmacológicos, concentram-se principalmente no alívio da dor, retardando a progressão da doença e melhorando a qualidade de vida. Nos últimos anos, como as opções farmacoterapêuticas têm sido muito limitadas3, cada vez mais atenção tem sido dada à não farmacoterapia, que se tornou uma terapia alternativa para EA. Na China, os pacientes geralmente preferem o tratamento externo que consiste em Medicina Tradicional Chinesa (MTC), que tem efeitos colaterais menores e grande conveniência durante o tratamento.
A moxabustão é uma técnica terapêutica milenar utilizada na MTC. Du-moxabustão é uma técnica de tratamento externo que consiste em “moxabustão medicamentosa com espuma” no segmento da coluna vertebral do meridiano de Du. É usado principalmente no tratamento da EA e tem mostrado segurança e eficácia. Comparada com a moxabustão comum, a Du-moxabustão tem as características de uma ampla área de moxabustão, um grande cone de moxa, forte poder de fogo e alta temperatura4. Uma revisão sistemática e metanálise sugerem que a moxabustão é um tratamento complementar eficaz para EA5. Um estudo recente confirmou que os sintomas clínicos e alguns fatores inflamatórios de pacientes com EA melhoraram com a moxabustão6. Estudos revelaram que a Dumoxabustão pode aumentar o conteúdo cerebral de β-endorfina e exercer um efeito analgésico central7, diminuir a expressãodo gene HLA-B27 8 e retardar a taxa de recorrência da EA. A dumoxabustão também tem um efeito melhorador na progressão da EA, diminuindo o índice inflamatório VHS (VHS) e os níveis de proteína C reativa (PCR), peptídeo C-terminal do colágeno tipo I (CTX-I) e proteína Dickkopf1 (DKK1)9,10.
Outro estudo clínico mostrou que a Dumoxabustão pode ajustar ainda mais os subtipos desordenados de células T, Ig e complemento C3 para equilibrar o mecanismo imunológico11. Em termos de metabolismo ósseo, a moxabustão pode inibir a elevação da fosfatase alcalina (FA) e do fósforo séricos (S-P), aumentar o cálcio sérico (S-Ca), a densidade mineral óssea (DMO) e a resistência óssea12. Além disso, a Dumoxabustão pode reparar a função espinhal em múltiplos pontos para aliviar os sintomas de fadiga em pacientes com EA13. Alguns estudos em animais revelaram o mecanismo potencial da moxabustão no tratamento da EA. Um estudo indicou que a moxabustão melhorou significativamente o estado geral de saúde, reduziu os níveis de espessura da pata e diminuiu os níveis de IL-1β, PGE2, IL-6 e TNF-α nas amostras de tecido ligamentar da coluna vertebral. A análise das vias metabólicas relacionou os metabólitos identificados ao ciclo do ADT, bem como ao metabolismo de lipídios, aminoácidos, flora intestinal e purinas14. Outro estudo mostrou que a moxabustão suprimiu a expressão de citocinas pró-inflamatórias, IL-1β, TNF-α, IL-17 e IL-6; reduziu os níveis de mRNA de RANKL, RANK, ALP e OCN; e melhorou as características histopatológicas em camundongos EA15.
Embora esses estudos sugiram que a moxabustão pode ser eficaz no tratamento da EA, mais pesquisas são necessárias para confirmar esses achados e determinar o protocolo de tratamento ideal para moxabustão em pacientes com EA. Nossa equipe criou e modificou a terapia de moxabustão com base na teoria básica e operação prática da moxabustão tradicional chinesa, que tem sido amplamente realizada e aplicada na prática clínica chinesa há mais de 35 anos. Embora existam poucos estudos de alta qualidade sobre o tratamento da EA por Dumoxabustão, sua indicação no tratamento da EA tem sido apoiada por evidências. No entanto, o mecanismo de tratamento da EA com Dumoxabustão merece mais estudos. O estudo em animais é um método importante para explorar o mecanismo da Du-moxabustão no tratamento da EA. A operação clínica da Du-moxabustão é relativamente madura, mas raramente utilizada no estudo do mecanismo em experimentos animais. Este trabalho descreve em detalhes a operação e as precauções a serem tomadas durante a Du-moxabustão no tratamento de camundongos experimentais EA.
Protocol
Representative Results
Discussion
A EA manifesta-se clinicamente como dor nas costas, lombar e edema articular, podendo ocorrer deformidade da coluna vertebral e rigidez articular em casos graves26. O diagnóstico e o tratamento precoces podem melhorar a qualidade de vida, reduzir as taxas de incapacidade e melhorar o prognóstico de pacientes com EA. De acordo com a medicina tradicional chinesa (MTC), acredita-se que a EA seja causada por uma deficiência de Yang no rim e no meridiano de Du, bem como um acúmulo de mal frio inter…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi apoiado pelo Programa Geral da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (No.82174491) e pelo Projeto de Herança da Escola Acadêmica de Medicina Tradicional Chinesa da Qilu (No. Lu Weihan [2020]132). Obrigado ao Centro de Animais de Laboratório da Universidade de Medicina Tradicional Chinesa de Shandong por nos fornecer condições experimentais.
Materials
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
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